卢芮伊
- 作品数：11 被引量：27H指数：3
- 供职机构：武警后勤学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 单核细胞亚群在大鼠心肌缺血再灌注模型中的动态变化及意义被引量：5
- 2014年
- 目的观察单核细胞不同亚群在大鼠心肌缺血再灌注(I/R)模型中的动态变化,并探讨其与I/R损伤后炎症程度及组织修复的关系。方法 Wistar大鼠16只随机分为缺血再灌注组(I/R组)和假手术组(sham组)。采用结扎左冠状动脉前降支45 min后再灌注的方法制备I/R模型。于术前、术后1、3、5、7、14 d抽取大鼠尾静脉血,运用流式细胞术将单核细胞分为CD172a+CD43low和CD172a+CD43high两个亚群,检测各时间点单核细胞亚群的比例,并于术后第30天取心脏行Masson及麦胚凝集素(WGA)染色,观察心肌梗死区纤维化程度及心肌细胞肥大程度与单核细胞表型变化的关系。结果 I/R组CD172a+CD43low单核细胞比例在术后第1天较基线显著升高(P<0.05),第3天达到高峰(P<0.01),之后逐渐下降,从第7天起与基线水平一致;Sham组CD172a+CD43low单核细胞比例在术后第1天升高,与基线相比差异有统计学意义(P<0.05),从第3天起降至基线水平;与sham组相比,I/R组第3天时CD172a+CD43low比例较显著性升高(P<0.01),其余时间点则无显著性差异。两组大鼠CD172a+CD43high细胞比例在各组呈现与CD43low相反的变化。Masson及WGA染色结果显示,I/R组大鼠心肌存在大量胶原纤维的沉积(P<0.05),且心肌细胞存在不同程度的肥大(P<0.01)。术后第3天CD172a+CD43low单核细胞比例与术后30 d左室壁心肌纤维化程度的相关性分析结果显示两者呈正相关(r=0.86,P<0.05)。结论研究表明大鼠心肌I/R后单核细胞亚群发生了动态变化,具有促炎症表型的CD172a+CD43low单核细胞可能成为心肌I/R损伤的治疗靶点。
- 卢芮伊周欣姬文婕罗悦晨杨国红孙海英葛兰姜铁民李玉明
- 关键词：单核细胞亚群缺血再灌注
- 四色流式分析冠心病患者外周血单核细胞亚群及单核细胞-血小板聚集体的变化被引量：8
- 2013年
- 目的:建立基于四色的流式细胞术检测外周血单核细胞亚群及各亚群单核细胞-血小板聚集体(MPA)的方法,并观察冠心病患者外周血单核细胞亚群及各亚群MPA的变化特点。方法:本研究纳入经冠状动脉造影证实的冠心病患者和健康对照者各25例,记录所有研究对象的一般临床资料,并采集外周静脉血,依据单核细胞和血小板的标志性分子CD86、CD14、CD16和CD41对单核细胞亚群和MPA进行四色的流式细胞术(FCM)分析。利用抗CD86-PE-Cy5圈出总的单核细胞(总Mon)群,利用抗CD14-FITC和抗CD16-PE将总Mon分为:经典型(CD14++CD16-,Mon1)、中间型(CD14++CD16+,Mon2)和非经典型(CD14+CD16++,Mon3)3个亚群,最后应用CD41-PE-Cy7分析总Mon和各个亚群的MPA,并应用Flow-count TM荧光微球对各个亚群及MPA的绝对量进行计数,比较两组研究对象外周血单核细胞各亚群及各亚群MPA的差异。结果:冠心病组患者外周血Mon2和Mon3所占百分比和绝对计数均显著高于对照组(P<0.05),而Mon1和总Mon两组间比较差异无统计学意义;与对照组相比,冠心病患者总MPA和Mon2相关MPA所占百分比和绝对计数亦显著增高(P<0.05),而Mon1相关MPA和Mon3相关MPA的百分比及绝对计数两组间比较差异无统计学意义。结论:基于CD14、CD16、CD86和CD41的四色流式分析能够有效定量分析外周血单核细胞各亚群及各亚群MPA。中间型单核细胞及其形成的MPA水平显著升高,为临床上冠心病患者的诊治策略提供了新思路。
- 杨国红卢芮伊孙海英张玲姬文婕周欣石蕊姜铁民李玉明
- 关键词：单核细胞亚群血小板流式细胞术
- Krüppel样因子4基因干扰对RAW264.7细胞凋亡和吞噬的影响被引量：2
- 2013年
- 目的应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW264.7巨噬细胞Krüppel样因子4(KLF4)基因,建立稳定干扰细胞株,观察其对细胞增殖、凋亡和吞噬活性的影响。方法针对小鼠KLF4基因设计合成重组KLF4 shRNA质粒,脂质体法将重组质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达细胞株。Western blot法检测细胞中KLF4蛋白的表达;CCK-8法检测细胞增殖活性;AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞的凋亡情况;荧光素标记的大肠杆菌结合流式细胞仪检测细胞的吞噬活性。结果 KLF4 shRNA能明显抑制RAW264.7细胞的KLF4蛋白的表达,抑制率76%以上;从第3天开始,shKLF4组细胞的生长速度明显低于NC组(转染阴性质粒pGPU6/GFP/Neo-NC)(P<0.05);WT组(野生型RAW264.7)、NC组和shKLF4组的细胞凋亡率分别为:1.73%、6.85%和12.76%,shKLF4组明显高于NC组(P<0.05);各组细胞的平均荧光强度分别为:WT组(122.0±2.80)、NC组(48.97±5.69)和shKLF4组(80.10±4.61),与NC组相比,shKLF4组的细胞吞噬活性明显增高(P<0.05)。结论成功构建了稳定干扰KLF4基因表达的RAW264.7巨噬细胞株,KLF4下调能够明显抑制RAW264.7细胞增殖,促进细胞凋亡,增强细胞的吞噬活性。
- 姬文婕陈雪芬马永强胡道川卢芮伊周欣魏路清
- 关键词：RNA干扰增殖
- 单核细胞亚群与单核细胞—血小板聚集体在不稳定性心绞痛危险分层中的作用初探
- 目的:急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）包括不稳定性心绞痛(unstable angina，UA)、非ST段抬高性心肌梗死(non-ST-elevation myocardialin...
