宗志红
- 作品数:107 被引量:462H指数:11
- 供职机构:中国医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 牙龈卟啉单胞菌的牙龈蛋白酶K-caspase样亚基的表达与青春期龈炎的临床相关性被引量:1
- 2007年
- 目的检测并比较青春期龈炎的牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)临床分离株的分泌蛋白和菌体蛋白中牙龈蛋白酶 K(gingipain K,Kgp)-caspase 样亚基的表达强度及酶活性,揭示 Kgp 与青春期龈炎之间可能存在的致病关系。方法检测并记录36例14~17岁的青春期龈炎患者的牙龈指数、龈沟出血指数及探诊深度,取龈下菌斑进行 Pg 的分离培养,16S rRNA PCR 法鉴定。将获得的10个 Pg 临床分离株复苏,在对数生长期末提取分泌蛋白和菌体蛋白,测定其酶活性,并用Kgp-caspase 样亚基的单克隆抗体进行 Western blot 检测。Kgp 的表达强度及酶活性与各牙周指数之间的相关关系用等级相关系数。结果青春期龈炎的 Pg 临床分离株的分泌蛋白和菌体蛋白中,Kgp-caspase 样亚基的表达强度及酶活性与各牙周指数的大小呈正相关关系,差异有统计学意义(P<0.05)。结论青春期龈炎龈下菌斑中 Pg 的 Kgp 十分复杂,存在表现为低相对分子质量形式的caspase 样活性分子,这些细胞内功能蛋白分子将影响 Pg 和宿主间的相互作用;Kgp 对青春期龈炎有一定的致病作用。
- 陈旭宗志红潘亚萍
- 关键词:龈炎牙龈蛋白酶K
- PKC在Ca^(2+)信号调节MPF活性中的作用
- 2003年
- 用Fura-2AM作为染料,用F-2000荧光分光光度计测细胞内Ca2+浓度的改变。用A23187-Ca2+载体提高细胞内Ca2+浓度,同时用PKC的特异性抑制剂calphostin C作用细胞来阻断PKC途径,观察MPF活性改变。结果表明:300nmol/L的Calphostin C可以最大限度地抑制PKC活性。Calphostin C不能影响A23187引起的细胞内Ca2+浓度的升高。A23187处理前加入300nmol/L光激活Calphostin C不能降低MPF的活性,而A23187单独却可以引起MPF的活性降低。与对照组相比,差异不显著,p<0.05。
- 刘莹张杰王亚杰具英花赵昕宗志红于秉治
- 关键词:细胞内钙蛋白激酶C细胞周期
- 人新基因HBRP基因工程细胞系的建立被引量:1
- 2004年
- 在研究牛精浆蛋白 (bovineseminalplasmaproteins ,BSPproteins)及其相关蛋白在受精卵发育过程中的重要作用时 ,在人睾丸组织中发现并克隆了一个与BSP蛋白相关新基因的序列 ,其开放阅读框架 (openreadingframe ,ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有4个纤连蛋白Ⅱ型结构域 ,与BSP蛋白在结构上有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedprotein ,HBRP) ,并在GenBank注册 ,登录号为AF2 791 4。预测该蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,并已成功地将该基因定位在 1 9号染色体 1区 3带上。为进一步研究该新基因的生物学功能 ,利用重组质粒pEGFP C2 HBRP转染人胚肾HEK2 93细胞 ,通过G41 8筛选出药物抗性克隆 ,建立了稳定的基因工程细胞系 ,为该基因功能的研究奠定了基础 。
- 张杰刘莹惠答美宿文辉宗志红于秉治
- 关键词:基因工程细胞系19号染色体
- Nav1.5/SCN5A基因新的变构体编码人脑组织Nav1.5 Na^+通道被引量:6
- 2007年
- 河豚毒-抵抗性(TTX-R)Nav1.5 Na+通道是心肌的特异性Na+通道,虽然研究发现神经元中也存在河豚毒-抵抗性Na+电流及Nav1.5/SCN5A mRNA的表达,但其确切的cDNA序列尚不清楚.采用RT-PCR法对人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA进行克隆发现:人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA有2种变构体,hB1和hB2(accession number EF629346,EF629347),其中hB1全长6201个碱基,其开放读码框架(ORF)参与编码2016个氨基酸,和人心肌Nav1.5 Na+通道氨基酸序列相同率高达98%,共有28个不同的氨基酸,其中7个集中位于第6A外显子与第6外显子编码区.