才蕾
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 聚乙二醇化尿酸酶体内外稳定性研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究聚乙二醇化尿酸酶体内外稳定性。方法以酶活为指标，考察聚乙二醇修饰尿酸酶和尿酸酶的温度稳定性（4～80℃）、酸碱稳定性、抗胰蛋白酶水解能力和小鼠体内半衰期。结果4～60℃条件下，修饰的尿酸酶的稳定性大于尿酸酶，在70℃时，两者活性均迅速降低。pH5．2～6．0及pH9．2～10．0之间，尿酸酶活性迅速降低，而修饰的尿酸酶却保留了较高的活性。抗胰蛋白酶水解中，尿酸酶在作用200min后，活性降至最高值的20％；而修饰的尿酸酶仍保留70％的活性。体内稳定性试验表明，修饰的尿酸酶和尿酸酶的半衰期分别为1530和45min。结论聚乙二醇修饰可以增加尿酸酶的稳定性和抗胰蛋白酶水解能力，延长体内半衰期。
- 杨剑朱姝才蕾田浤姚文兵
- 关键词：尿酸酶稳定性
- 聚乙二醇修饰尿酸酶的研究(英文)被引量：8
- 2008年
- 目的:为了降低尿酸酶的免疫原性并提高其稳定性,利用PEG修饰剂对尿酸酶进行修饰,以期获得性质更优的治疗痛风的药物。方法:用相对分子质量为40kD,活化基团为羟基琥珀酰亚胺的PEG修饰剂对尿酸酶进行修饰,并比较修饰前后在酶解稳定性、pH稳定性及温度稳定性方面的差异,以及PEG修饰对体内半衰期,免疫原性的影响。结果:发现PEG修饰后尿酸酶的酶解稳定性显著提高,PEG化尿酸酶保留了原有尿酸酶80%的活性,体内半衰期从45min延长至696min。PEG化尿酸酶与抗体的结合能力为原型蛋白的1/8。体内的免疫原性也明显降低。结论:化学修饰后的尿酸酶可望成为潜在的治疗痛风的有效药物。
- 才蕾高向东朱姝王华姚文兵
- 关键词：尿酸酶免疫原性半衰期
- 一种定点引入非天然氨基酸的突变尿酸氧化酶及其制备方法
- 概括的说，本发明涉及保留催化活性的、某些位点突变为非天然氨基酸的尿酸氧化酶蛋白。具体地说，本发明涉及被赋予了新的化学性质的尿酸氧化酶，其含有的非天然氨基酸对叠氮基苯丙氨酸使其可以特异性的与相应的修饰剂相连。
- 姚文兵方正之才蕾陈明杰高向东
- 文献传递
- 氨基末端定点聚乙二醇化尿酸酶的研究被引量：2
- 2009年
- 制备氨基末端定点PEG修饰的尿酸酶,并比较尿酸酶修饰前后的免疫原性差异。采用M_r 20k的mPEG-丙醛选择性修饰尿酸酶的氨基末端;利用source 30Q离子交换层析和sephacryl S-200分子排阻层析分离纯化修饰后尿酸酶;测定修饰前后尿酸酶的酶动力学参数和免疫原性。尿酸酶和N端PEG修饰尿酸酶的SDSPAGE检测显示单一条带,SE-HPLC测定尿酸酶修饰前后的保留时间分别为26.578 min和23.818 min;PEG修饰后尿酸酶的最大反应速度为尿酸酶的80%;PEG修饰后尿酸酶与抗体的结合能力和体内的免疫原性均明显降低。这种方法可用来制备N端PEG定点修饰尿酸酶,修饰后可明显降低尿酸酶的免疫原性。
- 李盈淳朱姝高向东才蕾姚文兵
- 关键词：尿酸酶氨基末端分离纯化免疫原性
