吕礼芳
- 作品数：9 被引量：10H指数：3
- 供职机构：解放军第181医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同浓度人羊膜匀浆上清液培养大鼠许旺细胞的增殖被引量：4
- 2014年
- 背景:许旺细胞是周围神经修复过程的重要细胞,而研究发现人羊膜细胞分泌的多种细胞因子能够促进许旺细胞增殖。目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对鼠许旺细胞(RSC96)生长的影响。方法:使用含体积分数20%胎牛血清的高糖DMEM培养基原代培养RSC96细胞株,传代至第2代用于实验研究。根据人羊膜匀浆上清液在培养基中的不同体积分数(0,10,15,20,25%)分组。结果与结论:人羊膜匀浆上清液的总蛋白浓度为675 mg/L,表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和血管内皮生长因子浓度分别为(470.625±2.546),(4.121±0.026)和(0.172±0.002)ng/L。在培养第1-7天,10%和15%人羊膜匀浆上清液组的增殖率大于20%和25%人羊膜匀浆上清液组(P<0.05);10%、15%人羊膜匀浆上清液组显示出促进细胞增殖的作用,而20%、25%人羊膜匀浆上清液组显示出抑制细胞增殖的作用;各实验组的细胞活力与对照组接近(P>0.05)。提示人羊膜匀浆上清液低浓度时(10%和15%)具有促进RSC96增殖作用,高浓度时(20%和25%)抑制RSC96增殖。
- 刘亮王磊童亚林莫永亮吕璐陈云鹏杨文贤吕礼芳詹球朱富军辛海明龚震宇
- 关键词：许旺细胞细胞生长曲线MTT法
- 台盼蓝直染法鉴定羊膜活力最佳方案研究
- 目的 采用析因设计筛选台盼蓝直染法快速鉴定羊膜活力时台盼蓝最佳浓度及染色时间.方法 取健康、剖宫产胎盘6个,分离羊膜并剪成1.cm×1.cm后分为两组.实验组将染色时间(因素A)的10个水平1、2、3、4、5、...
- 杨文贤朱富军詹球吕礼芳齐映亮王磊刘亮童亚林
- 京尼平交联冻存人羊膜对大鼠损伤神经修复及预防粘连的作用
- 目的 观察京尼平交联冻存人羊膜对大鼠坐骨神经损伤修复及预防粘连的治疗作用.方法 将18只sD大鼠随机分为对照组和京尼平交联冻存人羊膜组(实验组)，每组9只动物，所有动物切除右侧坐骨神经3mm并行神经外膜缝合.对照组神经缝...
- 詹球童亚林吕礼芳
- 不同抗冻剂预处理对直接快速液氮冻存人羊膜活性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:筛选一种抗冻剂配方,为建立深低温高活性保存的羊膜库提供依据。方法:选取12只健康剖宫产产妇羊膜,根据预处理抗冻剂的不同随机分为4组:A组(空白对照组),B组(DMEM/甘油组),C组(DMEM/甘油/DMSO组),D组(DMEM/甘油/DMSO/海藻糖组)。冷冻保存后第1,3个月取羊膜行HE与台盼蓝染色,分别观察羊膜结构,计算羊膜上皮细胞死亡率,并与新鲜羊膜(E组)比较。结果:E组:上皮细胞呈柱状、排列整齐紧密,细胞膜清晰,细胞核圆润蓝染,基底膜连续,细胞死亡率为(6.95±1.95)%。A组:保存1,3个月羊膜上皮层结构完整性均破坏、核固缩呈深蓝染,基底膜渐变为模糊不清。细胞死亡率分别为(39.96±5.84)%,(81.50±4.50)%,两组比较差异有统计学意义(t=13.796,P<0.05)。B组:保存1,3个月细胞变形,核固缩加剧,基底膜渐变为不连续。细胞死亡率分别为(21.61±6.65)%,(36.76±10.72)%,两组比较差异有统计学意义(t=2.940,P<0.05)。C组:保存1个月后类似新鲜羊膜,保存3个月后羊膜上皮细胞扁平,细胞核深染固缩,基底膜较完整。细胞死亡率分别为(14.08±3.21)%,(29.68±8.19)%,两组比较差异无统计学意义(t=4.344,P>0.05)。D组保存1,3个月形态结构接近新鲜羊膜,死亡率分别为(8.51±1.75)%,(12.70±5.70)%,两组比较差异无统计学意义(t=1.722,P>0.05)。保存1个月的A、B、C组死亡率与D、E组比较均有统计学差异(P<0.05),D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05);保存3个月的A、B、C、D、E各组间比较均有统计学差异(P<0.05),但D组存活率仍然达到87.3%。结论:DMEM/甘油/DMSO/海藻糖可作为新型抗冻剂用于深低温高活性保存羊膜。