与人心肌Nav1.5/SCN5A基因cDNA不同的是,在对人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA的克隆中未发现该基因第18外显子的选择性剪接,但却发现其第24外显子的选择性剪接,2种选择性剪接体(hB1和hB2)在脑组织中基本同时表达,表达比率接近1∶1,但在心脏中二者的表达比率却与年龄有关.人Nav1.5/SCN5A基因的第24外显子定位于染色体3P21区,共有54个碱基,参与编码18个氨基酸.RT-PCR法证实第24外显子的选择性剪接也可发生在大鼠心脑之外的其他组织中,竞争性PCR法证明,不同组织中2种选择性剪接体的表达比率不同,且随着周龄的增加,2种选择性剪接体在各组织中表达的变化趋势不同.此外,RT-PCR法还发现Wistar大鼠全身16种组织中均可检测到Nav1.5/SCN5A mRNA的表达.上述实验结果说明,Nav1.5 Na+通道在全身组织中分布广泛,但编码人脑组织Nav1.5 Na+通道与心肌组织该离子通道的cDNA序列不同,是Nav1.5/SCN5A基因的2种变构体,这为深入研究不同组织中Nav1.5 Na+通道的功能提供了基础.
- 欧绍武宗志红王军王运杰
- 关键词:基因克隆选择性剪接脑组织
- 衰老大鼠动脉顺应性与凋亡相关指标变化及缬纱坦对其影响被引量:7
- 2007年
- 目的探讨衰老大鼠动脉顺应性与凋亡相关指标变化及缬纱坦对其影响,为阐明血管衰老对动脉硬化诊治的重要意义。方法Wistar大鼠分为青年组、衰老组及缬纱坦组,测定血浆丙二醛、超氧化物歧化酶水平,同时采用恒速注入流体方法测定大鼠颈动脉血管的顺应性,并利用免疫组织化学染色法、反转录—聚合酶链式反应和蛋白免疫印迹法分析各组凋亡相关基因Bcl-2 mRNA及蛋白表达、半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3活性变化水平。结果与衰老组相比,缬纱坦组血浆丙二醛浓度明显降低(P<0.05),超氧化物歧化酶浓度明显升高(P<0.05);颈动脉血管的顺应性增高,其中弹性面积差异有显著性(P<0.05);主动脉血管Bcl-2阳性内皮细胞百分率增高(P<0.05),半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3表达降低(P<0.05);Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平明显增高(P<0.05),半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3活性水平降低(P<0.01)。结论血管衰老有其特征性生理改变,凋亡相关基因Bcl-2表达下调、半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3活性增高可能是血管衰老的重要分子机制之一,缬纱坦对血管衰老有一定保护作用,为延缓血管衰老以及防治动脉硬化开辟新途径。
- 单海燕白小涓宗志红孟小娜陈香美
- 关键词:内科学血管衰老缬纱坦
- 肺间质病患者肺泡巨噬细胞蛋白激酶C活性的变化被引量:6
- 2000年
- 目的 探讨肺间质纤维化时蛋白激酶C(PKC)活性的变化。方法 应用放射活性测定法检测 9名健康者和 15例特发性肺间质纤维化 (IPF)患者支气管肺泡灌洗液 (BALF)中肺泡巨噬细胞(AM)的PKC活性。结果 IPF患者BALF中AM总PKC活性、胞质和胞膜PKC活性均明显高于健康者 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ,AM的总PKC活性与BALF中细胞总数呈正相关 (r=0 8135 ,P <0 0 1) ,胞膜部分PKC活性也与BALF中细胞总数呈正相关 (r=0 5 917,P <0 0 5 )。结论 PKC作为细胞活化的信号传导通路 ,与肺间质病的发生有关。
- 刘凌志宗志红李振华于秉治于润江
- 关键词:蛋白激酶C特发性肺间质纤维化肺泡巨噬细胞
- 大鼠脑组织Nav1.5钠通道的基因克隆及分布分析被引量:2
- 2007年
- 为了阐明大鼠脑组织Nav1.5钠通道α亚单位的编码基因、分子特性及其在不同发育阶段各脑叶的分布差异,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对大鼠脑组织Nav1.5钠通道α亚单位进行了克隆(命名为rN1),并比较其在不同发育阶段各脑叶的分布情况.rN1基因编码2016个氨基酸残基,序列分析显示,其与rH1氨基酸相似性为96.53%,与hNbR1相似性为96.13%.在DI-S3~S4发现与rH1不同的一个新的外显子(第7外显子),同时发现DⅡ~Ⅲ选择性剪切了第20外显子(53个氨基酸残基)的异构体(命名为rN1-2).分布结果显示,大鼠脑组织Nav1.5钠通道α亚单位在不同发育阶段各脑叶分布有明显的差异,研究证实,Nav1.5钠通道在大鼠脑组织显著表达,存在脑叶的分布差异,而且随着脑组织的发育,其表达逐渐趋于稳定,实验证实Nav1.5钠通道基因编码了一个新的外显子而且其表达范围更加广泛.
