张冬娟
- 作品数：10 被引量：57H指数：4
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- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项面向21世纪教育振兴行动计划更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A合成酶2在2型糖尿病db/db小鼠肾脏中的表达变化及意义
- 张冬娟
- 肝X受体上调糖尿病小鼠肾脏脂肪酸合成酶的表达
- 2016年
- 目的探讨肝X受体（liver X receptor，LXR）对糖尿病小鼠肾脏脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，FAS）表达的影响及可能机制。方法在体研究部分：糖尿病db／db小鼠和对照的db／m小鼠分别予以LXR激动剂T0901317（3mg·kg^-1·d^-1）灌胃处理7d，采用免疫组织化学、实时荧光定量PCR、蛋白印迹法检测FAS和活化型固醇调节元件结合蛋白（sterol regulatory element—binding protein-1，SREBP-1）的表达水平。离体研究部分：T0901317（10μmol／L）刺激小鼠近曲小管上皮细胞系（MCT细胞）24h，或转染SREBP-1c表达质粒。LXR或SREBP-1c表达质粒转染人胚。肾细胞系（HEK293细胞）12h，分别采用实时荧光定量PCR、转染荧光素酶报告基因等方法，检测FAS表达和FAS启动子活性水平。结果免疫组化结果显示FAS蛋白主要表达在肾皮质，肾小球表达量较少。同对照组db／m小鼠相比．db／db小鼠肾脏FASmRNA和蛋白水平均明显降低（P〈0．05）；T0901317处理可使db／db小鼠。肾脏FASmRNA表达升高1．3倍（P〈0．01）；db／m小鼠肾脏SREBP-1的mRNA升高5．1倍（P〈0．01），db／db小鼠肾脏SREBP．1的mRNA升高17倍（P〈0．01）；T0901317也能上调MeT细胞FAS的mRNA表达水平，升高1．5倍（P〈0．05）；过表达SREBP-1c也可使MCT细胞中FASmRNA的表达量增加1．8倍（P〈0．05）：不仅如此，LXR的激活、过表达LXR或SREBP-1c能增加HEK293细胞FAS基因启动子活性（P〈0．01）。结论LXR能够通过其本身的直接作用和SREBP-1c的间接作用上调肾脏FAS的表达，LXR可能介导了糖尿病肾脏的脂质代谢紊乱过程。
- 王冰程丽静高政南张晓燕霍明张冬娟吴静魏明芬
- 关键词：肝X受体固醇调节元件结合蛋白脂肪酸合成酶糖尿病
- 碳水化合物反应元件结合蛋白活性增加在2型糖尿病模型db/db小鼠肝脂质过度沉积中的作用被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨碳水化合物反应原件结合蛋白(carbohydrate response element binding protein,ChREBP)在2型糖尿病小鼠肝中的表达及其在脂质代谢紊乱中的作用。方法:以10～13周龄的雄性C57BL/BKS基因背景的2型糖尿病模型db/db小鼠作为实验组,年龄、性别匹配的db/m小鼠作为对照组。首先用油红O染色的方法检测肝中沉积的中性脂肪。利用免疫组织化学方法确定ChREBP在肝内的表达分布,随后用Western blot及实时荧光定量PCR等方法分析其在db/db小鼠肝中的表达及活性,以及ChREBP靶基因乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-coenzyme A carboxylase 1,Acc-1)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,Fas)与甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase,Gpat)的表达变化。结果:db/db小鼠肝中有明显的脂质沉积现象。ChREBP蛋白弥散表达于正常小鼠肝组织中,在中央静脉周围及汇管区表达较高。在正常小鼠肝细胞内,ChREBP主要存在于胞浆中。但在db/db小鼠肝细胞内,细胞核中的ChREBP水平较对照组小鼠增加了8.2倍(P<0.01)。与之相一致,db/db小鼠肝中涉及脂质合成的一些重要的ChREBP靶基因(包括Acc-1,Fas和Gpat)的表达水平分别增加了2倍(P<0.05)、1.7倍(P<0.05)、4.2倍(P<0.05)。结论:在2型糖尿病小鼠,肝ChREBP的表达和活性的显著增加,激活了一系列与脂质合成相关基因的表达,进而促进脂肪肝的形成。本研究提示ChREBP可能成为治疗脂肪肝的潜在靶点。
