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藏獒基因组DNA提取及RAPD引物筛选: 2010年; 分别采用酚-氯仿法和改进的盐析法对藏獒血液基因组DNA进行了提取,并对可用于藏獒RAPD分析的随机引物进行了筛选。结果表明,酚-氯仿法提取的藏獒血液基因组DNA在浓度和纯度上均显著高于改进的盐析法(P<0.05),并且通过筛选得到了27条可用于藏獒RAPD分析的随机引物。; 兰小平雒林通李三相李一婧王廷璞马宏棋鄢珣崔泰保; 关键词：藏獒 DNA 引物筛选

藏獒RAPD-PCR反应体系的优化: 2010年; 以藏獒血液为试验材料,提取基因组DNA后,对藏獒RAPD反应体系进行了优化。结果表明,20μL的最佳反应体系为:2.5 mmol/LMg2+、0.6 mmol/L dNTP、50 ng模板DNA、1.25UTaq酶和0.3μmol/L引物;藏獒RAPD反应的最佳退火温度为36.5℃。; 兰小平李三相李一婧王廷璞黄晶鄢珣崔泰保; 关键词：藏獒

藏獒血液蛋白遗传多样性的研究被引量：1: 2009年; 采用不连续垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对河曲藏獒、青海藏獒、青海藏狮犬和青海土种犬共4个群体103只犬的9个血液蛋白基因座(Tf、Po、Es-1、Es-2、Sα2、Hb、Alb、Pr、Amy)的多态性进行了检测,分析了两个藏獒群体的群体内和群体间的遗传变异,并以Nei氏标准遗传距离(D)为基础用UPGMA法探讨了不同犬群之间的遗传关系。结果表明,在4个被测犬群中,Tf、Po、Es-1、Es-2和Sα25个基因座上存在多态性,其中Tf、Es-1和Po分别由3个等位基因所控制,Es-2和Sα2分别由2个等位基因所控制,而Hb、Alb、Pr和Amy基因座均呈现单态;河曲藏獒群体内遗传变异较青海藏獒丰富,而两个藏獒群体间的遗传分化程度很低(GST=0.0187);以Nei氏标准遗传距离(D)为基础的UPGMA法聚类结果表明,青海藏獒与青海藏狮犬和青海土种犬的遗传关系近于河曲藏獒。; 兰小平陈永昌郭宪鄢珣崔泰保; 关键词：藏獒血液蛋白多态性

不同生态类群藏獒亲缘关系的RAPD分析: 2010年; 采用RAPD技术对不同生态类群藏獒个体之间的亲缘关系进行了分析,从80个随机引物中筛选出27个引物,共扩增出369条带,其中339条带表现出多态性,多态性位点百分率为91.86%。根据20只藏獒个体之间的Nei氏标准遗传距离用UPGMA法构建了聚类分析图。结果表明:河曲藏獒和青海藏獒同类群个体之间亲缘关系较近,在聚类图上形成了河曲藏獒类群和青海藏獒类群各自独立的分支,这一结果有力地支持了按地域对藏獒进行生态类群划分的说法。; 兰小平郭宪安建平鄢珣; 关键词：藏獒 RAPD 亲缘关系

藏獒随机扩增多态DNA分析: 2010年; 采用随机扩增多态DNA技术,对不同品种的20只藏獒个体之间的亲缘关系进行了分析。从80条随机引物中筛选出了27条引物,共扩增出369条条带,其中339条表现出多态性,多态性位点百分率为91.87%。根据20只藏獒个体之间的遗传距离,用UPGMA法构建了聚类分析图。结果表明,河曲藏獒和青海藏獒同类群个体之间亲缘关系较近,在聚类图上形成了河曲藏獒类群和青海藏獒类群各自独立的分支,这一结果有力地支持了按地域对藏獒进行类群划分的说法。; 兰小平黄晶杨俊年唐韦华谢元平康景红鄢珣; 关键词：藏獒随机扩增多态DNA 亲缘关系

