刘兴汉
- 作品数：89 被引量：161H指数：7
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- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 一种具有抗肿瘤作用的肿瘤抑素融合肽及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种具有抗肿瘤作用的肿瘤抑素融合肽（41肽）及其制备方法和应用。本发明所述的肿瘤抑素融合肽的氨基酸序列为SEQ No.1，编码所述肿瘤抑素融合肽的核苷酸序列为SEQ No.2。本发明在肿瘤抑素42肽的基础上，使...
- 杨宝峰刘兴汉初文峰郑天虎袁丽杰
- 文献传递
- 重组人内皮抑素的表达、纯化、复性方法研究被引量：7
- 2003年
- [目的]摸索重组人内皮抑素(recombinanthumanendostatin,rhES)的最佳生产工艺路线,解决rhES在大肠杆菌中表达提取的蛋白变性问题。[方法](1)按所优化的条件进行rhES的表达,包涵体的提取、洗涤、变性、复性。(2)活性检测:观察rhES对裸鼠皮下移植瘤生长情况及病理组织学的影响。[结果](1)每升培养基可得可溶性rhES蛋白10.55mg,rhES在大肠杆菌中的表达量超过总菌体蛋白的60%,纯化后的蛋白纯度超过95%。(2)动物实验:rhES抑瘤效果显著,抑瘤率为45.86%,实验组与对照组在肿瘤体积、重量、裸鼠除瘤净重、瘤重/鼠净重4个指标上均有显著性差异(P<0.01)。光镜见实验组微血管密度降低,坏死面积增加,电镜见实验组凋亡细胞增加。[结论]本实验所优化的生产工艺路线可获得可溶性的、高纯度、高活性的rhES蛋白,解决了rhES在大肠杆菌中提取时的蛋白变性问题。
- 任明华刘兴汉闫玉清姚鸿超王淑晶徐建勇
- 关键词：内皮抑素纯化复性
- 内皮抑素抑制喉鳞癌作用机制的初步探讨被引量：1
- 2006年
- 目的探讨内皮抑素对喉鳞癌细胞（Hep-2）的作用及其可能的机制。方法①MTT法检测不同浓度（10—50μg/ml）的内皮抑素作用72h和30μg/ml的内皮抑素作用不同时间（24—72h）对Hep-2细胞的影响；②电镜观察Hep-2细胞超微结构的变化；③RT-PCR法检测Hep-2细胞内皮抑素作用组中Survivin基因的表达。结果①MTT检测显示，内皮抑素（20—50μg/ml）能抑制Hep-2细胞的增殖（P〈0．05，P〈0．01），具有剂量．时间依赖性；②电镜观察，Hep-2细胞内皮抑素作用组均出现凋亡改变；③RT-PCR结果，与正常Hep-2细胞对照组相比较药物作用组Survivin基因表达受到部分抑制，差异呈显著性（P〈0．01）。结论内皮抑素能抑制喉鳞癌Hep-2细胞，并具有时间-剂量依赖性，机制可能为诱导细胞凋亡。提示，内皮抑素可能通过诱导喉癌细胞本身的凋亡，对喉癌的生长与转移起到抑制作用。
- 金德均王宇肖辉王超何晶晶刘兴汉
- 关键词：内皮抑素喉鳞癌细胞凋亡
- 重组人促红细胞生成素纯化工艺
- 2008年
- 目的:建立适合大规模生产重组人促红细胞生成素(rhEPO)的纯化工艺。方法:采用无血清培养分泌rhEPO工程细胞株,收集培养基上清,经过滤,染料亲和层析、离子交换层析、分子筛层析纯化。结果:所纯化的rhEPO纯度达99%以上,比活(包括体内、体外)为2.0×105IU/mg以上,活性回收率为40%,相对分子量为38000左右,等电点为3.7～4.2。结论:该纯化工艺简便、重复性好,产品质量高,适合大规模生产。
- 李邦东黄健屈道颖刘兴汉
- 关键词：纯化工艺
- 重组成骨生长肽对兔同种异体骨移植的成骨影响被引量：3
- 2003年
- 目的 观察重组成骨生长肽 (rOGP)静脉应用对兔同种异体骨移植愈合过程中成骨活性的影响。方法 4 2只日本大耳白兔选择一侧前肢造成桡骨中段骨缺损 ,植入常温储存的异体骨 ,随机分成二组。实验组从术后第1d开始每天注射rOGP0 .5 μg kg ,至取材前 1d ,对照组注射同样剂量的生理盐水。术后 4、8、1 2周每组各处死 7只 ,测血清ALP、BGP水平 ,同时取材摄X线片。结果 放射线学显示 ,实验组术后 8周植骨与宿主骨愈合 ,对照组术后 1 2周植骨与宿主骨愈合。实验组血清碱性磷酸酶 (ALP)、骨钙素 (BGP)水平高于对照组 ,术后 4周差异非常显著 (P <0 .0 1 ) ,术后 8、1 2周显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 全身应用rOGP通过提高宿主体内成骨细胞的活性 ,促进同种异体骨移植的愈合。
- 宋大勇赵宝权刘兴汉余琼滕立臣沈玉梅
- 关键词：同种异体骨移植成骨碱性磷酸酶骨钙素
- 内皮抑制素小分子多肽及编码该多肽的核苷酸序列和互补链
- 内皮抑制素小分子多肽及编码该多肽的核苷酸序列和互补链，它涉及一种小分子多肽及编码该多肽的核苷酸序列和互补链。它解决了现有内皮抑制素分子量大，只能用于肌肉和皮下注射，静脉用药不安全和用药剂量大的缺陷。内皮抑制素小分子多肽的...
