朱江江
- 作品数：76 被引量：159H指数：8
- 供职机构：西南民族大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项陕西省重大科技创新专项计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 西农萨能羊脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因的原核表达、纯化及多克隆抗体制备
- 2014年
- 在大肠杆菌中表达西农萨能羊脂肪分化相关蛋白(ADRP),并制备其多克隆抗体。以实验室保存的pMD19-T-ADRP质粒为模板,扩增ADRP的CDS区,将其克隆到pET32a(+)载体,阳性克隆转化到大肠杆菌菌株E.coli BL21(DE3)中诱导表达,优化融合蛋白表达条件,使用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白,纯化的ADRP蛋白经复性后免疫兔子制备多克隆抗体,ELISA和Western blot检测血清效价和特异性。结果表明:成功构建pET32a(+)-ADRP原核表达载体并诱导其表达,获得最佳表达条件,即37℃、0.5 mmol/L IPTG诱导6 h;ELISA检测显示抗体效价达1∶64 000;经Western blot鉴定,制备的多克隆抗体能特异性结合原核表达以及乳腺上皮细胞表达的ADRP蛋白。本实验成功表达、纯化了ADRP融合蛋白,获得具高特异性、高效价的兔抗ADRP多克隆抗体。
- 李芳罗军余康许会芬石恒波朱江江
- 关键词：ADRP原核表达多克隆抗体
- 一种适用于牦牛体外受精与胚胎移植的操作台
- 本实用新型涉及生物科技技术领域，具体为一种适用于牦牛体外受精与胚胎移植的操作台，包括装置主体，所述装置主体包括操作台面，所述操作台面底端的四个拐角处皆固定安装有装置支撑腿，所述操作台面的底端通过安装支架固定安装有控制面板...
- 兰道亮吉文汇熊显荣朱江江泽让东科
- 文献传递
- 牦牛酪蛋白基因家族的克隆及组织表达分析
- 2019年
- 本研究旨在克隆牦牛酪蛋白基因家族(CSN1S1、CSN1S2、CSN2和CSN3)的CDS区序列,鉴定其在牦牛不同组织中的表达水平。选取4岁龄左右处于泌乳期的健康类乌齐母牦牛3头,屠宰后分别采集乳腺、心脏、肝脏、骨骼肌组织,分别提取组织总RNA并反转录为cDNA,设计酪蛋白基因家族特异性引物扩增酪蛋白基因家族序列,进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR法分别检测酪蛋白家族基因mRNA水平。结果显示,克隆得到CSN1S1、CSN1S2、CSN2和CSN3基因cDNA序列分别为919、832、805和715bp,其CDS区全长分别为645、669、690和585bp,分别编码214、222、259和194个氨基酸残基。类乌齐牦牛酪蛋白基因家族与黄牛亲缘关系最近,其次是印度水牛,而与单胃动物猪的亲缘关系最远。组织表达结果显示,酪蛋白基因家族在组织中广泛表达,其中在乳腺组织中的表达量最高,其次是骨骼肌组织。在乳腺组织中CSN1S1、CSN1S2、CSN2基因之间表达量差异不显著(P>0.05),但CSN2基因表达量显著高于CSN3基因(P<0.05)。以上结果为酪蛋白基因家族在牦牛乳腺蛋白质代谢调控机制的研究提供了参考依据。
- 王会柴志欣钟金城朱江江张成福
- 关键词：牦牛克隆
- 一种用于南江黄羊的全舍饲管理方法
- 本发明公开了一种用于南江黄羊的全舍饲管理方法，涉及畜牧养殖领域。该方法包括对放牧南江黄羊筛选以及分阶段饲喂，南江黄羊第一阶段的投喂料为：南江黄羊入群后的第1‑7天投喂精料重量为0.3‑0.35kg/只，粗料重量不小于南江...
- 朱江江李柯锐向华石恒波陈瑜王永林亚秋黄炼张倡珲赵旺生俄木曲者郭家中
- 奶山羊精液常温及低温保存稀释液
- 本发明公开了奶山羊精液常温及低温保存稀释液，其主要成分为三羟甲基-氨基甲烷，柠檬酸，果糖，海藻糖，维生素c，牛血清白蛋白，还原型谷胱甘肽，三磷酸腺苷，复合抗生素等，低温保存稀释液中含有卵黄，本发明可将精液以液态形式有效短...