- 任成涛欧绍武王运杰林毅宗志红
- 关键词:钠通道基因克隆脑组织
- 细胞角蛋白7与细胞角蛋白20联合检测在鉴别卵巢及胃肠道来源性肿瘤中的诊断价值被引量:5
- 2014年
- 目的检测细胞角蛋白7(CK7)与细胞角蛋白20(CK20)在卵巢上皮性肿瘤中的表达,探讨其于卵巢胃肠道来源性肿瘤的诊断意义。方法采用免疫组织化学方法检测CK7与CK20的表达。结果CK7-/CK20+表达所占比例最高,且在卵巢原发性肿瘤与胃肠道来源肿瘤中差异显著,具有统计学意义。结论CK7与CK20联合检测能有效鉴别卵巢原发性肿瘤与胃肠道来源的卵巢转移肿瘤。
- 陈曦宗志红陈说修银铃孙凯旋赵杨
- 关键词:细胞角蛋白7细胞角蛋白20CA125CEA
- 纳米粒子载体携带反义转化生长因子-β1基因的局部定位转染对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响被引量:2
- 2005年
- 目的探讨纳米粒子携带反义转化生长因子(TGF-)β1局部定位转染对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法45只大鼠制成自体静脉移植模型后,分成纳米粒子DNA组、纳米粒子空载体组和生理盐水对照组,进行局部定位转染,2周后观察移植静脉内膜的变化,应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Westernblot以及免疫组织化学等方法检测反义基因对内源性TG-Fβ1表达的影响。结果基因转染后两周,内膜厚度为(20.5±4.7)μm,明显小于两个对照组(P<0.01)。RTPCR和Westernblot结果表明,基因转染组的TGF-β1mRNA和蛋白的表达明显低于空载体组及生理盐水对照组。结论纳米粒子可有效地作为基因的转移载体;纳米粒子携带反义TGF-β1可以减少内源性TGF-β1基因的表达,抑制细胞外基质(ECM)的合成,从而达到抑制内膜增生的目的。
- 孙达欣张强郎晓讴宗志红陈玉祥
- 关键词:基因转染血管内膜增生静脉移植
- 蛋白激酶C-δ在不同发育阶段小鼠睾丸的表达被引量:1
- 2003年
- 目的 观察蛋白激酶C δ (PKC δ)在不同周龄小鼠睾丸中的表达情况 ,探讨此种PKC同工酶在精子发生中的作用。方法 采用出生后不同周龄的小鼠睾丸组织 ,进行SP免疫组织化学染色。结果 PKC δ在生后睾丸组织中从无到有 ,生后第三周小鼠睾丸中微弱表达 ,第五周开始出现明显的表达量的增加 ,直到第 12周。PKC δ阳性细胞存在于曲细精管中心部位。结论 PKC δ蛋白选择性表达于精子细胞中 ,并且呈现出独特的发育阶段性 。
- 冯晨袁莹张杰宗志红于秉治
- 关键词:睾丸同工酶精子形成