徐祥 作品数:163 被引量:614 H指数:11 供职机构: 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 重庆市科委基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 环境科学与工程 经济管理 更多>>
SELEX实验中两种富集方法的比较 被引量:3 2003年 比较指数富集系统进化配体 (SELEX)实验中 ,液相筛选与固 液相筛选方法的差异对筛选富集库亲和力的影响。液相筛选、膜截留结合核酸的技术路线与固 液相筛选、固相中直接获取结合核酸的途径相比较 ,前一种方法更容易富集到与靶目标结合的目的序列。 胡承香 邸雁飞 朱旭东 顾长国 李磊 吕凤林 梁华平 徐祥 罗艳 刘琛IFN-γ诱导人脐带间充质干细胞移植治疗系统性红斑狼疮 背景:系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是慢性自身免疫型疾病,伴随着多系统和多器官损伤而表现出多种临床表型,常规治疗对部分患者效果不佳或者无效.前期临床试验证实了间充质干细... 何骁 梁东兰 黄宏 徐祥关键词:人脐带间充质干细胞 干扰素-Γ 系统性红斑狼疮 重组原核表达载体pGEX-4T-1-eIF5A的构建及表达 被引量:1 2012年 目的构建人eIF5A基因的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达pGEX-4T-1-eIF5A融合蛋白。方法以pCMV6-XL4-eIF5A作为模板,经PCR技术扩增目的片段,将获得的目的片段重组到原核表达载体pGEX-4T-1上,经酶切鉴定、DNA测序检测插入序列的正确性。将测序正确的重组表达质粒pGEX-4T-1-eIF5A转化到E.coliBL21内,经IPTG诱导后,GSTpull-down后SDS-PAGE电泳分析以及Western blot检测人eIF5A的表达。结果成功构建重组表达质粒pGEX-4T-1-eIF5A,经DNA测序证实插入序列与设计完全一致,GSTpull-down后电泳分析以及Westernblot结果说明大肠杆菌BL21诱导后表达出人eIF5A的glutathioneS-transferase(GST)融合蛋白。功能研究初步证明重组eIF5A在细胞增殖过程中发挥重要作用。结论构建成功的重组原核表达载体能在E.coliBL21内表达eIF5A的GST融合蛋白,为进一步研究人eIF5A蛋白的结构和生理功能如促进创伤修复提供帮助。 邱伟 李向云 王晓慧 徐祥 黄宏 徐云升关键词:质粒 融合蛋白 严重多发伤患者并发症的预测和辅助诊断 被引量:5 2002年 目的 研究严重多发伤患者血浆 TNF- α、IL- 6、IL- 10和 C-反应蛋白对伤后感染并发症的预测和辅助诊断价值。方法 应用 EL ISA法测定 34例 ISS≥ 16分的多发伤患者伤后血浆 TNF- α、IL- 6、IL- 10和 C-反应蛋白的变化 ,同时监控体温和血 WBC,并与 11例健康对照比较 ;应用 ROC曲线进行统计学处理。结果 伤后早期多发伤患者血浆 TNF- α、IL- 6、IL- 10和 C-反应蛋白出现不同程度升高 ;在伤后早期未并发感染前感染患者血浆 TNF- α、IL- 10、CRP以及体温和 WBC与非感染组相比无明显差异 ,待并发感染后则明显升高 ,而血浆 IL- 6在整个观察期间感染组均明显高于非感染组 ;对感染并发症的辅助诊断价值 ,CRP的灵敏度最高 ,体温和 WBC有较高的特异性和阴性预测值 ,IL- 6有较高特异性、阳性预测值和阴性预测值。结论 对多发伤伤后感染并发症的辅助诊断 ,这些指标均有一定的临床价值 ;IL- 6是最好的伤后感染并发症的预测和辅助诊断指标。 徐祥 梁华平 杨文琼 何义平 罗艳 王正国 高劲谋 都定元 李邦春 夏爱莲关键词:多发伤 细胞因子 CRP 创伤小鼠脾细胞核因子-кB的表达及其与SIRS发生的关系 大量的研究表明,严重创伤可致中性粒细胞、单核-巨噬细胞激活并分泌大量炎症介质,该变化在创伤后系统性炎症反应综合征(SIRS)的发生发展过程中,扮演着极为重要的角色。但淋巴细胞在该过程中的作用尚未充分阐明。传统的观点认为,... 罗艳 梁华平 胡承香 耿波 徐祥 熊仁平 王正国文献传递 高糖预处理内皮细胞条件培养基对脐带间充质干细胞增殖和凋亡的影响 为了探讨体外高糖诱发内皮细胞损伤而继发性对人脐带间充质干细胞(humanumbilical cord-derived mesenchymal stem cell,hUC-MSC)增殖和凋亡的影响及其机制,该研究采用酶消化... 