丁伟峰 作品数:56 被引量:42 H指数:4 供职机构: 南通大学附属医院 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 江苏省医学重点建设学科资助项目 江苏省医学重点学科建设资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
APRIL调节基质金属蛋白酶的表达对结直肠癌细胞转移侵袭能力的影响 被引量:1 2012年 目的研究增殖诱导配体(aproliferation.inducingligand,APRIL)对结直肠癌(colorec—talcancer,CRC)细胞转移侵袭能力和基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)表达的影响,以进一步明确APRIL在CRC转移中的作用。方法APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNA—APRIL)转染人CRC细胞SW480,APRIL重组蛋白(rhAPRIL)刺激CRC细胞HCT-116,Transwell小室转移及侵袭试验分析APRIL对CRC细胞转移及侵袭能力的影响;RT-PCR、ELISA检测MMPs的表达变化。结果siRNA.APRIL转染的SW480细胞Transwell小室试验转移及侵袭细胞数显著减少(P〈0.05),rhAPRIL刺激的HCT-116细胞TransweH小室试验转移及侵袭细胞数显著增多(P〈0.05);MMP-2、MMP-9及TIMP-1mRNA,分泌型的MMP-2、MMP-9蛋白表达在转染或刺激前后差别均有统计学意义(P〈O.05);MMP的抑制剂GM6001处理后,SW480对照组和rhAPRIL刺激后的HCT-116细胞Transwell小室侵袭细胞数显著减少(P〈O.05)。结论APRIL通过调节MMPs的表达促进结直肠癌的侵袭和转移,可为结直肠癌转移的干预及治疗提供新的靶点。 汪桂华 王峰 丁伟峰 王旭东 徐锦 李海泉 王惠民关键词:增殖诱导配体 结直肠癌 基质金属蛋白酶 一种基因检测试剂评估管理系统 本发明公开了一种基因检测试剂评估管理系统,涉及基因检测技术领域,该系统包括以下组成部分:试剂数据整合模块,整合多个来源的基因检测试剂数据,包括试剂性能、适用范围、价格的信息,构建统一的数据共享平台,通过数据整合,系统能够... 费成平 丁伟峰痰中增殖诱导配体mRNA定量测定对非小细胞肺癌的诊断价值 2009年 目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ—PCR)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者痰中增殖诱导配体(APRIL)mRNA含量的方法,探讨痰脱落细胞APRIL mRNA表达在NSCLC诊断中的意义。方法对2007年8月至2008年5月南通大学附属医院71例NSCLC患者和62例肺部良性病变患者痰中APRIL mRNA进行检测,同时取65名健康成人痰做对照。用RFQ—PCR技术实时检测PCR产物的荧光强度,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA的准确含量,以靶基因和内参β2-微球蛋白(β2-M)mRNA含量的比值作为评价其表达水平的指标,并与细胞学检查结果进行比较。计量资料采用t检验,所得结果用x^-±s表示;对计数资料采用Х^2检验。结果RFQ—PCR法检测APRIL mRNA含量的线性范围为38~3.8×10^6copies/μl,批内和批间变异系数(CV)分别为8.5%和13.6%。NSCLC组痰中APRIL mRNA表达水平显著高于肺部良性病变组和健康对照组(t值为10.50和11.32,P〈0.01);良性病变组与健康组比较差异无统计学意义(t=0.379,P〉0.05)。