孙林
- 作品数：35 被引量：152H指数：8
- 供职机构：江苏省人兽共患病学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 从噬菌体随机十二肽库中筛选新城疫病毒血凝素—神经氨酸酶模拟表位
- 本文以生物素标记的抗NDV HN McAb M22为筛选配基,应用噬菌体展示肽库技术,从噬菌体12肽库中筛选HN抗原模拟肽,并对其免疫生物学特性进行鉴定,旨在为进一步研究HN抗原分子的结构与功能、HN免疫机制、多肽疫苗的...
- 孙林焦新安刘文博潘志明刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒噬菌体神经氨酸酶多肽疫苗
- 文献传递
- 抗H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备和鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的:获得分泌抗H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞。方法:以H9N2亚型AIV为免疫原,免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14,在PEG4000的作用下进行细胞融合,通过血凝抑制(HI)试验筛选分泌抗H9亚型AIV血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果:经过连续3～4次克隆化,获得能稳定分泌抗H9亚型AIV血凝素的单克隆抗体细胞系6株,分别命名为1B2、1C10、1G2、2B7、2E3和5E11。6株细胞培养上清HI效价为24～28,腹水HI效价为210～213。除1G2为IgM外,其余5株均为IgG1。Western blotting结果显示,1B2、1C10、2B7和2E3能与AIVH9蛋白在Mr为75000处反应,表明其是针对AIVH9亚型血凝素蛋白的单抗。特异性试验表明该6株单抗均只与H9亚型AIV发生特异性HI反应,而不与其他14个HA亚型的AIV及新城疫病毒、传染性支气管炎病毒发生交叉反应,显示出良好的特异性。结论:制备了针对H9亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体,为禽流感的快速诊断和病毒的抗原性分析等奠定了基础。
- 孙林季琰左为亮王秀荣潘志明焦新安
- 关键词：禽流感病毒H9亚型血凝素单克隆抗体
- 从噬菌体随机十二肽库中筛选新城疫病毒血凝素—神经氨酸酶模拟表位
- 新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起禽类的一种急性传染病,被国际兽疫局(OIE)列为对畜禽危害最大的A类传染病之一。NDV在分类上...
- 孙林焦新安刘文博潘志明刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒神经氨酸酶噬菌体肽库模拟表位家畜传染病学抗原表位预测
- 文献传递
- 牛γ干扰素的表达及其抗病毒活性测定被引量：11
- 2011年
- 通过RT-PCR从经ConA刺激诱导的奶牛脾脏淋巴细胞总RNA中扩增出牛γ干扰素(BoIFN-γ)cDNA,克隆到真核载体pVAX1中,测序结果显示pVAX1中的插入序列BoIFN-γ基因与已报道序列一致。用重组质粒pVAX1-BoIFN-γ转染COS-7细胞并进行间接免疫荧光试验鉴定,结果显示BoIFN-γ在COS-7细胞中得到成功表达。将BoIFN-γ基因克隆到原核表达质粒pET-30a(+)、pGEX-6p-1后,分别转化重组表达菌BL21(DE3)、BL21后,通过对表达条件的优化,SDS-PAGE分析表明两种重组蛋白均可实现可溶性表达,大小分别为23 kDa和43 kDa。将含信号肽BoIFN-γ基因克隆到转座载体pFastBacTM1中并转化DH10Bac,通过位点特异性转座将BoIFN-γ基因整合到穿梭载体Bacmid中并通过脂质体转染Sf9昆虫细胞,产生重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ,重组病毒传代扩增感染Sf9细胞后,通过间接免疫荧光试验证实BoIFN-γ在杆状病毒系统中获得表达。使用MDBK/VSV细胞系统测定rHis-BoIFN-γ、rGST-BoIFN-γ以及rBac-BoIFN-γ的抗病毒活性,其效价分别达到8.389×107 U/mg、6.554×105 U/mg、4.096×104 U/mL,3种具有较高的抗病毒活性重组牛γ干扰素的获得为其开发应用提供了重要的生物材料。同时使用单克隆抗体5G4和3E6,建立了BoIFN-γ的双抗夹心ELISA检测方法并绘制了标准曲线,可定量分析BoIFN-γ的抗病毒活性,为其临床应用及相关研究提供了重要的方法。
- 徐正中陈祥单锋丽孟闯孙林黄金林潘志明耿士忠焦新安
- 关键词：杆状病毒系统抗病毒活性ELISA
- 健康人粪便中携带bla_(CTX-M)基因解鸟氨酸拉乌尔菌的分离、鉴定及全基因组分析
- 2024年
- 目的调查健康人粪便中携带bla_(CTX-M)基因的解鸟氨酸拉乌尔菌的存在情况,并阐明其传播机制。方法从扬州市采集健康人粪便309份,经LB增菌后,在含有2 mg/L头孢噻肟的麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素平板上筛选阳性菌落,PCR检测bla_(CTX-M)基因携带情况,同时从全基因组水平分析其耐药基因及基因环境。结果分离到携带bla_(CTX-M)-14和bla_(CTX-M)-65耐药基因的解鸟氨酸拉乌尔菌各1株,其中bla_(CTX-M)-14位于IncFIB质粒上,bla_(CTX-M)-65位于IncHI2质粒上。进一步分析发现ISEcp1和IS903B等移动元件与bla_(CTX-M)的传播有关。结论应密切监测健康个体中解鸟氨酸拉乌尔菌对抗菌药物的耐药性和传播模式,并加以防控。
- 季琰孟楠王涵云王晶孙林焦新安
- 关键词：健康人全基因组测序
- 碱蓬根部细菌组的结构、功能及促生潜力分析
- 盐地碱蓬(Suaeda salsa)是广泛分布于世界各地盐碱地区的一种典型的盐生植物,具有极强的耐盐碱性,明确盐地碱蓬根部相关微生物组的结构及其功能,并分离鉴定其中具耐盐碱及促生功能的菌株资源,可为利用微生物接种方式改善...
