任向荣
- 作品数:18 被引量:46H指数:5
- 供职机构:解放军第458医院更多>>
- 发文基金:广州市科技攻关项目广州市科技局重点攻关项目广州市科委科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 溶酶体吞噬现象的细胞生物学研究
- 朴英杰罗深秋雷国华刘连璞鲍永耀胡雯任向荣
- 本研究发现溶酶体吞噬体吞噬包裹的三种方式:证实异溶酶体通过自噬调节溶酶体的数量;提出溶酶体吞噬周期的新见解;阐明溶酶体pH的周期变化、膜电位的变化与内吞的关系。充实了溶酶体吞噬理论。
- 关键词:
- 关键词:细胞生物学
- 人源性抗HBsAg噬菌体抗体的筛选及纯化
- 1998年
- 目的:获得人源性抗HBsAg抗体Fab片段。方法:用预包被HBsAg的ELISA板,从构建的人全套抗体库中筛选出针对HBsAg的噬菌体抗体。并转入大肠杆菌中表达。破裂细胞后,获得可溶性Fab片段。以羊抗人Fab抗体偶联HiTrap柱。
- 余宙耀粟宽源任向荣高辉高磊张宜俊曾平鲁龙玉琴郑业华陈文吟陈南春陈苏民
- 关键词:HBSAG
- shRNA表达质粒对转基因小鼠HBV的抑制
- 将质粒DNA采用Hydrodynamic技术注入HBV转基因小鼠体内,观察血清ALT、AST的变化以及对HBsAg及HBcAg和HBV mRNA的干扰情况。结果:(1)注射后,ALT、AST呈一过性升高,3天后降至正常,...
- 孔祥平尤玉琴任向荣
- 关键词:HBV转基因免疫组化病毒复制
- 文献传递
- 人源性抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌中的表达及活性测定被引量:5
- 2002年
- 目的 :制备有活性的人源性抗HBsAg单链抗体。方法 :应用噬菌体表面呈现技术获得人抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体的Fab片段 ,并将VH 和VL 基因以 (Gly4Ser) 3linker连接成单链 ,插入表达载体pQE40 ,筛选大肠杆菌高表达菌株。结果 :工程菌表达优化试验表明 ,在OD6 0 0 为 0 6时开始诱导 ,持续 6h ,目的蛋白表达量最高可达菌体总蛋白的 31%。包涵体变性后上样镍离子螯合层析柱一步纯化 ,收集目的峰 ,透析复性 ,得纯度为 97%的重组单链抗体 ,其亲和常数为 0 2 3× 10 8mol L。结论 :抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌内获得高效表达 ,经变性和复性 ,得到有活性的单链抗体 ,氨基酸组成正确。为进行临床前研究打下基础。
- 任向荣熊盛唐永红粟宽源陈文吟郑业华余宙耀
- 关键词:大肠杆菌噬菌体表面呈现乙型肝炎表面抗原复性
- 高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙型肝炎病毒药物的效应研究
- 目的:研究高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙肝病毒药物的效应评价。方法:选用抗乙肝药物拉咪呋啶、大剂量重组乙肝蛋白疫苗,α-1b型干扰素和RNA干扰在转基因小鼠进行药效及作用机制评价。结果:咪呋啶、重组乙肝疫苗、α-1b型...
- 刘光泽孔祥平任向荣李秀梅胡莲美黄黎珍顾为望
- 关键词:HBV转基因小鼠模型RNA干扰抗乙肝病毒药物药效评价
- 文献传递
- 抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌中的表达及活性测定
- 2001年
- 任向荣熊盛唐永红粟宽源陈文吟郑业华余宙耀
- 关键词:人源性包涵体总蛋白目的蛋白金属镍
- 重组人抗HBs-Fab抗体的纯化及结构分析被引量:4
- 2006年
- 目的研究重组人抗HBs-Fab抗体的纯化工艺,并对其结构等特性进行分析。方法采用离子交换-分子筛层析法分离纯化由酵母工程菌(GS115/Fab)发酵的重组人抗HBsAg Fab抗体,并经ELISA检测其抗体活性,等电聚焦电泳法检测其等电点(pI),基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测其相对分子质量和肽质量图谱。结果纯化的重组Fab抗体的纯度可达90%以上,经Sephacryl-100进一步层析后,纯度达99%以上,总收率可达80%以上。Fab抗体具有较好的抗体活性,其pI值为7·6,为一碱性蛋白,相对分子质量为50494,比其理论值约多2579·35,经Endoglycosidase H内切酶消化后的相对分子质量为49609,证明Fab的一级结构中有糖基化现象,且分布于Fab抗体的H链和L链上。胰酶酶解肽段中有21个与理论肽段相符,另检测到1对二硫键正确。结论已建立了重组人抗HBs-Fab抗体的稳定的纯化工艺,且Fab抗体的一级结构正确。
- 饶桂荣陈文吟粟宽源任向荣郑业华余宙耀
- 关键词:FAB片段纯化
- 工程化人源性抗-HBs Fab抗体的制备、纯化和鉴定被引量:12
- 1999年
- 用获得的表达人源性抗HBsFab片段的大肠杆菌,发酵表达该抗体的可溶Fab片段。以羊抗人Fab抗体偶联HiTrap柱,用Actisepelutionmedium作为洗脱液,在FPLC上纯化。用SDSPAGE及蛋白印迹法分析、鉴定,用固相放兔法检测其活性单位。蛋白印迹及ELISA显示转化菌株有抗HBsFab片段的表达。经FPLC纯化的抗体Fab片段呈单一峰,与抗HBs阳性血清相似。纯化后的抗体Fab片段达到电泳纯,具有较高的活性。
- 余宙耀粟宽源任向荣曾平鲁张宜俊高辉高磊
- 关键词:HBSAG噬菌体抗体
- 高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙型肝炎病毒药物药效学评价的研究
- 目的研究高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙肝病毒药物药效学评价作用。方法采用公认有效的抗乙肝病毒复制药物拉米夫定为阳性对照,以检验HBV转基因小鼠模型对抗乙肝药物药效学评价的可靠性;然后用HBV转基因小鼠对大剂量重组乙肝蛋...
- 刘光泽易学瑞杨富强任向荣陈光明孔祥平
- 文献传递
- 高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙型肝炎病毒药物的效应研究被引量:8
- 2007年
- 目的:研究高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙肝病毒药物的效应评价。方法:选用抗乙肝药物拉咪呋啶、大剂量重组乙肝蛋白疫苗、α-1b型干扰素和RNA干扰在转基因小鼠进行药效及作用机制评价。结果:拉咪呋啶、重组乙肝疫苗、α-1b型干扰素均可使HBV转基因小鼠血清中HBV DNA滴度显著降低。其中后两者还可提高机体脾细胞IL-2和IFN-γ的水平及使分泌IFN-γ脾细胞Elispot斑点数明显增加。将RNA干扰表达载体pU6-siHBV质粒尾静脉注入小鼠体内。注射后5d血清HBsAg下降56.7%,抑制作用持续14d。肝脏免疫组化显示HBcAg阳性细胞明显减少,但血清HBV DNA定量无明显降低。结论:本近交系高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙肝药物药效学评估是可靠、可行的。
- 刘光泽孔祥平任向荣李秀梅胡莲美黄黎珍顾为望
- 关键词:HBV转基因小鼠乙型干扰素Α