- 齐映亮朱富军杨文贤詹球吕礼芳王磊刘亮辛海明林源童亚林
- 关键词：抗冻剂液氮
- 锥虫蓝直接染色法鉴定人羊膜细胞活力方案研究被引量：3
- 2013年
- 目的摸索锥虫蓝直接染色法在人羊膜细胞活力快速鉴定中的适宜浓度及染色时间。方法取健康剖宫产产妇的胎膜6张，浸泡后分离羊膜并剪成1cmX1Cm备用。（1）取部分制备好的羊膜分别浸泡于1、2、3、4g／L4种浓度的锥虫蓝溶液中，每个浓度下各浸泡1、3、4、10min后取出，在PBS中漂洗30s，更换PBS，继续漂洗30S。在光学显微镜下选取4个视野拍照，每个视野计数1000个细胞，同时计数蓝染细胞计算细胞死亡率。（2）另取部分制备好的羊膜浸泡于0．5g/L氯己定1h后行锥虫蓝直接染色，锥虫蓝溶液浓度与染色时间为前一实验结果选定的浓度、时间，并与1g／L锥虫蓝染色10ram对比。后续操作及检测同前一试验。对数据行两因素析因设计方差分析、Duncan多范围检验及LSD检验。结果（1）1、2、3g／L锥虫蓝染色1、3min后细胞死亡率相近（P值均大于0．05），染色4、10min后细胞死亡率明显高于1、3min（P值均小于0．05）。4g／L锥虫蓝染色l、3、4min后细胞死亡率相近（P值均大于0．05），染色10min后细胞死亡率显著高于1、3min（P值均小于0．05）。锥虫蓝浓度为2、3、4g／L时，各时相点细胞死亡率都显著高于1g／L（P值均小于0．05）。（2）对经0．5g／L氯己定浸泡1h羊膜染色显示，1g／L锥虫蓝染色1min细胞死亡率[（72．6±7．4）％]显著低于预计死亡率（100．0％，P〈0．05），染色3min细胞死亡率[（95．3±5．6）％]、染色10min细胞死亡率[（99．8±5．O）％]与预计死亡率相近（P值均大于0．05）。结论锥虫蓝直接染色法鉴定人羊膜细胞活力的适宜方案为浓度1g／L，染色时间3min。
- 杨文贤朱富军詹球吕礼芳王磊刘亮辛海明童亚林
- 关键词：着色剂羊膜
- 新鲜人羊膜微粒与自体微粒皮混合移植对创面愈合的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的观察新鲜人羊膜(简称羊膜)微粒混合自体微粒皮促进大鼠创面愈合的作用。方法在24只SD大鼠背部切取4 cm×4 cm全层皮肤,切下的皮肤用取皮鼓反向切取0.15 mm厚皮片,用微量电子天平称量0.1 g制作微粒皮,称取0.2 g、0.4 g羊膜制作羊膜微粒。按移植治疗方法的不同随机分为3组,即自体皮组、治疗1组、治疗2组,每组8只。①自体皮组,用0.1 g自体微粒皮治疗;②治疗1组,用0.1 g自体微粒皮混合0.2 g羊膜微粒治疗;③治疗2组,用0.1 g自体微粒皮混合0.4 g羊膜微粒治疗。移植术后第21、28天,对各组大鼠创面进行大体观察、组织病理检查并测定创面愈合率和收缩率。结果①移植后21天:3组未愈创面为肉芽组织,有少量渗出,3组创面收缩均不明显;与自体皮组比较,治疗1组、2组创面愈合面积大。创面愈合率:治疗2组大于治疗1组(P>0.05),治疗1、2组大于自体皮组(P<0.05)。创面收缩率:治疗2组小于治疗1组(P>0.05),治疗1、2组小于自体皮组(P<0.05)。组织学观察3组表皮层增生,真皮层毛细血管丰富,表-真皮连接处可见乳头,但自体皮组真皮层内成纤维细胞和毛细血管明显,胶原纤维排列稍乱,并有少量炎症细胞浸润。②移植后28天:治疗1组、2组创面基本愈合或痊愈,自体皮组创面愈合面积增大,裸露创面为肉芽组织且渗出较多,治疗1组、2组较自体皮组收缩小。与自体皮组比较,治疗1组、2组表皮层明显增厚,真皮层胶原纤维排列整齐,表-真皮交接处有明显钉突形成。创面愈合率:治疗2组大于治疗1组(P>0.05),治疗1、2组大于自体皮组(P<0.05)。创面收缩率:治疗2组小于治疗1组(P>0.05),治疗1、2组小于自体皮组(P<0.05)。组织学观察自体皮组真皮层内毛细血管较丰富,可见炎症细胞浸润,成纤维细胞增生明显。结论羊膜微粒与自体微粒皮混合移植可以促进创面愈合。
