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景瑾: 作品数：15 被引量：36H指数：4; 供职机构：南通大学更多>>; 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>

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黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞神经样分化有效组分的研究被引量：9: 2012年; 目的:研究黄芪组分在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)神经样分化的效果。方法:通过贴壁法分离大鼠骨髓中分离bMSCs,传代3次后,流式细胞仪检测bMSCs表面抗原检测纯度。将高效液相色谱(HPLC)法分离的黄芪注射液划分为4个组分,分别使用原注射液量的1/40、1/80和1/160的各组分诱导bMSCs,光镜下观察细胞形态变化;免疫细胞化学方法观察神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF-M)的表达;荧光定量PCR方法测定NSE基因表达。结果:bMSCs表面抗原CD29(96.33%)、CD90(99.41%)均呈阳性表达,CD54(1.91%)、CD11b(1.85%)、CD45(2.04%)无表达;1/40浓度的组分2、3诱导12 h后,镜下观察部分细胞形态开始发生神经元样改变,3 d后绝大部分细胞变化成为神经元样细胞;免疫细胞化学显示NSE、NF均呈阳性,NSE基因表达明显升高。结论:黄芪组分2、3具有诱导体外培养的bMSCs神经样细胞分化的作用。; 曹慧仲晶飞陈中华景瑾谭湘陵; 关键词：骨髓间充质干细胞分化

斯氏艾美耳球虫感染兔肝脏组织超微结构观察被引量：1: 2016年; 为了给兔斯氏艾美耳球虫感染的有效防治方法和途径提供理论依据,试验通过孢子化的斯氏艾美耳球虫卵囊口服感染6只2~3月龄的无球虫新西兰兔,6只不感染兔为阴性对照组,30d后,对其肝脏、胆管以及十二指肠进行超微结构观察比较。结果表明：肝脏、胆管以及十二指肠均出现显著病变,器官和细胞结构严重破坏。肝脏组织中肝细胞结构破坏,细胞器消失,可清晰地观察到斯氏艾美耳球虫的超微结构;胆管上皮细胞亦有部分细胞器消失;十二指肠微绒毛断裂、脱落。说明斯氏艾美耳球虫感染兔后,对兔的消化器官造成了极大的损害。; 景瑾宋鸿雁蒋荧梅邵义祥; 关键词：斯氏艾美耳球虫新西兰兔肝脏胆管十二指肠超微结构

斯氏艾美耳球虫热休克蛋白70基因的克隆及表达分析被引量：4: 2017年; 为了获得斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)的热休克蛋白70(HSP70)的全基因序列,并诱导表达重组HSP70蛋白,试验根据免疫蛋白组学研究的质谱结果获得的部分氨基酸序列和已发布近源物种HSP70蛋白序列设计引物,通过c DNA末端快速扩增法(RACE)获得E.stiedai HSP70的全基因序列,将其连入原核表达载体p ET-28a(+),转化Competent Rosetta2(DE3)p Lys S,通过IPTG诱导表达重组HSP70蛋白,并进行Western-blot分析。结果表明:HSP70序列全长为2 727 bp,最大ORF为2 010 bp。HSP70在诱导后37℃培养4 h条件下有表达,但全部为不溶性表达;在诱导后20℃过夜培养条件下无表达。说明试验成功获得E.stiedai HSP70的全基因序列以及重组HSP70蛋白。; 景瑾张帅仇保丰董蓉莲蒋荧梅朱顺星田颖超刘春吴刘成宋鸿雁邵义祥; 关键词：斯氏艾美耳球虫克隆原核表达重组蛋白

斯氏艾美耳球虫感染兔血常规及肝脏功能分析被引量：5: 2017年; 为了对斯氏艾美耳球虫感染兔的血常规、肝功能和凝血4项进行检测分析。通过孢子化的斯氏艾美耳球虫卵囊口服接种的途径感染8只2月龄的无球虫新西兰兔,8只不感染的设为阴性对照组。感染30 d后,心脏采血采集血液样本,测量血常规、肝功能和凝血4项等血液指标。血液检测结果显示,与肝功能相关的8项指标中,仅有谷氨酰肽转移酶、血清胆碱酯酶差异显著,其余均差异极显著,血常规和凝血4项亦差异极显著。表明兔感染斯氏艾美耳球虫1个月后肝功能严重受损。; 宋鸿雁景瑾蒋荧梅邵义祥; 关键词：斯氏艾美耳球虫新西兰兔血常规肝功能凝血4项