徐祥 李循 龙皎月 朱明 邢伟 黄宏关键词:人脐静脉内皮细胞 人脐带间充质干细胞 三七总皂苷抑制Hela细胞增殖的实验研究 被引量:12 2012年 目的:研究三七总皂苷(PNS)抑制宫颈癌Hela细胞增殖的可能机制。方法:MTT法检测不同浓度PNS作用于Hela细胞24、48和72hHela细胞增殖率;检测PNS作用于Hela细胞24h荧光素酶报告基因(LUC)的变化;蛋白质印迹法检测200μg/mL PNS作用于Hela细胞4E-BP1、S6K1、mTOR及其磷酸化水平变化;ELISA法检测PNS作用于Hela细胞24hVEGF的变化。结果:PNS可以明显抑制Hela细胞生长,随时间延长及PNS剂量增加抑制率明显增高;LUC相对光单位值(RLU值)明显低于对照组,其S6K1、4E-BP1、mTOR蛋白表达及其磷酸化水平均明显降低,200μg/mL PNS作用于Hela细胞24h后其VEGF表达明显降低,差异均有统计学意义,P值均<0.01。结论:PNS能抑制Hela细胞增殖,其机制可能是PNS阻断mTOR信号通路,降低mRNA翻译效率,抑制蛋白质翻译起始复合物形成,从而抑制Hela细胞增殖。 邹存华 付婷婷 鲁强 赵淑萍 徐祥关键词:三七总皂苷 HELA细胞 信号通路 PTEN对脂多糖攻击RAW264.7细胞核因子-κB转录活性的影响及其意义 2007年 目的探讨PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)全县对脂多糖(IYS)攻击RAW264.7细胞核因子-κB转录活性的影响。方法NF-κB-LUC质粒与PTEN质粒或其突变质粒分别共转染RAW264.7细胞,通过检测NF-κB反应性荧光素酶报告基因表达,观察PTEN在LPS攻击巨噬细胞时对NF-κB转录激活的影响。结果野生型PTEN过表达可促进LPS诱导的NF-κB活性增强,而突变型PTEN则没有明显作用。结论PTEN可正性调控LPS诱导的NF-κB转录因子的激活,从而有可能在内毒素所诱导的炎症反应中发挥重要的调控作用。 尹华华 夏浩 朱京慈 程晓刚 徐祥 袁科 Qi Wan 李磊关键词:PTEN基因 细胞核因子-ΚB 脂多糖 核因子-κB靶向性寡核苷酸“圈套”策略对创伤性炎症大鼠肝脏损伤的作用 被引量:14 2003年 目的 探讨核因子 κB(NF κB)靶向性寡核苷酸 (ODN )“圈套”策略对创伤性炎症大鼠肝脏损伤的作用。方法 Wistar大鼠 96只 ,随机分成对照组、创伤性炎症组、“圈套”ODN组和变异“圈套”ODN组 ,各组动物分别于术后 3、6、12、2 4、48和 72h分批处死。运用凝胶迁移变动分析 (EMSA)检测创伤性炎症术后肝脏组织NF κB的活性及合成“圈套”ODN的体外竞争抑制试验。检测血清转氨酶水平 ,在光镜下观察肝细胞损伤程度 ,电镜下观察肝脏超微结构改变 ,以线粒体的肿胀程度作为肝细胞损伤的评价指标。结果 创伤性炎症后 3h肝脏NF κB的活性开始升高 ,12h达高峰 ,72h后基本恢复正常。“圈套”ODN在体外能有效地抑制NF κB活性。血清ALT含量在伤后明显上升 ,于 2 4h达高峰 ,肝细胞出现明显的水肿、变性和坏死 ,肝小叶结构破坏明显。“圈套”ODN治疗 6h后 ,大鼠血清ALT水平明显降低 ,肝小叶结构损伤明显好转 ,线粒体的肿胀明显减轻。结论 NF κB靶向性“圈套”ODN通过特异性抑制NF κB活性 。 杨文军 梁华平 徐祥 李德卫 时德 郝天智关键词:创伤性炎症 核因子-ΚB 肝脏损伤 创伤小鼠脾细胞核因子-κB的表达及与全身炎症反应综合征发生的关系 2001年 目的:探讨创伤后不同时相点脾细胞核因子-kappaB(NF-κB)的DNA结合蛋白和NF-κB P^(65)蛋白亚型表达的动态变化。方法:采用小鼠双后肢闭合性砸伤+骨折模型,于创伤后1、4、7d处死动物,分离、纯化脾细胞,提取脾细胞核蛋白。用电泳迁移率改变试验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测NF-κB的DNA结合活性,用免疫蛋白印变法(Western blotting)检测NF-κB P^(65)蛋白亚型表达。结果:NF-κB的DNA结合活性在创伤后1、4、7d表达明显增加。NF-κB P^(65)蛋白亚型在创伤后1、4、7d表达明显增高。结论:创伤可明显增强脾细胞NF-κB的DNA结合活性和P^(65)蛋白亚型的表达,在创伤后淋巴细胞活化及全身炎症反应综合征(SIRS)发生、发展过程中可能起重要作用。 罗艳 梁华平 胡承香 耿波 徐祥 熊仁平 王正国关键词:创伤 脾细胞 核转录因子 全身炎症反应综合征