以健康组APRIL mRNA的x^-±2s为cut-off值,肺癌组APRIL mRNA表达的阳性率为81.7%(58/71),明显高于肺部良性病变组的3.2%(2/62)和健康对照组的1.5%(1/65)。NSCLC组痰中APRIL mRNA的表达与性别、年龄、吸烟史、TNM分期及淋巴结转移无关(t值分别为1.700、1.014、1.484、1.298及1.186。均P〉0.05),与病理分型和肿瘤部位有关(t值为1.650和1.873,均P〈0.05)。RFQ.PCR阳性率为82%(58/71),高于细胞形态学阳性率的14%(10/71),差异有统计学意义(Х^2=67.68,P〈0.01)。结论RFQ—PCR检测痰中APRIL mRNA含量具有较高的敏感度和特异度,有助于NSCLC的临床诊断。 孙宝兰 朱俐 丁伟峰 景蓉蓉 褚少朋 王惠民关键词:配体 聚合酶链反应 手术麻醉中静脉持续应用利多卡因对老年结直肠肿瘤手术患者术后肠道功能恢复及谵妄发生的影响 2023年 目的:探讨静脉持续应用利多卡因对结直肠肿瘤手术老年患者术后肠道功能恢复及谵妄(POD)发生的影响。方法:选取我院2020年05月至2021年06月行结直肠肿瘤手术的老年患者60例,随机分为2组,利多卡因组(L组,n=30)和生理盐水组(C组,n=30)。L组在麻醉诱导前10 min给予1%利多卡因1.5 mg/kg(0.15 mL/kg)静脉缓慢推注,用药持续约10 min,使用微量泵继续输注1%利多卡因0.15 mL/(kg·h)的速度持续静脉泵注至缝皮结束。C组在诱导前和麻醉维持时使用等容量生理盐水静脉用药。用药结束后开始麻醉,术后接静脉镇痛泵进行术后镇痛。记录患者第一次排便时间,通过疼痛数字评分法(NRS)对术后第一天和第二天进行疼痛评分。用简易精神状态评价量表(MMSE)法评估术前1天、术后1天和术后3天POD。结果:两组术前一般情况无明显差异,无局麻药中毒发生;术后L组第一次排便时间明显早于C组(P<0.05)。术后第1天,C组患者静脉自控镇痛(PCIA)泵按压次数(7.5±2.8)次显著高于L组(2.8±1.1)次(P<0.05)。与C组比较,术后第1天和第3天L组MMSE评分显著高于C组(P<0.05);与术前1天MMSE评分比较,术后第1天和第3天C组MMSE显著下降(P<0.05),L组术前1天的MMSE评分和术后第1天、术后第3天比较,无明显差异(P>0.05)。术后第1天和第3天C组POD发生率显著高于L组(P<0.05)。结论:静脉持续应用利多卡因可以降低结直肠肿瘤手术老年患者术后谵妄的发生率,促进肠道功能的恢复。 陈红生 沈莹 丁伟峰关键词:结直肠肿瘤 利多卡因 术后谵妄 增殖诱导配体shRNA对结直肠癌细胞增殖与转移的影响 被引量:2 2008年 目的探讨增殖诱导配体(APRIL)shRNA对结直肠癌细胞的增殖与转移的影响。方法用RNA干扰技术敲低结直肠癌细胞株SW480中APRIL基因的表达,以免疫印迹技术、细胞黏附、损伤修复及侵袭力检测等体外实验对比APRIL基因敲低前后细胞株SW480的增殖、黏附、侵袭及转移能力的变化。结果转染组细胞APRIL蛋白表达的灰度值为0,显著低于阴性对照组的1.04-0.3和未转染组的1.1±0.4,差异有统计学意义(F=42.15,P=0.00);转染组、阴性对照组及未转染组最大增殖细胞数分别为(6.1±4.7)×10^4个、(36.4±14.4)×10^4个和(41.3±19.2)×10^4个,转染组细胞增殖能力明显受到抑制(F=24.76,P〈0.05);转染组细胞黏附的平均吸光度(A)值为0.343,低于阴性对照组的0.409及未转染组的0.412,细胞黏附率相对于未转染组降低39%;转染组、阴性对照组及未转染组迁移至损伤区细胞数分别为(47.89±13.16)个、(98.78±23.26)个和(108.01±39.11)个,与阴性对照组、未转染组比较,细胞迁移能力的差异有统计学意义(F=65.53,P〈0.01);细胞侵袭力(A值0.58±0.10)相对于阴性对照组(A值0.94±0.23)与未转染组(A值1.11±0.21)差异亦有统计学意义(F=5.771,P〈0.05)。