刘慧娟 作品数:20 被引量:46 H指数:4 供职机构: 信阳师范学院生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 河南省高校青年骨干教师资助项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 建筑科学 更多>>
利用PCR技术快速制备DNA分子量标准物 被引量:10 2008年 目的:制备一套DNA分子量标准物。方法:利用多聚酶链式反应技术(PCR),以连接有9个不同大小DNA片段的pMD18-T载体为模板,M13引物为通用引物,进行大规模扩增,并进行2%琼脂糖凝胶电泳分析和利用TanonGIS凝胶图像处理系统对凝胶扫描及拍照。结果:DNA分子量条带大小依次为1653bp、1173bp、691bp、606bp、496bp、401bp、326bp、238bp、155bp,条带分布适度、亮度清晰。结论:制备了能满足研究和实验室的要求DNA分子量标准物,和市售的相比,成本大大降低。 刘慧娟 冯志国 何光源关键词:多聚酶链式反应 种子特异性表达噬夏孢欧文氏菌crtB基因的植物表达载体构建 被引量:1 2009年 利用PCR技术扩增出tp和crtB基因,胶回收后分别连接到pMD18-T载体测序。tp和crtB基因经酶切回收后通过pBlue-scriptKS质粒连在一起构建成pSK-tp-crtB,通过BamHⅠ和SacⅠ酶切,从pSK-tp-crtB载体上切下目的基因片段tp-crtB,替换pBI121-napA载体中的GFP基因,构建了tp-crtB基因在植物种子中特异性表达的载体pBI121-tp-crtB。转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α。测序鉴定后将阳性质粒转化农杆菌感受态细胞EHA105,经菌液和质粒PCR分析,获得了真核表达载体pBI121-tp-crtB,为crtB基因功能的进一步研究奠定基础。 刘慧娟 郎君 冯志国 何光源关键词:根癌农杆菌 植物表达载体 茶树CsCOR1基因的原核表达 2011年 将来自茶树的冷诱导基因CsCOR1与pGEX-6p-1质粒上的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)融合,构建为融合表达载体,最终实现了在0.8 mmol/L IPTG诱导下的原核表达,获得了36 kD的可溶性融合蛋白,为对CsCOR1基因功能的进一步研究奠定基础。 李先文 刘慧娟 余海波 袁红雨关键词:茶树 融合基因 原核表达 钙离子对光暗适应罗氏沼虾感光细胞中膜结合Gq蛋白α亚基的影响 被引量:1 2006年 用蛋白质提取液提取膜结合Gq蛋白α亚基并SDS-PAGE电泳,利用Tanon G IS凝胶图像处理系统分析其含量.光暗条件下,在3种溶液孵育后的感光细胞中都提取到了42 kDa的膜结合Gq蛋白α亚基.高钙溶液、生理溶液、低钙溶液孵育后的感光细胞中膜结合Gq蛋白α亚基的含量,光适应组分别是4.58%、4.63%、5.05%;暗适应组分别是4.56%、4.94%、5.13%. 冯志国 谢素霞 刘慧娟关键词:感光细胞 钙离子 富甘氨酸果蝇抗菌肽SK_(66)对子宫颈癌细胞Hela增殖的研究 被引量:1 2012年 SK66是一个编码了N端为丝氨酸、C端为赖氨酸且含有66个氨基酸残基的富甘氨酸果蝇抗菌肽。SK66能杀灭宫颈癌细胞Hela,经SK66处理后子宫颈癌细胞Hela的贴壁性很快被破坏,大量细胞悬浮并死亡。通过MTT试验,发现SK66能够显著抑制子宫颈癌细胞Hela的增殖。采用膜片钳技术,研究表明SK66能在DRG细胞上形成阳离子通道。这说明SK66对癌细胞的杀灭机制可能为细胞膜出现大量穿孔、原生质泄漏,细胞破裂死亡。 冯志国 刘慧娟 李涛 李涛关键词:果蝇 膜片钳 阳离子通道 抗菌肽SK_(66)的生物信息学分析 被引量:1 2022年 从数据库中检索出CG13551基因氨基酸序列信息,生理生化分析显示:SK_(66)蛋白含有107个氨基酸残基,分子量约11948.3Da,理论等电点为8.96。该蛋白中,甘氨酸(Gly)含量最高,为14.0%;其次为谷氨酸(Glu)和丙氨酸(Ala),分别为11.2%和9.3%。SK_(66)蛋白是一个亲水蛋白质但不是一个分泌蛋白。SK_(66)蛋白不存在跨膜结构域。蛋白质二级结构包括57.96%α-螺旋、10.28%β-折叠、β-转角以及31.78%无规则卷曲等构象。进化树显示,主要分成两类,较为高等的动物分为第一类,包括人、小鼠、河豚;而较为低等的动物归为一类,包括斑马鱼、果蝇。这与物种的进化程度相一致。 冯志国 王一帆 李琳 刘振振 卢甜甜 刘慧娟关键词:结构域 分泌蛋白 物种进化 利用紫外诱变育种选育强降解纤维素真菌的研究 被引量:12 2003年 以纤维素粉为唯一碳源,从棉籽壳中筛选出能分解纤维素(CMC)的霉菌,利用常规方法鉴定为绿色木霉,通过紫外线诱变提高分解纤维素的能力,采用水解圈和滤纸崩溃法进行初筛,摇瓶培养复筛的方法,筛选出一突变绿色木霉(T118),降解纤维素的能力提高了1倍,CMC酶活性提高了50%,C1酶活性提高了40%,还对该突变株产酶条件进行了研究,得出最适条件为:稻草粉:麸皮=4:1,发酵时间为5d,发酵温度为30℃,该酶最适反应PH为6,最适反应温度为50℃。此突变株易培养,有利于工业生产,具有重大的实用价值。 张伟 张海宾 袁正仿 刘慧娟关键词:绿色木霉 纤维素酶 诱变 选育 采用农杆菌花序浸染法获得转crtB基因拟南芥 被引量:1 2013年 利用农杆菌花序浸染法将构建的植物表达载体pBI121-tp-crtB转入拟南芥(Arabidopsis thaliana)野生型Columbia中,共获得了14株转基因系,并进行了转基因拟南芥种子萌发实验。结果表明tp-crtB基因已经成功转入拟南芥中,其不影响拟南芥种子的正常萌发。 刘慧娟 冯志国 李先文 李涛 李涛我国信托业市场结构对绩效影响的实证研究 我国信托业受益于自身的制度优势、灵活的业务模式、经济的持续高增长和市场改革的不断深化等因素,经过三十年的发展已具有一定的规模。2012年信托资产规模首次超过了保险业的资产规模,在全国金融部门的排名仅仅落后于银行业。但与美... 刘慧娟关键词:信托业 市场结构 战略管理 绩效评价 文献传递 富甘氨酸果蝇抗菌肽SK_(66)的抗菌机制研究 2012年 为了研究SK66的抗菌机制,对K66-his、AMA-SK66、Trx-SK66进行序列比对和分析,结果发现Trx-SK66是SK66的氮端加了1个Trx蛋白,AMA-SK66是SK66的氮端加了2个丙氨酸和1个甲硫氨酸,SK66-his是在SK66的碳端加了6个组氨酸;比较SK66-his、AMA-SK66和Trx-SK66杀灭细菌活性,结果表明Trx-SK66没有杀菌活性,AMA-SK66杀菌活性大大降低。试验结果说明氮端氨基酸对SK66杀菌活性很重要,尤其氮端氨基酸的极性。 冯志国 刘慧娟 李涛 李涛关键词:果蝇 抗菌机制