刘秋芳 作品数:97 被引量:249 H指数:9 供职机构: 中国医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省科技厅基金 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 环境科学与工程 更多>>
镧对星形胶质细胞增殖能力和细胞内钙浓度的影响 被引量:2 2009年 目的观察氯化镧(LaCl3)对原代培养大鼠星形胶质细胞(astrocyte,AST)增殖能力和细胞内游离钙离子浓度的影响。方法AST经0.25、0.5、1.0和2.0 mmol/L LaCl3染毒24 h和48 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞染LaCl3后增殖能力的变化;采用Fura-2/AM为荧光指示剂,F-4500型荧光双波长分光光度计测定细胞内游离钙离子浓度。结果细胞染毒24 h和48 h后,0.25、0.5、1.0和2.0 mmol/L LaCl3剂量组的细胞存活率分别为86.24%和82.99%,82.26%和79.14%,52.32%和49.97%及38.04%和35.15%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01);染毒24 h在倒置相差显微镜下观察,与对照组比较,1.0 mmol/L组细胞数量明显减少,胞体呈长梭形,胞突增粗,呈树枝状;2.0 mmol/L组上述改变加重,并可见大量脱壁细胞;在染毒24 h后,0.25、0.5、1.0 mmol/L LaCl3剂量组细胞内Ca2+浓度分别为(134.41±0.83)、(163.31±3.97)、(224.84±5.51)nmol/L,显著高于对照组[(129.45±1.09)nmol/L](P<0.05)。结论LaCl3体外染毒可降低AST的增殖能力,其机制可能与其所致的细胞内Ca2+浓度超载有关。 鲁帅 刘秋芳 齐鸣 巫生文 靳翠红 逯晓波 蔡原关键词:镧 星形胶质细胞 细胞培养 生长发育期镧暴露对大鼠大脑皮质内质网应激相关蛋白表达的影响 目的 研究生长发育期镧(La)暴露对大鼠大脑皮质细胞凋亡和内质网应激相关蛋白表达的影响.方法 32只雌性成年Wistar大鼠随机分成对照和低、中、高剂量La染毒组,与雄性成年Wistar大鼠交配,受孕后分别饮用0%、0.... 杨敬华 刘秋芳 逯晓波 巫生文 靳翠红 蔡原关键词:镧 大脑皮质 内质网 慢性染铅对大鼠脑海马齿状回长时程增强的抑制作用及其机理探讨 被引量:3 2000年 给刚断乳的大鼠饮用 0 2 %醋酸铅水 90~ 10 8d后 ,测定血铅和脑铅水平、脑海马齿状回LTP的诱发率、神经元内Ca2 + 浓度和细胞膜和胞液中蛋白激酶C活性 ,以探讨铅损害学习记忆功能的机理。结果 :实验组动物血铅 (4 76±1 0 8μmol/L)和脑铅 (0 5 9± 0 0 6 μg/ g湿重 )水平明显高于对照组 (分别为 0 17± 0 0 8μmol/L和 0 0 6± 0 0 2 μg/g湿重 ) (P<0 0 1) ;诱发的LTP发生率为 18 2 % (2 / 11) ,明显低于对照组的 83 3% (10 / 12 ) (P <0 0 1) ,发生LTP动物的PS幅值增长率为基线值 (按 10 0 %计 )的 12 0 15± 7 15 % ,明显低于对照组的 142 70± 15 10 % (P <0 0 5 ) ,另有 6 3 6 % (7/ 11)的动物出现长时程抑制 (LTD) ;染铅大鼠海马神经元的Ca2 + 浓度、胞膜和胞液PKC活性分别为 2 6 5 48± 5 3 6 1mmol/L、1 5 2±0 40和 1 87± 0 35nmol/min/mg蛋白 ,均比对照组 (为 10 8 81± 2 6 85mmol/L、0 94± 0 33和 1 31± 0 2 9nmol/min/mg蛋白 )显著升高 (P <0 0 1)。这表明 ,慢性染铅损害LTP的形成 ,而海马神经元Ca2 + 浓度和PKC活性的异常增高可能是重要机理之一。 