- 刘兴汉赵炜明林雪松
- 文献传递
- 重组人成骨生长肽对化疗小鼠白细胞减少的影响被引量：3
- 2007年
- 目的研究重组人成骨生长肽(rhOGP)对环磷酰胺(Cy)化疗损伤小鼠白细胞减少的影响;观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法用Cy腹腔注射每日100mg/kg,连续3d,造成小鼠的化疗损伤模型。拮抗实验中,分别给予低、高剂量的rhOGP,连续13d,采用皮下注射给药途径,于第0d、第4d(Cy造模后)、第9d、第14d检测外周血白细胞(WBC)数变化。预防实验中,分别给予rhOGP、DTT与生理盐水,连续10d,并于第8、9、10d同时给予Cy,分别于实验前、实验后记取外周血WBC数。利用MTT法和细胞生长曲线观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。结果rhOGP能促进Cy损伤小鼠WBC数的恢复,高、低剂量组间略有差异。rhOGP能明显降低Cy损伤小鼠外周血白细胞减少的幅度。rhOGP对人肺腺癌Anip细胞及人胃癌SGC-7901细胞的增殖无明显促进作用。结论rhOGP可促进Cy损伤小鼠外周血白细胞的恢复,rhOGP对Cy化疗小鼠白细胞数减少有预防作用,且对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞的增殖无促进作用,提示rhOGP作为肿瘤治疗辅助用药的潜在价值。
- 刘远莉李冀宏张宇雯马洪星栗亚刘兴汉
- 关键词：白细胞数环磷酰胺
- 重组人内皮抑素的纯化及抗肿瘤活性研究被引量：6
- 2005年
- [目的]从高效表达的基因工程菌中纯化重组人内皮抑素,对其抗肿瘤活性进行研究。[方法]经异丙基硫代鄄β鄄D鄄半乳糖苷(IPTG)诱导,重组人内皮抑素在大肠杆菌基因工程菌中以包涵体形式高效表达。通过凝胶层析纯化重组内皮抑素蛋白。应用鸡胚绒毛尿囊膜实验(CAM),肺癌细胞MTT试验及细胞迁移抑制实验,裸鼠皮下移植喉癌抑瘤实验、病理组织切片、免疫组化指标的测定等检测研究重组人内皮抑素的抗肿瘤活性。[结果]重组内皮抑素的复性率可达40%。重组内皮抑素在体外直接抑制肺癌细胞的增殖及迁移。用药21天,对裸鼠皮下移植喉癌的抑瘤率达到40.66%,HE染色、免疫组化及CAM实验表明其对肿瘤组织新生血管的生成有较强的抑制作用。[结论]重组人内皮抑素具有抑制肿瘤组织新生血管生成和直接抑制肿瘤细胞生长和迁移的双重抗肿瘤活性。
- 张广美王淑静任明华徐建永刘远莉陶占华李冀宏刘兴汉
- 关键词：内皮抑素蛋白表达蛋白纯化
- 两个改造后的肿瘤抑素抗肿瘤活性肽活性研究被引量：11
- 2007年
- 为了研究改造后的肿瘤抑素2个抗肿瘤活性肽的作用机制,明确其不同的抗肿瘤活性,采用基因工程技术原理,人工合成肿瘤抑素中185～203位氨基酸所对应的19肽和T7肽(74～98位氨基酸)基础上改造的21肽碱基序列,将其与融合蛋白表达载体pTYB2重组后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用几丁质亲和层析柱一步纯化,直接获得19肽和21肽,利用MTT法、细胞生长曲线、TUNEL法、流式细胞仪早期细胞凋亡检测和细胞周期检测,小鼠H22腹水型转移型肝癌实体瘤抑瘤实验并结合组织病理学切片,来研究19肽和21肽单独应用或联合应用对肿瘤细胞和内皮细胞生长和凋亡的影响以及对体内肿瘤的抑制情况.体内外实验表明:获得的19肽抗肿瘤活性以直接作用肿瘤细胞为主,也有抑制新生血管生成的作用.基因重组21肽抗肿瘤作用是通过抑制肿瘤组织新生血管生成实现的.19肽、21肽联合应用对肿瘤细胞、内皮细胞生长抑制和促凋亡作用明显增强,抗肿瘤活性大大提高.联合用药弥补了单独用药不足,产生协同抗肿瘤作用,可能会成为今后肿瘤治疗的一个主要方向.
- 王淑静刘兴汉季宇彬陈宁
- 关键词：肿瘤抑素蛋白质表达细胞增殖细胞凋亡肿瘤治疗
- 一种抗肿瘤多肽及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种具有抗肿瘤作用的多肽及其制备方法和应用。本发明所述的抗肿瘤多肽的氨基酸序列为SEQ ID No.1所示。本发明多肽利用固相化学合成法合成，产量高，工艺稳定，分子量为3299.2Da。研究表明本发明多肽具有抑...
- 杨宝峰刘兴汉杜智敏吕延杰初文峰王晓峰
- 文献传递