藏獒基因组DNA提取方法的比较研究: 2009年; 分别采用酚-氯仿法和改进的盐析法对藏獒血液基因组DNA进行了比较提取,并以提取的基因组DNA为模板进行了RAPD-PCR扩增.结果表明,酚-氯仿法提取的藏獒血液基因组DNA在浓度和纯度上均显著的高于改进的盐析法(P<0.05),但两种方法所提取的藏獒基因组DNA都可用于RAPD分析.; 兰小平李一婧马纲万红玲张敏张海林; 关键词：藏獒基因组DNA RAPD

Study on Polymorphisms in the Blood Protein of Tibetan Mastiff被引量：5: 2009年; [ Objective] The aim was to study the protein polymorphism in the blood of Tibetan Mastiff, and provide some theoretical basis for resource protection and reasonable development and utilization of Tibetan Mastiff varieties. [ Method] A total of 103 blood samples were taken from four populations of Hequ Tibetan Mastiff, Qinhai Tibetan Mastiff, Tibetan Spaniel and native dogs of Qinghai. Seven blood protein Iocus（Tf, Po, Sα2, Hb, AIb, Pr and Amy）were investigated by using vertical polyacrylamide gel electrophoresis with discontinuous buffer system. Then the genetic variation during different populations was analyzed. [ Result] Genetic variations were observed in Tf, Sα2 and Po in four populations, others were not polymorphic. There were three alleles at the locus of Tf and Po, two alleles at the loci of Sα2. Effective number of alleles and Nei＇s average expected heterozygosity were 1. 532 4 and 0.230 3 relatively, all higher in Tibetan Mastiff than other populations. [ Conclusion] Protein locus in blood of Tibetan Mastiff existed in genetic variation.; 兰小平郭宪陈永昌鄢珣崔泰保

人血凝块DNA三种提取方法的比较被引量：1: 2011年; 采用高盐法、硅珠法、改进的经典酚抽提法三种方法提取人血凝块DNA,通过紫外分光光度仪及琼脂糖凝胶电泳测定DNA的纯度和含量.实验结果表明,硅珠法提取时间快,所提取的DNA含量高;经典酚抽提法操作过程简单,但用有机溶剂提取,污染比较严重;高盐法提取要用大量的血凝块,且提取的DNA含量很不稳定.因此,硅珠法是提取人血凝块DNA的一种比较好的方法.; 张敏李三相贾海军兰小平杨亚军

RNA干涉及其应用: 2004年; RNA干涉(RNAinterference,RNAi)是生物体内的一种通过双链RNA(dsRNA)来抵抗病毒入侵和抑制转座子活动的自然机制,它是转录后水平基因沉默(PTGS)的一种。RNAi的分子机制可分为三个阶段siRNA形成阶段、扩增阶段和效应阶段。RNAi作为基因沉默的有效工具,已被广泛应用于功能基因组学研究、基因治疗和新药的研究与开发等方面。; 兰小平贾贞杨亚军张海林; 关键词：RNA干涉双链RNA DSRNA 病毒入侵功能基因组学药物开发

藏獒血液蛋白多态性研究被引量：3: 2009年; [目的]了解藏獒血液蛋白基因座的遗传变异状况,为藏獒品种资源保护及合理开发利用提供理论依据。[方法]采用不连续垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对河曲藏獒、青海藏獒、青海藏狮犬和青海土种犬共4个群体103只犬的7个血液蛋白基因座(Tf、Po、Sα2、Hb、Alb、Pr、Amy)的多态性进行研究,并分析不同群体的群体内遗传变异。[结果]4个犬群中,Tf、Po和Sα23个基因座上存在多态性,其中Tf和Po分别由3个等位基因控制,Sα2由2个等位基因控制,Hb、Alb、Pr和Amy基因座均呈现单态;藏獒群体的有效等位基因数(Ne)和Nei氏平均预期基因杂合度(H)分别为1.5324和0.2303,均高于其他犬群。[结论]藏獒群体内在血液蛋白位点上存在丰富的遗传变异。; 兰小平郭宪陈永昌鄢珣崔泰保; 关键词：藏獒血液蛋白多态性有效等位基因数

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兰小平