蔡原 刘秋芳 张颖花 郭纳新 奚奇 万伯健关键词:慢性染铅 铅中毒 海马齿状回 长时程增强 钙离子 氯化镧对大鼠海马线粒体和死亡受体凋亡途径的影响 被引量:4 2014年 目的研究氯化镧(lanthanum chloride,LaCl3)对大鼠海马细胞凋亡和线粒体依赖的caspase-9、死亡受体依赖的caspase-8凋亡途径的影响,探讨LaCl3对海马产生毒性作用的机制。方法 40只Wistar雌性成年大鼠随机分成对照和低、中、高剂量LaCl3染毒组。对照孕鼠产仔后饮用蒸馏水,低、中、高剂量LaCl3染毒组孕鼠产仔后分别饮用0.25%、0.50%和1.00%LaCl3溶液。LaCl3染毒组子代大鼠断乳前吸吮母乳染镧,断乳后则通过自行饮用0.25%、0.50%和1.00%LaCl3蒸馏水溶液染镧,至断乳后1个月结束。取子代大鼠海马,采用流式细胞仪测定细胞凋亡率,采用比色法测定线粒体和胞浆内Cyt c含量,采用Western blot法检测Fas、FasL、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白表达水平。结果 LaCl3染毒组子代大鼠海马细胞凋亡率显著高于对照组,且随染毒剂量增加而升高。低剂量LaCl3染毒组子代大鼠海马细胞线粒体内Cyt c含量显著低于对照组,而胞浆中Cyt c含量和caspase-3、caspase-9蛋白表达水平显著高于对照组;中剂量LaCl3染毒组子代大鼠海马细胞线粒体内Cyt c含量显著低于对照组和低剂量LaCl3染毒组,而胞浆中Cyt c含量和caspase-3、caspase-9蛋白表达水平显著高于对照组和低剂量LaCl3染毒组;高剂量LaCl3染毒组子代大鼠海马细胞线粒体内Cyt c含量显著低于对照组和低、中剂量LaCl3染毒组,而胞浆中Cyt c含量和caspase-3、caspase-9蛋白表达水平显著高于对照组和低、中剂量LaCl3染毒组。各LaCl3染毒组子代大鼠海马Fas、FasL和caspase-8蛋白表达水平均与对照组无显著性差异。结论 LaCl3染毒造成大鼠海马细胞凋亡过度的机制可能涉及线粒体caspase-9凋亡途径表达增强,而与死亡受体Fas依赖的caspase-8凋亡途径无关。 杨敬华 刘秋芳 巫生文 逯晓波 靳翠红 蔡原关键词:氯化镧 海马 凋亡 CASPASE ERCC2/XPD基因缺失对苯并[a]芘所致DNA损伤修复的影响 被引量:3 2012年 目的:探讨核苷酸切除修复交叉互补基因2(excision repair cross complementation group2/Xeroderma pigmentosum D,ERCC2/XPD)在苯并[a]芘所诱导的细胞DNA损伤与修复过程中的作用。方法:应用中国仓鼠卵巢细胞系CHO野生型AA8和ERCC2表达缺失型UV5作为细胞对照模型,MTT法比较两种细胞经苯并[a]芘处理后细胞抑制率的差别;彗星试验和Rad51免疫荧光试验检测不同浓度苯并[a]芘处理及修复24h后细胞DNA损伤修复的情况。结果:与野生型AA8细胞相比,UV5细胞对苯并[a]芘所致损伤更加敏感,细胞存活率降低(P<0.05)。彗星试验和Rad51免疫荧光试验结果显示,UV5细胞由于缺失ERCC2/XPD基因,修复苯并[a]芘所致DNA损伤能力降低(P<0.05)。结论:ERCC2/XPD蛋白在核苷酸切除修复中发挥解旋作用,对苯并[a]芘所致DNA损伤修复至关重要。 肖莎 刘秋芳 徐韬钧 关阳阳 靳翠红 李丹丹 逯晓波关键词:苯并[A]芘 核苷酸切除修复 放线菌素D对仓鼠成纤维细胞V79靶细胞和旁观者细胞活力和染色体畸变的影响 被引量:1 2012年 目的:观察放线菌素D(actinomycin D,ACTD)对中国仓鼠成纤维细胞V79靶细胞和旁观者细胞的细胞活力和染色体畸变的影响,以确定ACTD能否诱导旁观者效应的发生。方法:用不同剂量ACTD(0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 mg/L)处理V79靶细胞1 h,并选择其中4 mg/L ACTD作用1 h开始计时,分别在第4、8、12和24 h时取靶细胞去细胞培养液(conditionedmedium,CM),培养正常细胞24 h后,进行旁观者效应的观察。