曹铮 作品数:138 被引量:799 H指数:18 供职机构: 浙江省淡水水产研究所 更多>> 发文基金: 浙江省科技厅重点资助项目 湖州市科技攻关计划项目 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 经济管理 更多>>
鳖源致病性嗜水气单胞菌的分离与鉴定 被引量:4 2014年 从患病中华鳖(Pelodiscus sinensis)肺组织中分离到优势菌1株,进行了表型特征分析和16S r DNA序列测定。结果表明,该菌为气单胞菌属的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),通过对健康中华鳖进行人工感染,发现该菌具有致病性;选取20种常规药敏试纸进行药敏试验,结果表明,该嗜水气单胞菌对庆大霉素、头孢他啶、头孢西丁、链霉素、呋喃妥因敏感,对诺氟沙星、红霉素、阿米卡星、环丙沙星中敏,对其他11种抗生素具有耐药性。 林锋 刘莉 曹铮 叶雪平 郝贵杰 盛鹏程关键词:RDNA 虾鳖混养模式的水质特征及对虾产量的影响 被引量:2 2015年 对不同比例的虾鳖混养模式过程中主要水质指标进行定期监测,并研究捕获时虾的产量及生长情况。结果表明:虾鳖混养塘水体的氨态氮、亚硝酸盐、硫化物含量相对比较稳定,混养塘虾的平均体长、体质量明显优于对照塘,且虾的产量也高于对照塘。虾鳖混养模式一定程度上改善了水质,提高了虾的产量;混养塘中鳖的存在,一定程度上对虾病原传播起到了阻断作用。 林锋 刘莉 曹铮 蔺凌云 盛鹏程 沈芸 王雨辰关键词:凡纳滨对虾 中华鳖 混养模式 水质 siRNA干扰对鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF57基因表达的影响 被引量:2 2022年 研究通过在异育银鲫脊髓细胞系(Spinal cord tissue cell lines of Carassius auratus gibelio,CSC)中对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)ORF57进行RNA干扰,以探究其对CyHV-2病毒复制的影响。首先,以FAM标记的异育银鲫β-actin的siRNA进行CSC细胞转染条件的优化,再将针对CyHV-2 ORF57基因设计的3条siRNA,转染CSC细胞,并进行病毒感染,评估siRNA对病毒复制和致细胞病变的影响。转染条件优化结果显示,在siRNA浓度为80 nmol/L,转染液维持24h后更换维持液,β-actin基因表达量最低且观察到的荧光点数量最多。而ORF57-siRNAs干扰结果显示,ORF57-siRNA-2组表现出了较强的抑制效果,在接毒48h时,ORF57-siRNA-2处理组的ORF57基因表达量降到相对于Mock组的33.55%(P<0.01),并且各ORF57-siRNA组都表现出了延缓CyHV-2致细胞病变的时间和强度,抑制时间可达120h。TCID_(50)结果显示,不同组的ORF57-siRNAs均能降低病毒滴度,其中ORF57-siRNA-2将病毒原液TCID_(50)108.487/mL下降至106.776/mL。研究结果表明,干扰ORF57的表达可大大降低CyHV-2的致细胞病变力和复制率,ORF57在CyHV-2复制与致细胞病变中起重要作用。本研究为CyHV-2基于siRNA技术的抗病毒治疗和弱毒株的改造提供了借鉴。 金李萍 潘晓艺 蔺凌云 姚嘉赟 曹铮 尹文林 赖迎迢 陶家发 刘忆瀚 沈锦玉关键词:RNA干扰 小干扰RNA 淡水鱼类细菌性败血症菌苗浸浴免疫研究 被引量:34 1998年 于1992年12月—1995年12月,采用嗜水气单胞菌TPS-30株制成全菌苗,对本所、绍兴、杭州等地渔场鲫、鲢、鳙等进行浸浴免疫试验和生产性防病试验.(1)网箱试验:将含菌5X109全菌苗按1:10,1:100,1:500稀释,对体重超过10g的健康鲫进行菌苗浓度与浸浴时间、增效剂、高渗剂、加强免疫、连续多批分别浸裕和增氧剂等6项免疫试验.经不同时间的RSP%及部分抗体测定结果表明,在1:10-1:500的浓度中分别浸浴1—60min后,45-188天的RSP达66.7%—100%;菌苗液中加入5x10-6增效剂和2%高渗剂可使RSP提高10%;首次免疫后间隔1-6个月再加强免疫,可使RSP提高及免疫有效期延长;将1:10菌苗连续浸浴鲫15批,其中前10批免疫鱼的RSP可达60%以上;增氧剂直接加入菌苗液中会降低RSP。部分免疫鱼的血清中有微弱的特异抗体.(2)生产性试验表明:7.7ha成鱼池和533ha湖泊的鱼种浸裕免疫后,池塘免疫鱼平均成活率提高15%,用药成本降低;湖泊死鱼数比上年同期减少55.8%。 