廖列如
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 犬冠状病毒的分离鉴定及其S基因的克隆
- 2006年3月,公安部警犬技术学校2只警犬发病,经初步诊断后,疑似犬冠状病毒(CCV)病。我们对提供的犬冠状病毒(CCV)症状病犬的粪便,以犬肾传代细胞(MDCK)等多种细胞进行了病毒分离,结果分离到1株病毒,在荧光显微...
- 廖列如
- 关键词:冠状病毒扩增片段酶切鉴定直接克隆生物学鉴定琼脂糖凝胶
- 文献传递
- 牛-牛及山羊-牛克隆胚胎体外培养条件的优化被引量:3
- 2007年
- 通过胞质内注射法将牛和山羊胎儿耳朵成纤维细胞分别注入去核牛卵母细胞中构建同种胚胎和异种胚胎。采用mCR2aa和mSOF分别培养,然后在mSOF中按不同培养时间添加8mg/mLBSA或者10%FBS,培养前3d和培养3d后添加的补充物质及次序为:(1)BSA+FBS;(2)BSA+BSA;(3)FBS+BSA;(4)FBS+FBS。根据培养胚胎的卵裂率、8/16-cell发育率、囊胚发育率及囊胚细胞数筛选出最好的培养方法。结果:(1)mSOF中培养同种胚胎和异种胚胎的卵裂率,8/16-cell发育率以及囊胚发育率均明显高于在mCR2aa中的培养结果(P<0.05)。(2)添加BSA+FBS组的mSOF培养胚胎的卵裂率、8/16-cell发育率、囊胚发育率和囊胚细胞数同种依次为79.8%±7.1%、49.7%±3.5%、21.5%±1.8%和115.2±4.3,异种依次为40.1%±6.3%、29.2%±2.0%、13.4%±2.1%和100.1±3.0,均明显高于其他培养组(P<0.05)。结论:山羊-牛异种克隆胚胎可以用优化的牛胚胎培养体系进行培养。同种胚胎和异种胚胎的最佳培养方法均为前3d用mSOF+BSA培养液,3d后用mSOF+FBS培养液。
- 张林华松张涌权富生刘风军廖列如蒋永海
- 关键词:山羊核移植胚胎
- 犬冠状病毒的分离及鉴定被引量:3
- 2007年
- 为有效防治犬冠状病毒病,促进养犬业的健康发展。从疑似犬冠状病毒(CCV)症状病犬粪便中分离出1株病毒,从形态学、理化学、生物学等方面对该病毒进行了鉴定。细胞培养证实该病毒有致细胞病变效应。物理化学鉴定表明该分离病毒核酸类型为RNA,有囊膜,对氯仿和乙醚敏感,对1%胰蛋白酶不敏感,耐酸性较强,具有一定的耐热性,最高耐受限是50℃,无血凝性和红细胞吸附特性,符合犬冠状病毒的特点。中和试验进一步证明该分离病毒是一种犬冠状病毒;牧羊犬接种1 d后就出现了临床症状,所有攻毒犬扑杀后都有肠以及肠系膜淋巴结病变。该分离病毒是一种RNA病毒,可以引起试验犬出现典型犬冠状病毒病症状,是犬冠状病毒。
- 廖列如张林孔庆波刘国权张淼涛
- 关键词:犬冠状病毒
- 犬冠状病毒的分离鉴定及其S基因的克隆被引量:2
- 2008年
- 从疑似犬冠状病毒(CCV)症状病犬粪便中分离出一株病毒,合成通用引物(2Bp,4Bm)和CCV特异性引物(CCVF2,CCVR2)进行RT-PCR反应及限制性内切酶BstXⅠ酶切鉴定,并将纯化的PCR产物成功地克隆到pGEM-T-easy载体中。RT-PCR反应结果,BstXⅠ酶切鉴定结果以及重组质粒PCR鉴定结果均得到预计扩增片段。重组质粒测序结果与GenBank的CCV序列进行比对,与之相符,表明本次实验分离到的病毒为CCV。
- 廖列如张林孔庆波刘国权孙彩虹张淼涛
- 关键词:犬冠状病毒S基因克隆