- 霍明臧会玲张冬娟王冰吴静张晓燕陈丽红李晶杨吉春管又飞
- 关键词：载体蛋白质类脂肪肝葡萄糖脂类
- 肾组织可溶性表氧化物水解酶在蛋白尿诱导的肾损害中的作用
- 王倩王悦张翼李楠刘燕刘博张冬娟孔晓牧管又飞朱毅
- Ⅱ型糖尿病肾病模型db/db小鼠血浆的代谢组学研究被引量：13
- 2012年
- 目的采用基于核磁共振的代谢组学技术研究糖尿病肾病模型db/db小鼠血浆中小分子代谢物的变化。方法用核磁共振技术检测db/db小鼠(6只)和db/m小鼠(6只)血浆中的小分子代谢物,应用模式识别技术对积分数据进行正交偏最小二乘辨别(OPLS-DA)分析及相关性分析,利用MATLAB软件做相关系数图。结果统计分析结果显示,与对照组db/m小鼠相比,试验组db/db小鼠血浆中葡萄糖和氧化三甲胺(TMAO)的含量升高,多种氨基酸含量下降。结合代谢途径分析发现,糖尿病肾病小鼠体内存在氨基酸代谢异常和能量代谢异常,肾脏受到损伤。结论本文所采用的基于核磁共振的代谢组学技术能全面客观地反映糖尿病肾病小鼠血浆中的代谢物变化,潜在的代谢标志物分析及代谢途径探讨将为临床诊断及机制研究提供新思路。
- 孙立业毛璇张冬娟孙博管又飞颜贤忠
- 关键词：DB/DB小鼠糖尿病肾病代谢组学
- 肝X受体的激活对小鼠糖尿病肝脏脂肪酸合成酶表达的调节被引量：11
- 2008年
- 目的探讨肝X受体（LXR）对糖尿病肝脏脂肪酸合成酶（FAS）表达的影响及机制。方法将16周龄、雄性、C57BL／6背景下瘦素受体基因缺陷的db／db小鼠和对照的db／m小鼠，分别予以LXR激动剂T0901317（T0）（3mg·kg^-1·d^-1）或DMSO灌胃处理7d；T0（10μmol／L）刺激人肝癌细胞系HepG2细胞24h。此外，HepG2细胞转染小鼠FAS启动子报告基因表达质粒，同时转染pcDNA3．1表达载体或LXR或活化型固醇调节元件结合蛋白（SREBP—1c）表达质粒12h；采用免疫组织化学方法检测FAS蛋白在肝脏上的表达，实时荧光定量PCR和蛋白印迹方法分别在mRNA和蛋白水平检测FAS和SREBP-1的表达及TO对其表达的影响，荧光素酶报告基因方法检测LXR激动剂和SREBP-1c对小鼠FAS启动子活性的影响。结果免疫组化结果显示FAS蛋白在肝脏广泛表达，主要位于肝细胞胞质内。TO可显著降低db／db小鼠空腹血糖水平[由（12．00±1．06）mmol／L下降到（7．73±0．69）mmol／L，P〈0．01]和糖化血红蛋白水平（由5．67％±0．10％下降到4．87％±0．08％，P〈0．01）。db／db小鼠肝脏FASmRNA水平明显高于db／m小鼠，约为5．5倍（P〈0．01）；在蛋白水平，db／db小鼠肝脏上的FAS也明显高于db／m小鼠。TO处理可使db／m小鼠肝脏FASmRNA表达升高约3．5倍（P〈0．05），可使db／db小鼠肝脏FASmRNA升高约1．7倍（P〈0．05）；TO处理可使db／m小鼠肝脏SREBP-1 mRNA升高约2．4倍（P〈0．05），使db／db小鼠肝脏SREBP-1 mRNA升高约2．1倍（P〈0．01）。TO能够上调HepG2细胞FAS的mRNA表达水平，升高约1．9倍（P〈0．05）；LXR的激活还能显著增加HepG2细胞中FAS基因启动子活性，约为对照组的1．5倍；过表达LXR或SREBP-1c也能增加HepG2细胞FAS基因启动子活性，分别为对照组的1．9倍和1．6倍（均P〈0．01）。结论LXR可能通过其本身的直接作用和SREBP-1c的间接作用上调肝脏FAS�
- 王冰程丽静高政南张晓燕霍明张冬娟吴静魏明芬
- 关键词：糖尿病脂肪肝肝X受体固醇调节元件结合蛋白脂肪酸合成酶
- 蛋白质组学在糖尿病肾病研究中的应用被引量：2
- 2010年