- 杨芳王宇孙林赵永强张云增
- 关键词：盐地碱蓬根际微生物
- 微生物生物学研究型教学改革初探被引量：36
- 2008年
- 本文就微生物生物学课程体系建设、授课方法、教学手段以及实验教学模式等方面进行探索。通过教学实践证明,改革微生物生物学教学模式能激发学生的学习兴趣,培养学生的独立解决问题的能力,发展他们的创造性思维,是培养高素质创造型人才的重要途径。
- 殷月兰焦新安潘志明孙林黄金林陈祥
- 关键词：研究型教学教学改革
- 牛γ-干扰素ELISA检测方法的建立与初步应用被引量：16
- 2010年
- 以纯化的rHis-BoIFN-γ制备兔多抗血清,辛酸—硫酸铵两步法对体内诱生的抗rBoIFN-γ单抗腹水进行纯化,用美洲商陆素(Pokeweed mitogen,PWM)刺激奶牛全血产生的分泌性天然BoIFN-γ筛选出与之反应最佳的单抗5E11。将单抗5E11以40μg/mL浓度包被,与1∶3 000倍稀释的兔抗rHis-BoIFN-γ多抗血清(13.8μg/mL)配对,以1∶6 000稀释的商品化酶标羊抗兔IgG为指示抗体,建立了BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法,该方法可以检出2.56 U/100μL(30.5 pg/100μL)的rHis-BoIFN-γ、8U/100μL的rBac-BoIFN-γ和1U/100μL的分泌性天然BoIFN-γ。以商品化试剂盒作为平行对照,将获得的奶牛临床检测血浆样品使用BoIFN-γ抗原捕获ELISA法进行检测,结果显示两种方法检测符合率达到83.9%。本研究建立的BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法可有效检测分泌性IFN-γ,为进一步开发BoIFN-γELISA检测试剂盒奠定了基础。
- 陈祥牛中伟徐正中孟闯孙林黄金林潘志明焦新安
- 关键词：Γ-干扰素单克隆抗体
- 减毒沙门氏菌介导H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用研究被引量：3
- 2007年
- 构建获得含有H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组真核表达质粒pCAGGS-HA。重组质粒电转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,获得重组沙门氏菌SL7207(pCAGGS-HA)。重组菌SL7207(pCAGGS-HA)以5×109cfu的剂量2次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡后,再以油乳剂灭活疫苗加强免疫1次,并设立重组菌单独免疫组、灭活苗免疫组、空载体免疫组及空白对照组。联合免疫组和重组菌单独免疫组的小肠黏膜抗体效价与其他组之间存在显著差异(P<0.05),且两组的攻毒免疫保护水平与空载体组之间差异显著(P<0.05),其中联合免疫组的免疫保护率最高,达100%,而灭活苗免疫组保护率为80%,表明减毒沙门氏菌介导的H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用具有良好的免疫协同作用。
- 潘志明程宁宁刘蓓蓓孙林耿士忠陈祥黄金林焦新安
- 关键词：H9亚型禽流感减毒沙门氏菌DNA疫苗灭活油乳苗联合免疫
- 生物工程专业卓越工程师培养方案的实施研究被引量：2
- 2015年
- 生物工程专业卓越工程师计划一方面有学校按照有别于其他学生的培养方式为学员灌输非常实用的生物工程相关的理论知识;另一方面企业在培养学员实践能力方面将不遗余力。该计划的实施时深入贯彻中央对于科技创新的一种很好的体现,它培养的学员不仅具有扎实的自然科学以及生物工程的基础,更是具有良好的人文科学素养,具有较强的生物工程开发与设计的实践能力、知识更新与自我完善能力、良好的沟通与组织管理能力以及具有非常广的国际视野。
- 潘志明孙林周福才黄金林刘思国陈建泉
- 关键词：生物工程卓越工程师计划课程改革