一种小鼠脑部注射用辅助定位装置: 本发明公开了一种小鼠脑部注射用辅助定位装置，包括恒温底板、纵轴移动标尺和夹持组件，所述恒温底板的下表面四角螺纹连接有防滑支脚，且恒温底板的内部安装有恒温加热组件，所述恒温底板的上表面后侧固定有固定组件，所述纵轴移动标尺安...; 缪进王旭景瑾蒋荧梅邵义祥; 文献传递

柔嫩艾美耳球虫江苏株SAG10基因的克隆及分析: 2017年; 根据Gen Bank中已发表的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)SAG10基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从E.tenella江苏株的第2代裂殖子中成功克隆出SAG10基因。将该基因与Gen Bank中国内外不同E.tenella分离株的SAG10基因进行比对,发现E.tenella江苏株与北京株的SAG10基因同源性最高,高达99%,其后依次为杨凌株、豪顿株。4种不同分离株SAG10基因的ORF之间有11个碱基不同,其中3个为无义突变,8个为有义突变。分析4种分离株SAG10基因推导蛋白质的亲水性、抗原指数、表面可及性发现,国内外不同E.tenella分离株SAG10蛋白的抗原性总体比较接近且很强,但国内不同分离株之间的抗原性更加接近,并优于国外的豪顿株,这可能是由于氨基酸突变引起蛋白质的空间构象和亲水性等发生变化而引起。将上述SAG10基因序列与复顶门原虫的其他相关SAGs基因序列进行遗传进化分析,发现Eimeria属球虫SAGs基因之间相对比较保守,且与犬新孢子虫(Neospora caninum)、N.hughesi、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)的SAG基因之间同源性较低,与已有观点一致;但神经肉孢子虫(Sarcocystis neurona)的2条SAG1基因序列却与E.tenella的SAG1基因序列表现出更高的同源性,这与其他研究结论不符。; 仇保丰景瑾董蓉莲宋鸿雁刘春朱顺星邵义祥刘文斌李建; 关键词：柔嫩艾美耳球虫克隆

B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞生长曲线及HSP70表达研究被引量：1: 2021年; 目的探索B6-Co小鼠与正常C57BL/6小鼠眼睑成纤维细胞增殖能力与HSP70蛋白表达的差异。方法C57BL/6(B6)小鼠按雌雄小鼠2∶1的比例配种获取孕鼠;B6-Co小鼠按B6(雄)×B6-Co(雌)=1∶2或B6(雌)×B6-Co(雄)=2∶1比例配种获得孕鼠,取18.5 d的孕鼠腹中胚胎,再取胚胎眼睑组织培养小鼠眼睑成纤维细胞;用免疫荧光、HE染色鉴定原代细胞、观察成纤维细胞形态。根据血球计数板直接计数法观察两种细胞生长曲线的差异,用Real-time PCR和Western blot检测两种细胞中HSP70的表达量。体外构建HSP70基因siRNA干扰载体,Lipofectamin2000转染B6小鼠眼睑成纤维细胞;Real-time PCR和Western blot实验从mRNA和蛋白水平分别检测HSP70的相对表达量,测定其干扰效率;Transwell实验检测B6小鼠眼睑成纤维细胞的迁移能力。结果小鼠眼睑成纤维细胞生长曲线结果表明,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞增殖速度慢于B6小鼠眼睑成纤维细胞(P<0.01)。B6-Co小鼠成纤维细胞中HSP70表达量远远低于B6小鼠成纤维细胞,具有显著性差异。B6小鼠眼睑成纤维细胞转染HSP70 siRNA干扰载体后,siRNA-HSP70-3干扰效率最强,mRNA和蛋白水平均被有效抑制,干扰效率高达70%(P<0.05);siRNA-HSP70组在迁移能力上亦显著低于对照组(P<0.05)。结论HSP70基因及蛋白表达下调影响B6-Co的成纤维细胞生长曲线,构建的siRNA-HSP70-3干扰载体能够有效抑制B6小鼠眼睑成纤维细胞中HSP70基因的表达,并显著抑制细胞迁移。HSP70可能参与成纤维细胞胚胎期发育的调控,是造成其EOB表型的重要原因之一。; 姬桂青邱天景瑾朱顺星邵义祥; 关键词：HSP70 C57BL/6 迁移