陈月英 钱冬 沈智华 沈锦玉 曹铮 尹文林 张念慈关键词:细菌性败血症 鱼类 淡水鱼 罗氏沼虾诺达病毒TAS-ELISA检测法的建立及应用研究 被引量:18 2006年 罗氏沼虾肌肉白浊病(Whitish muscle diseases ofMacrobrachium rosenbergii)是近年来流行于罗氏沼虾苗种阶段的严重疾病,该病病原已确定为罗氏沼虾诺达病毒(Macrobrachium rosenbergiiNodavirus,MrNV).作者在病毒超离提纯的基础上,制备了罗氏沼虾诺达病毒兔抗血清,并应用抗罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体2B5,建立了三抗体夹心酶联免疫检测方法(TAS-ELISA).TAS-ELISA最适反应条件为:兔抗体以1μg/mL包板,小鼠单抗2B5的工作浓度为1∶50000,该法检测MrNV的灵敏度达0.98 ng,对WSSV、TSV及其他细菌感染死亡的罗氏沼虾苗没有非特异性反应.通过对2000—2002年病虾及疑似病虾的病毒检测,表明TAS-ELISA法比间接ELISA法和核酸电泳法有更高的阳性检出率和符合率;此外还摸索了降低孵育温度和缩短孵育时间对病毒检测的影响,表明各步孵育温度和时间分别为25℃和20 min对于白浊症状的病苗检测无明显影响,使得本法更加适合于生产实践. 钱冬 刘问 潘晓艺 曹铮 于涟关键词:TAS-ELISA 罗氏沼虾野田村病毒NASBA-LFD检测方法及其检测试剂盒 本发明公开了一种罗氏沼虾野田村病毒NASBA-LFD检测方法及其检测试剂盒。本发明是根据GenBank上公布的罗氏沼虾野田村病毒(MrNV)序列,筛选保守区域设计了MrNV NASBA-LFD反应体系所需的引物与探针;采... 林锋 沈锦玉 刘莉 钱冬 曹铮 王军毅 郝贵杰 盛鹏程 袁雪梅 吴颖蕾中华鳖细菌性疾病免疫防治的研究 被引量:7 2000年 将分离自中华鳖主要细菌性疾病如肠道出血性败血症、鳖穿孔病 (疖疮病 )、红脖子红底板病、鳖腐皮病的四株病原菌 ,在 3.5%福尔马林溶液中 2 4 h全部灭活 ;经灭活的四株菌加入 Al(OH) 3 胶 ,制成总含菌量为 6× 10 9/ m L的四价菌苗 .小白鼠注射疫苗后 2 1~ 35d,对这四株菌的血清凝集抗体效价最高达 2 9,免疫保护率达 10 0 % ,且对四株菌均有保护作用 .鳖免疫后 15d就产生抗体 ,血清中凝集抗体效价高达 2 7,免疫保护率达 10 0 % ,对四株菌均有保护作用 ;同时开展鳖生产性免疫预防试验 ,鳖存活率有较大提高 ,免疫池鳖发病死亡率平均下降 50 % 。 沈锦玉 尹文林 钱冬 曹铮 沈智华关键词:中华鳖 免疫预防 细菌性疾病 红螯螯虾弗氏柠檬酸杆菌病病原的分离与鉴定 被引量:48 2005年 从濒死的红螯螯虾(Cheraxquadricarinatus)的肝胰脏中分离得到可疑病菌L1和L2,经细菌学鉴定2株细菌均为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacterfreundii);经人工感染试验证实L1和L2均导致健康虾发病死亡,其LD50分别为2 2×105CFU/ind、7×105CFU/ind;2株细菌对14种药物的敏感性相似,对9种抗生素敏感,对5种抗生素有抗性。从中筛选出有效药物,应用于生产中取得了较好效果。 沈锦玉 顾志敏 潘晓艺 周保中 尹文林 曹铮关键词:红螯螯虾 病原 药敏试验 6-正戊氧基大黄酸在防治水霉病和小瓜虫病中的应用 本发明公开了6‑正戊氧基大黄酸在防治水霉病以及小瓜虫药物中的新用途。还公开了含有该化合物的防治剂及其制备方法,它是由下列重量百分比的原料组成:大6‑正戊氧基大黄酸15%~50%,表面活性剂5%~10%,溶解剂10~30%... 姚嘉赟 沈锦玉 尹文林 蔺凌云 曹铮 夏炎春 刘忆翰文献传递 抗哈维氏弧菌脂多糖单克隆抗体的制备及其鉴定 被引量:10 2008年 以哈维氏弧菌GYC1108-1细菌颗粒性抗原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,5次免疫后取其脾细胞与SP2/0-Ag-14骨髓瘤细胞融合。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对杂交瘤进行筛选,阳性克隆经3次亚克隆后,获得一株针对GYC1108-1脂多糖(LPS)的特异性单克隆抗体,命名为2 F 9。该株单抗细胞培养上清ELISA效价为1∶1 600,腹水效价为6.4×104,交叉反应结果表明2 F 9除了与测试的多株哈维氏弧菌发生免疫识别外,还与溶藻弧菌、麦氏弧菌和副溶血弧菌代表株发生免疫交叉反应,但不与拟态弧菌、鳗弧菌、嗜水气单胞菌代表株等发生交叉反应。用温和高碘酸氧化法对LPS处理后,GYC1108-1的LPS与2 F 9的反应部分减弱,免疫印迹结果表明2 F9识别LPS的类脂A抗原。用抑制ELISA法半定量检测GYC1108-1培养上清的LPS,测得培养48 h LPS释放量不超过39μg/mL,大大低于使鱼类致死所需的LPS的剂量。 郝贵杰 沈锦玉 潘晓义 曹铮 尹文林关键词:哈维氏弧菌 脂多糖 间接ELISA 单克隆抗体 免疫印迹