- 朱富军杨文贤童亚林詹球刘强王磊刘亮吕礼芳辛海明
- 关键词：自体微粒皮创面愈合
- 京尼平交联冻存人羊膜对兔跟腱粘连的预防作用被引量：1
- 2013年
- 目的观察京尼平交联液氮冻存人羊膜预防兔跟腱粘连的效果,为临床预防创烧伤后跟腱粘连提供依据。方法 18只新西兰大白兔随机分为3组、每组6只,后肢跟腱切断后用改良肌腱端-端缝合法-Kessler法缝接。A组跟腱缝接处用京尼平交联的直接快速液氮冻存人羊膜包裹;B组跟腱缝接处用直冻羊膜包裹;C组跟腱缝接处不做任何处理。术后第6周观察跟腱粘连情况并对其粘连评分,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色后行组织病理检查。结果 A组交联羊膜未降解,羊膜与肌腱间仅见局灶少许疏松粘连,有成纤维细胞,偶见淋巴细胞,胶原纤维排列规则;B组直冻羊膜降解,肌腱与周围结缔组织粘连较紧密,有大量成纤维细胞及少量淋巴细胞,胶原纤维排列尚规则;C组肌腱与周围结缔组织粘连严重,大量成纤维细胞向肌腱内部浸润,少量淋巴细胞浸润,胶原纤维排列尚规则。各组跟腱粘连评分为A0.05)。结论京尼平交联快速液氮冻存的羊膜能有效预防兔跟腱粘连,为临床预防创烧伤后肌腱粘连提供了一种新方法。
- 朱富军刘强童亚林王磊吕礼芳刘亮杨文贤辛海明詹球
- 关键词：京尼平人羊膜肌腱
- 液氮快速冻存法保存人羊膜抗冻剂筛选研究被引量：4
- 2013年
- 目的观察不同抗冻剂预处理人羊膜后快速液氮保存的效果。方法剥取剖宫产胎膜中羊膜,分别用生理盐水(C)组、DMEM/甘油(D1)组、DMEM/甘油/二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(D2)组、DMEM/甘油/DM-SO/海藻糖(D3)组预处理并标记后直接投入液氮中保存。于冻存第1、3、6、12个月取出,行台盼蓝、苏木精-伊红(hema-toxylin-eosin,HE)染色,计算羊膜上皮细胞存活百分率(存活率)、上皮细胞结构(细胞结构),并与新鲜羊膜比较。结果C、D1组随着保存时间延长,存活率1>3>6>12个月(P<0.05),细胞结构破坏也逐步加重。D2组内存活率1>3个月(P<0.05),3>6>12个月(P>0.05),保存1、3个月的羊膜细胞结构接近新鲜羊膜,6、12个月有轻微改变。D3组内各时间点存活率有下降(P>0.05),细胞结构变化不明显。各组各时间点羊膜细胞存活率:新鲜羊膜>D3>D2>D1>C(P<0.05;D3组保存1个月与新鲜羊膜比较,P>0.05)。D2、D3组各时间点存活率>新鲜羊膜的70%。结论DMEM/甘油/DMSO/海藻糖抗冻剂预处理的羊膜,经快速液氮冻存1年后的效果最好。
- 杨文贤刘亮朱富军吕礼芳詹球王磊辛海明童亚林
- 关键词：人羊膜抗冻剂
- 京尼平交联冻存人羊膜对大鼠损伤神经修复及预防粘连的作用被引量：2
- 2013年
- 目的观察京尼平交联冻存人羊膜对大鼠坐骨神经损伤修复及预防粘连的治疗作用。方法将18只SD大鼠随机分为对照组和京尼平交联冻存人羊膜组(实验组),每组9只大鼠,所有大鼠切除右侧坐骨神经3 mm并行神经外膜缝合。对照组神经缝合处不做处理,实验组神经缝合处用京尼平交联直接快速液氮冻存的人羊膜包裹。术后每日观察大鼠右后足溃疡及愈合情况,术后第10周对神经组织行粘连程度评分及电生理、组织病理学检测。结果实验组术后右后足溃疡愈合时间短于对照组(P<0.05);实验组神经吻合处与周围组织粘连程度小于对照组(P<0.05);实验组吻合处远端坐骨神经再生轴索数大于对照组(P<0.05);实验组比目鱼肌神经-肌肉电潜伏期较对照组短(P<0.05),波幅值较对照组高(P<0.05)。结论经京尼平交联的冻存人羊膜具有促进损伤坐骨神经修复和预防神经粘连的作用。
- 詹球王磊童亚林朱富军刘强杨文贤刘亮吕礼芳
- 关键词：人羊膜京尼平大鼠坐骨神经神经修复