- 卢芮伊
- 关键词：不稳定性心绞痛
- 文献传递
- 干扰NaV1.9对RAW264.7细胞增殖、吞噬和迁移的影响被引量：3
- 2013年
- 目的应用RNA干扰技术沉默RAW264.7小鼠巨噬细胞中电压门控性钠通道(VGSCs/NaVs)α亚单位NaV1.9基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能的影响。方法通过LipofectamineTM2000将短发夹RNA(shRNA)干扰质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选获得稳定细胞株。用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定干扰效率,CCK-8法测定稳定细胞株的增殖活性,流式细胞术检测细胞的细胞周期及吞噬能力,Transwell小室法检测细胞的迁移功能。结果成功建立稳定干扰NaV1.9的细胞株,RT-PCR法鉴定干扰效率达80%。CCK-8法及流式细胞术结果显示,降低NaV1.9的表达使细胞增殖活性下降(P<0.05);流式细胞术结果显示,抑制NaV1.9的表达使细胞吞噬能力降低(P<0.05);Transwell小室法结果显示,干扰NaV1.9的表达使细胞迁移能力减弱(P<0.05)。结论建立了稳定干扰NaV1.9的RAW264.7细胞株,下调NaV1.9的表达使巨噬细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能显著降低。
- 罗悦晨周欣姬文婕孙海英卢芮伊姜铁民李玉明
- 关键词：NAV1增殖
- Sonoclot凝血分析法评价冠心病血小板氯吡格雷反应性研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Sonoclot凝血分析法评价冠心病患者氯吡格雷反应性的有效性。方法选取2012年武警后勤学院附属医院心脏中心收治的82例冠心病患者,分别用Sonoclot凝血分析法和舒血管刺激磷蛋白(VASP)法检测血小板反应性。以血小板VASP测定的血小板反应指数≥50%为氯吡格雷低反应性的标准,探讨Sonoclot凝血分析法与血小板VASP磷酸化法的相关性。结果 Sonoclot凝血分析法中ADP和NON通路中凝血速率差值与凝血酶原时间呈正相关(r=0.22,P<0.05);血小板功能的差值与血小板VASP磷酸化呈正相关(r=0.38,P<0.01);受试者工作特征曲线分析,Sonoclot凝血分析法判定氯吡格雷反应性的曲线下面积为0.67(P<0.01),敏感度为72.34%,特异度为57.14%。结论 Sonoclot凝血分析法与血小板VASP磷酸化法之间存在相关性,可以用于氯吡格雷反应性的评价。
- 孙海英周欣卢芮伊杨国红郭兆增石蕊曾山姬文婕姜铁民李玉明
- 关键词：冠心病凝血功能血小板反应性流式细胞术
- 心肌梗死后心室重塑的治疗新靶点:免疫细胞中介的炎症反应被引量：3
- 2013年
- 心肌梗死是引起全球范围内致死和致残的主要病因之一。心肌梗死后缺血区心肌的功能丧失可通过Laplace定律以心室腔的扩大为代价，维持射血分数；但长时间室壁应力的增加势必引起心室梗死区和非梗死区结构和功能的改变，进而导致心力衰竭出现。目前的临床治疗主要通过早期再灌注治疗减少梗死面积，同时降低左心室负荷，从而改善心肌梗死后的心室重塑。
- 卢芮伊周欣姬文婕李玉明
- 关键词：再灌注治疗心室重塑炎症反应免疫细胞新靶点
- 外周血白细胞-血小板聚集体在肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者和健康人群的分布差异被引量：2
- 2013年