- 糖尿病肾病作为糖尿病的主要并发症之一,是导致终末期肾功能衰竭(end-stage renal disease,ERSD)的最主要原因之一。目前,人们对糖尿病肾病的发病机制尚不完全清楚。近年来蛋白质组学技术逐渐被应用于这一疾病发病机制的研究中,为人们探索糖尿病肾病的发病机制提供了有力的实验依据。本文对蛋白质组学在糖尿病肾病研究中的新近进展进行了综述和讨论,并通过具体实例介绍了如何对蛋白质组学数据进行系统分析,揭示潜在的新调控网络及其生理与病理生理意义,为糖尿病肾病的研究与治疗提供新的思路。
- 张冬娟杨吉春管又飞
- 关键词：蛋白质组学糖尿病糖尿病肾病
- Ⅱ型糖尿病肾病小鼠肾水提物代谢组学研究被引量：6
- 2010年
- 应用基于核磁共振的代谢组学方法研究Ⅱ型糖尿病模型db/db小鼠已发展到糖尿病肾病时肾脏代谢表型的变化.结合偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),结果显示,与正常组相比,模型组肾水提物中的乳酸和糖等代谢物的含量显著升高,而谷氨酸、乙酸、胆碱和甘氨酸的含量显著降低,缬氨酸、肌酐、尼克酰胺、苯丙氨酸和酪氨酸含量略有降低.实验结果表明糖尿病肾病动物模型db/db小鼠的代谢特征不同于正常小鼠.代谢组学分析方法作为辅助手段,为糖尿病肾病的发病机制提供了良好的数据支持.
- 毛璇张冬娟管又飞颜贤忠
- 关键词：DB/DB小鼠代谢组学
- Tyr61的芳香族侧链对稳定瘦素的结构至关重要(英文)被引量：2
- 2009年
- 为了研究第61位Tyr(Tyr61)在瘦素(leptin)结构与功能中的作用,构建了2个瘦素突变体Y61F与Y61Q并对其进行了功能分析.Y61F突变体瘦素显示出与野生型瘦素相同的天然凝胶电泳迁移率及相似的折叠效率,而Y61Q突变体瘦素则显示出明显慢的电泳迁移率且较野生型瘦素更难于折叠.受体结合及免疫活性测定显示,Y61F突变体保留了野生型瘦素的大部分生物学活性,而Y61Q突变体仅保留了野生型瘦素16%的受体结合活性及30%的免疫活性.圆二色性分析及二级结构估算表明,Y61F突变体具有与野生型瘦素几乎一样的二级结构组成,而Y61Q突变体的结构则较野生型瘦素更为松散.本研究表明,Tyr61的芳香族侧链被包埋于分子内部的疏水区域中对稳定瘦素结构及其发挥生理功能至关重要,而Tyr61上的羟基在这一过程中并不起重要作用.
- 李晶张冬娟张园黄蔚唐建国杨吉春
- 关键词：瘦素再折叠圆二色性
- 高糖引起小鼠肾小球足细胞podocalyxin蛋白的表达下调被引量：24
- 2007年
- 目的:探讨高糖对肾小球足细胞podocalyxin蛋白表达的影响及其信号途径。方法:免疫组织化学法检测db/db(自发糖尿病小鼠)肾小球足细胞podocalyxin蛋白表达,野生型小鼠(WT鼠)为对照,计算机图像半定量分析。以体外培养的足细胞为研究对象,应用Western印迹分析技术,检测高糖培养不同时间点对足细胞表达podoca-lyxin蛋白的影响;检测细胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号途径的活化,及其特异性阻断剂PD98059对podocalyx-in蛋白变化的阻断效应。结果:免疫组织化学半定量分析显示db/db小鼠肾小球podocalyxin蛋白表达明显少于对照组[(0.18±0.07)比(0.25±0.05),P<0.05]。培养的足细胞表达基础水平的podocalyxin蛋白,高糖培养不同时间点其表达均下降,以第6天最明显(为对照组的5.5%,P<0.01),正常糖和甘露醇组没有明显变化。高糖可以活化足细胞ERK1/2信号途径,于培养30min时ERK1/2开始活化,6h达高峰,持续活化至24h,至48h时接近基础水平;高糖培养不能活化P38和JNK。正常糖和甘露醇在各个时间点均不影响丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路。ERK1/2特异阻断剂PD98059可以消减高糖引起的podocalyxin表达下降的效应。结论:自发糖尿病小鼠的肾小球足细胞podocalyxin蛋白表达下降。高糖经ERK1/2信号通路下调体外培养的足细胞podocalyxin蛋白表达。
- 祁佳肖跃飞张冬娟杨光锐黄海长
- 关键词：糖尿病肾病肾小球葡萄糖
