孙情
- 作品数：10 被引量：19H指数：3
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- NOD小鼠CD_8α^+抗原基因克隆载体的构建及其相关蛋白在树突状细胞中的表达
- 2012年
- 目的:构建NOD小鼠CD8α+抗原基因重组慢病毒载体,探讨其在树突状细胞(DCs)中的表达,阐明1型糖尿病(T1DM)的发病机理。方法:设计CD8α+基因特异性引物,从NOD小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增CD8α+基因,与质粒载体pCDF1-MCS2-EF1-COPGFP进行连接重组,经过转化、筛选、鉴定和序列测定后,应用Western blotting法检测CD8α+基因的表达。应用Nanofectin脂质体转染试剂将含有目的基因的质粒转染HEK293细胞,进行重组慢病毒载体包装,将包装后的重组慢病毒颗粒感染DCs,采用Western blotting法检测CD8α+蛋白的表达。结果:成功构建了NOD小鼠CD8α+抗原基因的重组质粒载体,重组表达载体经转染HEK293细胞获得了重组病毒的原液,重组病毒扩增后感染DCs,免疫荧光下可见DCs内含有绿色荧光蛋白(GFP)表达。结论:NOD小鼠CD8α+抗原基因重组病毒载体构建成功,且有相关蛋白表达。
- 乔伟冯乐平孙情熊毅黎玉凤
- 关键词：1型糖尿病慢病毒载体树突状细胞
- 整合素与1型糖尿病自身免疫反应的关系研究进展被引量：1
- 2011年
- 整合素（integrins）家族是一组细胞表面跨膜异源双体（Heterodimer）的糖蛋白受体,是由α和β两个亚单位通过非共价键连接构成的异二聚体结构。
- 冯乐平孙情乔伟
- 关键词：自身免疫反应整合素1型糖尿病糖蛋白受体异二聚体亚单位
- 高浓度葡萄糖条件下罗格列酮对NIT-1细胞FOXO1、TSC2基因表达及细胞分泌功能的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究罗格列酮在不同浓度葡萄糖条件下,对胰岛β细胞增殖凋亡与胰岛素分泌以及叉头转录因子-1(FOXO1)和结节性硬化症-2(TSC2)表达的影响。方法:将NIT-1细胞按每孔5×104个放置于24孔细胞培养板,培养48h后随机分为各处理组:5.6、7.8、11.1、16.7、22.2和27.6mmol.L-1葡萄糖组,继续培养24h后再分别施加1×10-5mol.L-1罗格列酮,分别于干预24和48h后取细胞培养上清液,采用放射免疫法检测胰岛素水平和免疫荧光法检测细胞增殖情况,RT-PCR半定量法检测FOXO1和TSC2mRNA表达水平。结果:①1×10-6～1×10-5mol.L-1罗格列酮可以分别在不同浓度葡萄糖培养条件下使胰岛NIT-1细胞增殖(P<0.05),且这种变化趋势随剂量的增加而增加(即1×10-5mol.L-1罗格列酮组>1×10-6mol.L-1罗格列酮组>1×10-7mol.L-1罗格列酮组)。1×10-5mol.L-1的罗格列酮干预后,可见细胞凋亡百分率增加趋势随着葡萄糖浓度不断升高;②在同一浓度罗格列酮作用下,当葡萄糖浓度为11.1mmol.L-1时,胰岛素分泌水平最高,高于其他各组(均P<0.05),随着葡萄糖浓度增加,胰岛素分泌量逐渐下降(11.1mmol.L-1葡萄糖组>16.7mmol.L-1葡萄糖组>22.5mmol.L-1葡萄糖组>27.6mmol.L-1葡萄糖组),而葡萄糖为5.6mmol.L-1时,胰岛素分泌量最低;③在1×10-5mol.L-1罗格列酮干预后,FOXO1和TSC-2mRNA的表达水平均较未干预组明显下降,且呈现出5.6mmol.L-1组<11.1mmol.L-1组<16.7mmol.L-1组<22.5mmol.L-1组<27.6mmol.L-1组的变化趋势,而且葡萄糖浓度>16.7mmol.L-1的各组均较前面小剂量葡萄糖组(≤11.1mmol.L-1各组)表达明显。结论:罗格列酮可以通过直接影响胰岛β细胞内FOXO1和TSC2表达促进胰岛β细胞的增殖及影响细胞胰岛素分泌功能,提示通过调控FOXO1和TSC2表达,可以直接影响胰岛β细胞的生物学功能,如分泌功能、细胞的增殖与凋亡以及改善胰岛素抵抗状况。
- 乔伟刘丹孙情梁瑜祯冯乐平
- 关键词：葡萄糖罗格列酮
- LiCl对脐带血有核细胞增殖作用和信号传导研究
- 2011年