- 【目的】观察外周血白细胞与血小板形成的聚集体在肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者和健康人群的分布情况。【方法】采集2011年11月-2012年5月期间,我中心收治的66例肌钙蛋白阴性的不稳定心绞痛患者外周血,以枸橼酸钠抗凝后采用流式细胞术分别分析粒细胞-血小板、单核细胞-血小板以及淋巴细胞-血小板聚集体的数量和比例。并采用相同方法对51例性别和年龄匹配的健康体检者进行白细胞-血小板聚集体的检测。【结果】与健康体检者相比,冠心病组患者外周血白细胞血小板聚集体的计数显著高于健康对照组[8 162 cells/μl（6 748-12 925）vs.5 911 cells/μl（4 722-7 252）,P〈0.001;以中位数和四分位间距表示,下同]。单核细胞-血小板聚集体百分比较健康对照组明显升高[23.25%（14.01%-40.40%）vs.17.88%（14.23%-24.25%）,P〈0.05],而粒细胞[9.06%（7.15%-11.48%）vs.9.50%（8.14%-11.30%）,P=0.470]和淋巴细胞[7.32%（6.14%-8.94%）vs.7.23%（5.57%-8.03%）,P=0.321]与血小板聚集体百分比在两组间没有显著性差异。【结论】肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者外周血白细胞血小板聚集体较健康人群明显升高,其中单核细胞-血小板聚集体增高更为明显,提示单核细胞-血小板聚集体对于冠心病患者危险分层具有潜在应用价值。
- 葛兰周欣孙海英卢芮伊石蕊曾山姜铁民李玉明
- 关键词：冠心病
- 健康体检者循环单核细胞亚群与性别及年龄的关系被引量：2
- 2014年
- 目的观察成年健康人循环单核细胞各亚群细胞的数量和比例,探讨成年国人外周血单核细胞各亚群与性别和年龄的关系。方法连续纳入2012-05在武警后勤学院附属医院健康体检中心进行常规体检的175名成年人,采集外周静脉血后以枸橼酸钠抗凝,进行CD14/CD16/CD86三色流式细胞术分析,探讨单核细胞各亚群数量和比例的年龄和性别分布特点。结果 45人因检出糖尿病、高血压病等相关临床疾病或可疑疾病而未纳入统计。130位成年人中,男性与女性健康体检者比较,外周血经典型单核细胞(CD14++CD16-)计数与比例差异无统计学意义(P=0.091,P=0.701),中间型单核细胞(CD14++CD16+,P=0.082,P=0.474)、非经典型单核细胞(CD14+CD16++,P=0.085,P=0.756)差异均无统计学意义。CD14++CD16-型、CD14+CD16++型单核细胞计数与比例统计在不同年龄段人群中差异无统计学意义。CD14++CD16+单核细胞计数随着受试者年龄的增加而增加[青年组单核细胞计数为11(6.5,13.5),中年组为9.5(7.0,18.0),老年组为9(7.0,17.5),P=0.012],同时CD14++CD16+型单核细胞比例也有增高趋势,差异无统计学意义。结论本研究首次证实国人循环单核细胞亚群存在年龄分布的差异,尤其是CD14++CD16+型单核细胞亚群随年龄增加而增多,对国人单核细胞亚群相关研究具有参考价值。
- 李彭军韩慧文葛兰孙海英卢芮伊周欣李玉明
- 关键词：性别年龄健康成年人
- 基于CoroNa^(TM) Green检测细胞内Na^+浓度的流式细胞术分析方法的建立和评价被引量：1
- 2012年
- 目的:建立并评价以CoroNa Green检测细胞内Na+含量变化的流式细胞术方法。方法:完全生长培养基培养的H9c2心肌细胞分别给予Na+通道阻断剂TTX(最终作用浓度分别为10、50 nmol/L)和Na+通道激动剂Veratridine(最终作用浓度分别为5、10μmol/L),加CoroNa Green后用流式细胞仪对其信号进行检测;H9c2心肌细胞在含有NaCl(最终作用浓度分别为25、50、100、150 mmol/L)的完全生长培养基中培养24 h,加CoroNa Green后用流式细胞仪对其信号进行检测。结果:与阳性对照组相比,等渗状态给予Na+通道阻断剂TTX大于10 nmol/L时胞内荧光信号强度明显减少(P<0.05),而Na+通道激动剂Veratridine对胞内荧光信号强度无明显影响(P>0.05);在高渗状态下,随着NaCl浓度的增高,细胞内荧光信号明显增强(P<0.05),提示Na+内流明显增多。结论:CoroNa Green作为新型的荧光Na+指示剂,与流式细胞术结合,可以简便、有效的检测细胞内游离Na+含量。
- 毕莹卢芮伊周欣姬文婕杨国红李玉明
- 关键词：CORONA流式细胞术