C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养与纯化鉴定被引量：2: 2015年; 为了建立一种易于操作,能够获得高纯度、高活力C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养体系,并对分离提取的细胞进行纯化鉴定,试验在无菌环境下取E12.5胎鼠皮肤,剪碎至1 mm2大小,均匀铺于皿中,用含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基连续培养4 d,以胰蛋白酶消化-再贴壁法分离纯化目的细胞,分别以NIH3T3、角质形成性细胞作为阳性与阴性对照,采用免疫荧光、Western-blot检测Vimentin及Keratin的表达情况,以鉴定所分离的细胞及其纯度。结果表明:组织块培养24 h即可见成纤维样细胞爬出,培养96 h细胞生长爬满全皿,经胰酶消化、筛网过滤再贴壁接种后能够获得形态均一、活力旺盛、具有成纤维细胞形态学特征的目的细胞;所分离细胞Vimentin表达阳性率为100%,而Keratin表达阳性率为0;与阴性对照角质形成性细胞相比,C57BL/6分离成纤维细胞和NIH3T3细胞均高表达Vimentin,且差异极显著,有统计学意义。说明以E12.5胎鼠皮肤为材料建立成纤维细胞分离培养体系,所分离培养的成纤维细胞具有更高的细胞活力和细胞纯度。; 王胜洁景瑾杨万路吴刘成邵义祥; 关键词：胚胎成纤维细胞纯化鉴定

鼠痘、小鼠肝炎和鼠仙台病毒感染症的国内流行情况及防控对策被引量：10: 2015年; 为了解鼠痘、小鼠肝炎和鼠仙台病毒感染症这3种新纳入《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》鼠病在国内的流行情况,对这3种鼠病的文献资料进行了收集和分析。重点分析了3种鼠病在国内清洁级及以上级别的实验大、小鼠中的流行情况,同时对如何防控提出了建议和对策。这3种鼠病在国内清洁级或以上级别的实验大、小鼠中均有检出,应进一步提高实验大、小鼠屏障设施建设和管理的标准化和规范化水平,重视微生物监测的作用,有效提高实验大、小鼠的质量。; 仇保丰宋鸿雁董蓉莲顾炳泉景瑾刘文斌邵义祥高逢结李建

HSP90在脓毒症小鼠中的表达及血必净对其表达的影响被引量：1: 2017年; 为了研究热休克蛋白90(HSP90)因子在脓毒症小鼠中的表达水平,并研究血必净干预、治疗对HSP90表达的影响,探讨HSP90因子在脓毒症病程中的生物学意义,试验采用尾静脉注射脂多糖(LPS)建立脓毒症小鼠模型,血必净干预组小鼠腹腔注射10 m L/kg剂量血必净,每日2次,而模型组小鼠予以等量生理盐水处理,采用实时定量PCR(Real time PCR)方法检测两组小鼠心脏和肾脏组织中HSP90 mRNA的相对表达量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组小鼠血清肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)水平及心脏、肾脏组织液中HSP90因子表达水平;采用H.E.染色观察两组小鼠心脏、肾脏组织病理结构。结果表明:小鼠尾静脉注射LPS后,血清Cr和BUN水平出现持续性增高,于18小时达到最高水平,两组小鼠血清BUN、Cr水平最早于注射LPS造模8 h后出现显著差异(P<0.05);在脓毒症小鼠心脏组织中,HSP90 mRNA及蛋白水平均出现明显上调,整体呈先上升后下降的趋势,模型组HSP90 mRNA及蛋白总体水平高于血必净干预组(P<0.05,P<0.01),HSP90 mRNA及蛋白在脓毒症小鼠肾脏组织中的表达水平及变化趋势与其在心脏组织中相似;脓毒症小鼠心、肾组织发生明显炎性反应,可见组织结构异常,而干预组小鼠保持较为完整的心脏、肾脏组织结构,无显著病理学变化。说明脓毒症小鼠心脏、肾脏组织中的HSP90基因和蛋白的表达随脓毒症发生、发展表现不同程度的上升,最早于造模后2小时出现显著增高,表明HSP90因子参与脓毒症发生、发展病程,提示可将HSP90列为脓毒症临床早期检测、诊断指标之一;血必净干预对HSP90因子具有调节作用,能够有效改善脓毒症症状。; 王胜洁景瑾唐广胜吴瑕邵义祥; 关键词：脓毒症血必净

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