- 目的探讨不同浓度LiCl对脐带血有核细胞增殖、集落形成以及细胞凋亡的影响,观察在此过程中LiCl对脐带血有核细胞β-catenin表达的作用。方法应用红细胞裂解方法获得脐带血有核细胞,以5 000个/孔细胞接种到96孔板和1×105个/孔细胞接种到24孔板,应用不同浓度（10、20和40 mM）LiCl处理细胞,用MTT方法测定脐带血有核细胞增殖,以1×105个/孔细胞接种24孔细胞培养板,观察LiCl对细胞集落形成的影响;应用Hoechst 33342试剂盒荧光显微镜下检测细胞凋亡和应用Western blotting方法检测脐带血有核细胞β-catenin基因表达情况。结果随着LiCl浓度的不断增加（0～40 mM）和培养时间的不断延长（0~72h）,脐带血有核细胞增殖能力与相应对照组相比不断增加,分别呈现出不同程度的显著性差异（分别P〈0.05和P〈0.01）;应用20 mM浓度的LiCl培养10 d后,发现脐带血有核细胞集落形成能力与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）,并呈现出明显的抑制细胞凋亡的作用;Western blotting结果发现,LiCl具有明显地诱导β-catenin基因表达的作用。结论 LiCl在一定条件下能够通过激活脐带血有核细胞内Wnt/β-catenin信号传导途径刺激细胞增殖,达到扩增脐带血有核细胞的目的。
- 冯乐平陈再明孙情于冉冉乔伟
- 关键词：LICL脐带血有核细胞细胞增殖
- 白花丹素对人舌癌Tca细胞增殖及凋亡作用的探讨被引量：9
- 2011年
- 目的探讨白花丹抑制舌癌细胞Tca的增殖及对细胞凋亡的影响。方法将舌癌细胞Tca按5×103个/孔的浓度接种于96孔细胞培养板,置于37℃,5%CO2的培养箱中预培养24 h,待细胞80%长满孔底,24 h后将白花丹分别按0.025,0.1,0.2,0.3 mg/ml和0.4 mg/ml分别加入各培养组中,每组5复孔。置37℃、5%CO2培养箱中培养。分别培养48,72,96,120 h后,用酶标仪在490 nm下,MTT染色法测定细胞增殖情况,计算白花丹对肿瘤细胞的抑制率。同时,Hoe-chest33342荧光染色法测定细胞核变化情况,观察细胞凋亡的形态学变化情况。结果随着白花丹浓度的增大和作用时间的延长,白花丹对人舌癌细胞增殖的抑制作用越明显。当药物浓度达0.4 mg/ml时,培养48 h时与其他各组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01),当药物浓度在0.3 mg/ml细胞培养达96 h时,与小于0.3 mg/ml和小于96 h培养时间的其他各组比较均有显著性差异(P<0.05),说明此点是白花丹有效成分抑制肿瘤细胞的一个关键点。细胞培养72 h后Hoechst33342染色发现,随着药物浓度的不断增加,凋亡细胞的数量越来越多。当药物浓度达到0.4 mg/ml时,镜下几乎很少见到完整的细胞核出现,相反出现了大量的细胞和碎片和不完整的细胞核。结论白花丹提取物可以有效抑制肿瘤细胞增长,导致肿瘤细胞大量地细胞凋亡,说明其在肿瘤治疗中具有很大的应用价值。
- 杜泽乡孙情乔伟于冉冉冯乐平
- 关键词：白花丹素舌癌增殖凋亡
- CD8α+抗原基因的克隆载体构建和相关蛋白在树突状细胞（DC）中的表达研究
- 目的:探讨在1型糖尿病情况下,CD8α+基因表达的蛋白对胰岛细胞免疫反应所起的作用,从而探讨1型糖尿病的发病机理。从NOD小鼠胸腺淋巴细胞中克隆CD8α+基因,与慢病毒载体进行重组,构建CD8α+基因克隆的表达载体,并进...
- 孙情
- 关键词：慢病毒载体转染
- 文献传递
- 叉头转录因子FoxO1对β细胞生物学作用的研究进展被引量：3
- 2009年
- 孙情乔伟冯乐平
- 关键词：FOXO1Β细胞氧化应激细胞分化
- SIRT1基因调控与胰岛素抵抗的关系研究进展被引量：3
- 2010年
- 乔伟孙情冯乐平
- 关键词：胰岛素抵抗2型糖尿病SIRT1信号传导
- 阿司匹林对胰岛瘤细胞株NIT-1细胞增殖及NF-κB表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨阿司匹林对胰岛瘤细胞株NIT-1细胞增殖、胰岛素分泌及NF-κB p65的影响。方法培养胰岛细胞株NIT-1细胞,经不同浓度阿司匹林处理后,采用MTT法检测细胞增殖,Hoechest33342荧光染色法观察细胞核形态和细胞凋亡变化,用放射免疫法测定胰岛素分泌和通过NF-κB p65激活-核转运试剂盒在荧光显微镜下检测NF-κB p65的表达。结果随药物浓度增加和作用时间的延长,阿司匹林对NIT-1细胞增殖的抑制作用逐渐增强,细胞培养24h时,5mmol/L阿司匹林组与对照(NC)组比较(P=0.011374),10mmol/L阿司匹林组与NC组比较(P=0.000079),差异均有统计学意义。随阿司匹林剂量的不断增加,细胞培养各时间段均出现不同的剂量-效应关系。当药物浓度在1mmol/L时,细胞培养48h后,细胞增殖明显变缓慢,胰岛素分泌水平降低,且表现出明显的时间-效应关系。随阿司匹林浓度的增加,凋亡细胞数明显增多,细胞内NF-κB p65表达显著下降。结论阿司匹林对胰岛瘤细胞株NIT-1的增殖具有抑制作用,其抑制作用随阿司匹林浓度增加,呈时间-效应和剂量-效应关系。
- 孙情冯乔熊毅黎玉凤乔伟冯乐平
- 关键词：阿司匹林核因子ΚB
- FOX01基因调控解除细胞凋亡和改善胰岛素抵抗
- 冯乐平梁瑜祯乔伟孙情冯乔
- 所属科学技术领域、简要背景、主要研究内容、发现点、科学价值、论文专著发表及同行引用评价情况。所属科学技术领域和简要背景：该研究属于胰岛素抵抗疾病和糖尿病发病机理研究。人体胰岛β细胞的功能减退，胰岛素分泌相对或绝对不足和机...
- 关键词：
- 关键词：糖尿病治疗
