张宁
- 作品数：2 被引量：18H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- Gateway~技术构建交链孢菌JH505 cDNA文库被引量：18
- 2005年
- Gateway○R技术构建cDNA文库,利用λ噬菌体的位点特异性重组,避免使用限制性内酶切割cDNA,能够解决常规方法构建cDNA文库的技术缺陷。首次应用Gateway○R技术构建交链孢菌cDNA文库,经检测cDNA入门文库的滴度达到1×107cfumL,文库总容量为9×107cfu,平均插入片段为1510bp。通过LR重组把入门文库转换为表达文库,表达文库的滴度为1.58×106cfu/mL,文库总容量为6.32×106cfu,平均插入片段大小为1680bp。表达文库的构建为进一步克隆植物激活蛋白基因打下了基础。
- 龙松华张宁邱德文黎定军黄炜
- 关键词：GATEWAY技术交链孢菌激活蛋白CDNA表达文库
- 利用体外特异位点重组反应构建黄瓜灰霉菌cDNA文库被引量：1
- 2005年
- 体外特异位点重组技术应用于cDNA文库的构建,克服了传统文库构建方法中的常见问题。本研究利用这一技术,以能够分离得到植物激活蛋白的黄瓜灰霉菌(B.cinerea)菌株为材料,用TRIZOL试剂提取总RNA,从中分离纯化出mRNA,用预先接有attB2位点的Oligo(dT)引物和SuperScriptTMⅡ反转录酶合成cDNA,双链cDNA与attB1接头连接,经重组、转化后构建了其cDNA文库。文库滴度为2.3×106pfu/mL,文库总容量达2.53×107。随机挑取24个克隆,经酶切检测,平均插入片断为1466bp,重组率达100%。
- 黄炜张宁龙松华邱德文王纯利
- 关键词：CDNA文库
