戚益军
- 作品数:16 被引量:170H指数:7
- 供职机构:浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金:教育部跨世纪优秀人才培养计划国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 从云南烟草上检测到的黄瓜花叶病毒亚组II分离物被引量:18
- 2000年
- 在对云南省烟草病毒病的研究中 ,分离到一种直径约 2 6~ 30nm的球形病毒。提纯病毒进行的SDS PAGE发现一条 55kD蛋白带。 55kD蛋白N 端 1 0个氨基酸与CMV亚组II的Q株系外壳蛋白N 端氨基酸同源性为 1 0 0 %。以CMV Q抗血清对 55kD蛋白进行了Westernblot检测 ,发现 55kD蛋白与CMVQ株系抗血清有血清学反应。根据已报道的CMV亚组II外壳蛋白基因序列合成引物 ,采用RT PCR技术扩增到一条约 0 9kb的cDNA条带 ,并进行了克隆及序列测定 ,经Genbank比较 ,发现此 0 9kbcDNA包含一 657bp的外壳蛋白基因 ,其核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与CMV亚组II分离物有极高的同源性 ,分别达 97%~ 98%和 96%~ 99% ,而与亚组I分离物的同源性仅为 75%~ 76%和 78%~79%。因此 ,该球形病毒应为CMV亚组II的一个分离物 ,命名为CMV YNb。
- 李凡周雪平戚益军陈海如李德葆
- 关键词:球形病毒黄瓜花叶病毒植物病毒病
- 蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体制备及检测应用被引量:51
- 2000年
- :用蚕豆萎蔫病毒(BBWV)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得6株能稳定传代并分泌抗BBWV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,单抗腹水ELISA滴度为1:320000~1:640000,各单抗抗体类型均为IgG1。6株单抗与BBWV不同分离物均有反应,而与其它植物病毒无交叉反应。经Westernblot印迹分析表明,此6株单克隆抗体均是针对BBWV447kD的外壳蛋白大亚基的特异性抗体。
- 青玲吴建祥戚益军周雪平李德葆
- 关键词:蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体
- 蚕豆萎蔫病毒2号中国分离物基因组结构与功能研究
- 戚益军
- 关键词:植物病毒蚕豆萎蔫病基因组
- 蚕豆萎蔫病毒中国分离物RNA2全序列及多聚蛋白切割位点被引量:3
- 2000年
- 对蚕豆萎蔫病毒2(BBWV2)分离物B935 RNA2全序列进行了测定,全长由3601个核苷酸组成(不包括3′端Poly(A))。RNA2包含一个长的开读框,该开读框起始于231位,终止于3428位,编码一个分子量为119 ku的多聚蛋白。对外壳蛋白亚基N端氨基酸序列测定表明外壳蛋白大亚基(LCP)和小亚基(SCP)是由119 ku多聚蛋白中谷酰胺与甘氨酸及谷酰胺与丙氨酸之间的切割产生的,LCP含有402个氨基酸,SCP含有197个氨基酸。与蚕豆病毒属(Fabavirus)病毒基因组核苷酸及编码的蛋白质氨基酸序列比较表明,B935与BBWV2分离物及广藿香轻花叶病毒具有很高的同源性,而与BBWV1分离物的同源性较低。B935与豇豆花叶病毒属(Comovirus)和线虫传多面体病毒属(Nepovirus)的基因组结构相似,但序列同源性很低。B935与豇豆病毒属病毒的LCP和SCP氨基酸具有共同的保守序列。用4株单克隆抗体进行TAS-ELISA测定表明B935与BBWV1分离物(NRS和PH3)抗原上有差异。
- 戚益军周雪平薛朝阳李德葆
- 关键词:RNA2
- 产气肠杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆及其表达被引量:4
- 2000年
- 用 PCR方法扩增产气肠杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因 (AL DC) ,得到 0 .78kb的 DNA片段 ,扩增片段重组到依赖 T4 RNA聚合酶的高效表达载体 p QE- 30中 ,在大肠杆菌中得到高效表达 ,酶活性可高达 180 U/m L发酵液 ,经稳定性测定 ,重组菌株在 37℃连续培养至 6
- 郑晓冬陈新爱戚益军
- 关键词:产气肠杆菌Α-乙酰乳酸脱羧酶啤酒酵母
- 蚕豆萎蔫病毒两个分离物的比较研究被引量:2
- 1999年
- 作者对蚕豆萎蔫病毒的两个分离物B935和P158的部分特征作了比较研究;从病毒粒子形态、血清学关系、病毒衣壳蛋白组分和分子量以及病毒核酸组分和分子量这些特征看,B935和P158基本相似。 Northern blot结果表明,B935和P158基因组具有同源性,但其同源性不高,这意味着蚕豆萎蔫病毒种内基因组上可能存在着较大的差异。
- 戚益军周雪平陶小荣李德葆
- 关键词:蚕豆同源性
- 从云南分离的烟草曲顶病毒为菜豆金色花叶病毒属的一个新种被引量:60
- 2001年
- 从我国云南省保山地区烟草上表现曲顶症状的植株上分离获得病毒分离物Y1, 经粉虱传毒及粒子形态观察, 证明为菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒. 用14种单克隆抗体进行三抗体夹心ELISA测定, 结果表明Y1与我国及巴基斯坦、印度等国报道的双生病毒的抗原表位型均不同. 对Y1基因组DNA-A的全序列进行了分析, 全长2746个核苷酸, 其中病毒链含有两个ORF, 互补链含有4个ORF. Y1与其他双生病毒基因组DNA-A全序列、基因间隔区序列及各ORF编码的氨基酸序列的比较分析表明, Y1是一种新的Begomovirus病毒, 定名为烟草曲顶病毒, 英文名为Tobacco curly top virus, 简称TCTV. TCTV全基因组与印度报道的番茄曲叶病毒和番木瓜曲叶病毒的同源性最高, 达85%, 而其CP基因与巴基斯坦棉花曲叶病毒分离物72 b高度同源, 氨基酸水平的同源性达98%.
- 谢艳周雪平张仲凯戚益军
- 关键词:菜豆金色花叶病毒属粉虱传双生病毒
- 蚕豆萎蔫病毒RNA-2编码的多聚蛋白切割位点分析(英文)
- 1999年
- 戚益军周雪平余永杰薛朝阳李德葆
- 关键词:蚕豆
- 杜大长猪IGF—1基因的克隆及其序列分析被引量:8
- 2000年
- 采用TRIzol法从杜大长杂交猪的肝脏中提出总RNA,将其纯化后作为PCR扩增模板 ,以设计的P1(5′-CTACATTCTGTAGTTCTTGTTTCC-3′)为引物合成IGF-I基因cDNA的第1链,再以P1和P2(5′-ATGGCCCTGTGCTTGCTCTCCTT-3′)为引物扩增到大小约为360bp的产和,并将其达隆至pGEM-T载体上。经筛选、酶切、我分析。
- 奚刚戚益军
- 关键词:IGF-1基因肝脏RT-PCR
- 蚕豆萎蔫病毒的研究--基本生物学及基因组RNA-2序列结构分析
- 戚益军
- 关键词:大豆蚕豆萎蔫病毒外壳蛋白