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刘海涛: 作品数：31 被引量：27H指数：3; 供职机构：山东农业大学更多>>; 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金中国博士后科学基金山东省博士后创新项目更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生文化科学理学更多>>

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应用重组MSG1蛋白检测猪附红细胞体抗体的ELISA检测方法的建立被引量：3: 2011年; 【目的】针对猪附红细胞体g1基因编码的MSG1表面粘附蛋白(rMSG1)和以此蛋白制备的多克隆抗体,建立相应的ELISA方法进行猪附红细胞体的临床检测,并进行效果评估,以获得一种猪附红细胞体感染的有效检测手段。【方法】将MSG1-pET28c_E.coli BL21菌株,在适宜的条件进行诱导表达,经菌体破碎、层析等步骤获取纯化的目的蛋白。以纯化的rMSG1制备免疫原接种小鼠,获取符合要求的多克隆抗体。以rMSG1和多克隆抗体建立ELISA检测方法,分析其敏感性、特异性、符合性和重复性。【结果】接种后获得了符合效价的抗血清;基于rMSG1的间接ELISA方法临床检测猪附红细胞体感染率为46.25%,其中阳性样本对已知小鼠抗血清有明显的阻断作用,并且与其它一些抗原无交叉反应;此ELISA方法的特异性和敏感性分别可达到97.06%和95.92%,较间接血凝试验(IHA)有更高的检出率。【结论】结果显示MSG1具有良好的抗原性,建立的ELISA方法具有较高的敏感性、特异性、符合性和可重复性,在临床检测中可以取得理想的效果。; 刘永夏刘建柱成子强周栋王振勇刘海涛王林柴同杰; 关键词：猪附红细胞体 ELISA

猪附红细胞体ORF2的全基因合成、表达与鉴定被引量：2: 2011年; 通过重叠区扩增法(PCR-based accurate synthesis,PAS)人工合成猪附红细胞体ORF2基因,并使其在大肠杆菌(DE3)中高效表达。根据GenBank注册的AJ504999的ORF2基因序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成11对寡核苷酸片段,用PAS方法,人工合成ORF2基因。基因克隆入pMD18-T载体,经测序证实正确后,连接到表达载体PET-28a,获得重组表达质粒PET-28a/ORF2,导入大肠杆菌BL21(DE3),在37℃,IPTG终浓度1mmol/L的条件下诱导表达,经SDS-PAGE分析,Western-blot鉴定,在35 000附近出现目的片段。同时通过生物信息学软件对其蛋白二级结构及抗原表位等方面进行预测。; 周栋成子强刘建柱张利刘海涛刘永夏周川柴同杰; 关键词：猪附红细胞体 ORF2

母猪产后瘫痪的防治: 产后瘫痪又称产后风，是母猪分娩后突发或渐进性发生的一种以知觉丧失和四肢瘫痪为主要特征的急性低血钙症。产后瘫痪是农村散养户和集约化猪场中常见到的一种疾病，它并非是一种独立的疾病，而是由多种因素所引起的一种症状表现，主要发生...; 周栋刘海涛周川刘永夏; 关键词：母猪产后瘫痪急性低血钙症

猪附红细胞体ORF4基因片段的人工合成及基因表达: 2011年; 目的本研究通过人工合成猪附红细胞体ORF4基因,使其在大肠杆菌中高效表达。方法选择GenBank注册的AJ504999序列的ORF4基因,应用Graphical Codon Usage Analyser选择大肠杆菌偏爱的密码子,改变基因的transl_table,设计并合成3对寡核苷酸链,用PCR-based accurate synthesis（PAS）法进行人工合成。经测序正确后,连接到表达载体PET28a,获得重组表达质粒PET28a/ORF4,导入大肠杆菌BL21（DE3）,在30℃,IPTG终浓度1mmol/L的条件下诱导表达,经SDS-PAGE分析,在11 kDa附近出现目的片段。结果结果表明ORF4基因在大肠杆菌中能够得到高效的表达,通过生物信息学软件分析表明,该蛋白存在19个配基结合位点;在21~22位氨基酸可能存在信号肽裂解位点;为胞内蛋白,没有糖基化位点。结论 ORF4基因能够在大肠杆菌中表达,推测其在M.suis蛋白质的形成,M.suis的生物功能方面有着重要的作用。; 周栋陈甜甜刘建柱成子强张利刘海涛张璐刘永夏柴同杰; 关键词：猪附红细胞体

猪附红细胞体重组MSG1蛋白ELISA检测方法的建立: 【目的】针对猪附红细胞体g1基因编码的MSG1表面粘附蛋白(rMSG1)和以此蛋白制备的多克隆抗体,建立相应的ELISA方法进行猪附红细胞体的临床检测并进行效果评估,以获得一种猪附红细胞体感染的有效检测方法。【方法】将M...; 刘永夏刘建柱成子强周栋王振勇刘海涛王林柴同杰; 关键词：猪附红细胞体 ELISA; 文献传递

猪附红细胞体重组MSG1蛋白ELISA检测方法的建立: 目的：针对猪附红细胞体gl基因编码的MSG1表面粘附蛋白(rMSG1)和以此蛋白制备的多克隆抗体，建立相应的ELISA方法进行猪附红细胞体的临床检测并进行效果评估，以获得一种猪附红细胞体感染的有效检测方法。方法：将MSG...; 刘永夏刘建柱成子强周栋王振勇刘海涛王林柴同杰; 关键词：附红细胞体

猪沙门氏菌病易淆疾病的鉴别诊断被引量：4: 2010年; 猪沙门氏菌病是危害养猪业发展的重要疾病之一,为了对该病能够做出快速、准确地诊断,对该病的发生能够做到及时发现、及时治疗,主要从该病以及与之有类似症状的疾病的流行病学、临床症状、病理变化等方面的区别进行论述。; 刘海涛周栋刘建柱; 关键词：沙门氏菌

猪传染性水疱病的流行机制及预防控制: 疱病病毒感染猪体后，在机体随血液、淋巴液迅速扩散至其他组织器官，并排出大量病毒，进而借助其他媒介引起疫病的流行，给养猪业造成了不小的危害，现通过对其病原特点、流行病学特征的研究，总括了猪水疱病的流行概况，并根据本病的发病...; 刘永夏刘海涛周栋陈甜甜周川; 关键词：猪水疱病流行病学病原特征

基于“3S”技术的农田有机碳监测技术体系与应用: 李玉环梁勇陈红艳吴秋兰常春艳李增兵袁秀杰张玉荣刘海涛; 农田有机碳智能化监测技术体系研究对评价土地生产力、优化用地结构有重要意义。国内农田有机碳检测技术以传统田间采样和实验室测定为主，智能化监测技术研究仍处初级阶段，且主要存在三方面的问题：研究尺度和数据源单一；缺乏农田有机碳...; 关键词：; 关键词：无线传感器