- 罗军王维席利萌孙爽高庆华张伟杨地坤朱江江史怀平
- 文献传递
- 干扰山羊KLF12促进皮下脂肪细胞分化被引量：1
- 2022年
- 【背景】脂肪组织分为皮肤下的皮下脂肪组织(subcutaneous adipose tissue,SAT)和腹部内器官周围的内脏脂肪组织(visceral adipose tissue,VAT),皮下脂肪作为影响肉类美味与否的重要因素,探究皮下脂肪沉积分子调控机制对于育种改良和畜牧业的发展至关重要。Krüppel-like factors 12 (KLF12)是一个进化保守的转录因子,可以在多种细胞类型中表达并控制着广泛的细胞过程。【目的】研究获得山羊KLF12的分子特征并进行生物信息学分析,同时明确KLF12在山羊组织和细胞中的表达模式以及干扰KLF12对山羊皮下脂肪细胞分化的调控作用,为进一步研究KLF12在脂肪沉积过程中的潜在作用提供理论依据。【方法】利用逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法克隆山羊KLF12完整编码序列(coding sequence,CDS)区,使用在线生物信息学分析软件对山羊KLF12核苷酸序列和氨基酸序列进行分析。利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)技术检测KLF12在山羊心脏、肝脏、腹部脂肪、皮下脂肪、臂三头肌、背最长肌等14个组织中的表达水平,以及诱导分化不同时间段KLF12在皮下前体脂肪细胞中的表达水平。随后,试验通过化学合成山羊KLF12小干扰RNA(si-KLF12),使用Lipofectamine RNAiMAX转染试剂将山羊si-KLF12序列转染到体外培养的山羊皮下前体脂肪细胞中。使用100μmol·L-1油酸导液诱导脂肪细胞分化。利用油红O以及Bodipy染色方法和qRT-PCR技术分别从形态学以及分子生物学的角度阐明干扰KLF12对皮下前体脂肪细胞脂滴积聚和脂肪分化标志基因mRNA表达水平的影响。【结果】试验成功获得包含开放阅读框(open reading frame,ORF)(1 209 bp)的山羊KLF12(1 315 bp,编码402个氨基酸)。亚细胞定位结果显示KLF12主要位于细胞核,此外,KLF12无跨膜结构域和信号肽,且在317—341、347—371及377—399氨基酸处存在3个典型的锌指结构域(ZnF;2H2)
- 杜宇王永孟庆勇朱江江林亚秋
- 关键词：山羊分子特征
- 藏山羊GEM基因克隆及组织表达分析
- 2019年
- 本研究旨在克隆获得藏山羊GEM基因序列,预测其生物学功能,并阐明其组织表达特征。利用TA法克隆获得藏山羊GEM基因序列,并利用qPCR技术检测该基因在不同组织中的表达丰度。结果显示,藏山羊GEM基因序列1 096 bp,CDS区为936 bp,共编码311个氨基酸;GEM蛋白具有磷酸化位点和糖基化位点共33个,为不稳定碱性疏水蛋白质,主要在细胞核发挥生物学作用;藏山羊GEM基因的核苷酸序列和氨基酸序列均与反刍动物的序列具有很高的同源性;GEM基因在藏山羊肺组织中高表达(p<0.01),其次高表达于脾组织(p<0.01),均极显著高于其他组织。本研究为进一步了解藏山羊GEM基因功能提供基础数据。
- 许晴王永朱江江张亚楠马洁琼黄凯林亚秋
- 关键词：藏山羊克隆
- SRSF10对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响被引量：4
- 2022年