用MTT法测定靶细胞和旁观者细胞活力;并对靶细胞和旁观者细胞进行染色体畸变分析。结果:随着ACTD剂量的增加,靶细胞的活力下降,存在明显的剂量一效应关系(P<0.05)。4 mg/L ACTD作用1h时细胞活力接近50%且稳定。旁观者细胞活力在用4~12 h CM培养时逐渐增加(P<0.05),用24 h CM时又下降(P<0.05),4 h CM诱导旁观者细胞损伤的作用最强。靶细胞的染色体畸变率随ACTD剂量的增加而增高,具有剂量-效应关系(P<0.05)。旁观者细胞染色体畸变以4 h CM诱导的作用最强,随着加入CM时段的延后,损伤逐渐减轻(P<0.05),在24 h CM又趋严重(P<0.05);旁观者细胞与靶细胞染色体畸变类型相似,以断裂为主,伴有少量环形染色体、碎片和双着丝粒染色体。结论:ACTD可以诱导旁观者效应的发生,染色体畸变在靶细胞和旁观者细胞均以断裂为主。 靳翠红 巫生文 逯晓波 刘秋芳 蔡原 肖云关键词:放线菌素D 条件培养液 旁观者效应 染色体畸变 玉米胚提取物对糖尿病大鼠血糖、血脂及血清氧化应激状态的影响 目的:探讨玉米胚芽中玉米胚提取物对于糖尿病大鼠血糖及主要脏器抗氧化能力的影响.方法:成年雄性Wistar大鼠36只,随机分为以下6组:1)正常对照组;2)糖尿病模型组:腹腔注射四氧嘧啶175mg/kg,连续两天;3)二甲... 赵维诚 逯晓波 刘秋芳关键词:血糖 血脂 玉米胚 糖尿病 氧化应激 基于转染细胞模型研究ERCC2/XPD基因多态与苯并[a]芘所致DNA损伤修复的关联 逯晓波 肖莎 刘秋芳 关阳阳 李丹丹铅对大鼠脑海马神经细胞Ca^(2+)浓度及蛋白激酶c活性的影响 被引量:24 1997年 铅对大鼠脑海马神经细胞Ca2+浓度及蛋白激酶c活性的影响*孙黎光1邢伟1刘素媛1时利德2蔡葵2滕国玺2蔡原3郭纳新3刘秋芳3*国家自然科学基金资助课题(39470620)1.中国医科大学生物化学教研室(沈阳110001)2.中国医科大学神经生理教研室... 孙黎光 邢伟 刘素媛 时利德 蔡葵 滕国玺 蔡原 郭纳新 刘秋芳关键词:铅 海马 神经元细胞 放线菌素D诱导V79细胞凋亡模型的建立 被引量:1 2012年 目的确定RNA合成抑制剂——放线菌素D(actinomycin D,ACTD)诱发V79细胞凋亡的最适作用浓度和时间,建立细胞凋亡模型。方法采用不同剂量(0~8.0 mg/L)的ACTD染毒V79细胞不同时间(0.5~4 h)。采用MTT法检测细胞活力;采用流式细胞仪法分析细胞凋亡和坏死率。结果各剂量ACTD染毒不同时间后V79细胞活力均下降(P<0.05)。与染毒0.5 h比较,在染毒1 h后仅0.25、1、2、8 mg/L ACTD染毒V79细胞活力下降,在染毒2 h后0.25、1、2、4、8 mg/L ACTD染毒V79细胞活力下降(P<0.05),在染毒4 h后各剂量ACTD染毒V79细胞活力均下降(P<0.05)。各剂量ACTD染毒不同时间后V79细胞凋亡率均升高(P<0.05);与染毒0.5 h比较,各剂量ACTD染毒1 h以及0.25、0.5、1、2 mg/L ACTD染毒2、4 h后V79细胞凋亡率均升高(P<0.05),4 mg/L ACTD染毒4 h后V79细胞凋亡率下降(P<0.05)。与对照组比较,0.25、2mg/L ACTD染毒0.5 h,1、2、4 mg/L ACTD染毒2 h以及各剂量ACTD染毒4 h后V79细胞坏死率均升高(P<0.05);与染毒0.5 h比较,2 mg/L ACTD染毒1 h后V79细胞坏死率下降(P<0.05),1、4 mg/L ACTD染毒2 h以及0.5、1、2、4 mg/L ACTD染毒4 h后V79细胞坏死率均升高(P>0.05)。结论 ACTD诱发V79细胞凋亡的最适剂量为4 mg/L,最佳作用时间为1 h。 靳翠红 薛金玉 巫生文 逯晓波 刘秋芳 蔡原关键词:放线菌素D V79细胞 细胞凋亡 旁观者效应