- 旨在克隆山羊SRSF10基因序列,明确其生物学特性,并通过过表达和干扰手段阐明SRSF10对山羊肌内脂肪细胞分化的影响。本研究以简州大耳羊(Capra hircus)为试验对象,利用RT-PCR技术克隆山羊SRSF10基因序列,并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)技术研究其在成脂诱导分化不同阶段细胞中的表达水平;转染pcDNA3.1-SRSF10过表达载体和SRSF10-siRNA至山羊肌内前体脂肪细胞并诱导分化,通过油红O和Bodipy染色法从形态学上明确其对脂滴积聚的影响;通过qPCR方法检测脂肪细胞分化标志基因表达的变化。结果显示,获得山羊SRSF10基因序列为1026 bp,其中CDS区552 bp,共编码183个氨基酸;SRSF10在诱导分化96 h的肌内脂肪细胞中表达量最高;过表达和干扰山羊SRSF10分别促进和抑制了肌内脂肪细胞中的脂滴积聚;过表达后基因SREBP1、PPARγ和C/EBPα的相对表达量极显著上调(P<0.01),干扰后分化标志基因SREBP1、PPARγ和C/EBPα相对表达水平极显著降低(P<0.01)。结果表明,山羊SRSF10是肌内脂肪细胞分化的正调控作用因子,并且这种调控作用可能主要通过调节SREBP1、PPARγ和C/EBPα的表达来实现。
- 刘珂含王永李艳艳李艳艳朱江江朱江江朱江江熊燕
- 关键词：山羊基因克隆细胞分化
- 肥羔型黑山羊肌肉滴水损失率的分析研究被引量：2
- 2019年
- 对雌雄预成年和雌性成年肥羔型黑山羊(自贡型)肌肉的滴水损失率进行测定,为今后肥羔型黑山羊肉质的评定提供理论参考.结果表明:预成年雌性肥羔型黑山羊背最长肌、股二头肌和臂三头肌的滴水损失率分别是1.46%、1.29%和1.33%,雄性的滴水损失率分别是2.76%、1.59%和1.95%;成年雌性羊分别是1.44%、1.30%和1.35%,肌肉的滴水损失率在不同部位之间的差异显著(P<0.01).所以得出肥羔型黑山羊肌肉的滴水损失率,背最长肌最高,臂三头肌次之,股二头肌最低,且均比较低,反映出肥羔型黑山羊优良的肉质.同时也发现不同性别之间滴水损失率的差异和在不同年龄阶段失水率可能无明显变化,需进一步实验来证明.
- 何长晟王永俄木曲者张林林亚秋范景胜熊朝瑞朱江江
- 关键词：黑山羊肌肉
- 不同蛋白水平颗粒料对西农萨能奶山羊羔羊哺乳期生长发育的影响被引量：5
- 2016年
- 为了筛选西农萨能奶山羊羔羊哺乳期全价颗粒料配方,本试验采用2×3两因子设计,选用出生日期相近（5d之内）、体重相近（3.66±0.69kg）的健康西农萨能奶山羊初生羔羊53只（公羊26只、母羊27只）,按性别和蛋白质水平随机分为6组（A、B、C为三组母羊;D、E、F为三组公羊）,试验期为120d,并分为1~60日龄和61~120日龄两个阶段,两阶段颗粒料苜蓿草粉含量分别为10%和20%,蛋白质水平分别为18%、21%、24%和15%、18%、21%,哺乳期自由采食干草,试验期间采集奶样和饲料样,记录羔羊采食量和生长发育数据。结果表明,试验期间公羔日增重显著高于母羔（P〈0.05）;1~60日龄,A、D组羊羔具有较大的日增重,饲料报酬高,且D组日增重显著高于E、F组（P〈0.05）;61~120日龄,D组具有最大日增重,随着蛋白水平的升高,公羔日增重呈现出降低的趋势,C组母羔显著大于A、B两组（P〈0.05）,公羔间日增重差异不显著（P〉0.05）;饲喂不同蛋白水平颗粒料对哺乳期羔羊腹泻率和血液生化指标无显著影响。试验表明,1~60日龄,蛋白质水平为18%的颗粒料组羔羊生长发育最快,饲料报酬高;61~120日龄,蛋白质水平为21%的颗粒料组母羔增重快。
- 史怀平党立峰马跃王建珏朱江江王鹏飞罗军
- 关键词：蛋白水平生长发育腹泻率