结论APRIL有促细胞增殖作用,很可能参与结直肠癌细胞的侵袭和转移,并具增强结直肠癌侵袭和转移潜能。 丁伟峰 鞠少卿 朱俐 王惠民关键词:结直肠肿瘤 膜蛋白质类 肿瘤坏死因子类 细胞增殖 上调CDX2基因表达对人胃癌SGC-7901细胞miRNA表达谱及生物学功能的影响 被引量:2 2013年 目的:筛选上调尾型同源盒基因2(caudal type homeobox gene 2,CDX2)基因表达时人的胃癌细胞SGC-7901中差异表达的miRNA并预测其靶基因,并观察其对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:提取瞬时转染48 h后空载体组(转染P E G F P-N1组)和转染组(转染P E G F P-N1-C D X2组)细胞的总R N A,应用m i R N A芯片检测差异表达的miRNA,并通过Miranda、TargetScan、Mirtarget2软件预测其靶基因,通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析了解靶基因功能.CCK8法检测细胞增殖能力,划痕试验、Transwell小室、细胞黏附实验检测各组细胞体外迁移黏附能力.结果:PEGFP-N1-CDX2组较空载体组有59种差异表达的miRNA,其中25种miRNA发生2倍以上表达上调,34种miRNA发生2倍以上表达下调.通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析得到部分miRNA靶基因功能,这些靶基因参与了肿瘤的发生、发展、转移及预后.与对照组相比,PEGFP-N1-CDX2组的胃癌细胞生长、迁移和黏附能力均明显受到抑制(P<0.05).结论:上调CDX2基因表达可明显抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长,抑制其迁移黏附能力,CDX2基因的抗肿瘤作用可能与miRNA有关. 张健锋 董丽娟 蒋伟 张弘 丁伟峰 周国雄 毛振彪关键词:细胞运动 凋亡蛋白抑制因子livin基因siRNA表达载体的构建与转染 被引量:1 2007年 目的:构建3个针对凋亡蛋白抑制因子livin基因mRNA的小干扰RNA(siRNA)表达载体,然后转染HCT-8/V细胞。为研究livin基因沉默对HCT-8/V细胞耐长春新碱特性的影响奠定基础。方法:合成3对靶基因livin的siRNA寡核苷酸序列通过退火生成转录模板,与线性pGCsi-H1/Neo/GFP质粒连接,转化DH5α钙化菌抽提重组质粒,测序鉴定。用脂质体2000将重组质粒转染HCT-8/V细胞并用G418筛选。结果:转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,测序结果与所设计、合成的livin的siRNA转录模板序列一致;在荧光显微镜下观察到HCT-8/V细胞表达绿色荧光蛋白(GFP)证实重组质粒已转染入细胞并用G418剔除了未转染质粒的细胞。结论:成功构建livin基因的siRNA表达载体,转染并筛选出转染了livin siRNA表达载体的HCT-8/V细胞。 王旭东 丁伟峰 鞠少卿 王惠民关键词:小干扰核糖核酸 质粒 凋亡蛋白抑制因子 转染 转录因子CEBPB结合CPEB1基因启动子区调节CPEB1基因表达的方法 本发明提供一种转录因子CEBPB和TFCP2竞争结合CPEB1基因启动子区调节CPEB1基因表达的方法,包括如下步骤:S1、通过实验验证转录因子CEBPB可结合CPEB1基因启动子区,而当CPEB1基因启动子区高甲基化状... 丁伟峰 濮伟霖 邵可可 张健锋 鞠少卿 马彦云一种泛癌抑制非编码RNA及其泛癌抑制属性的检测方法 本发明提供一种泛癌抑制非编码RNA,为PAn‑cancer Non‑Coding RNA 246,命名为PANC246。还提供一种泛癌抑制非编码RNA的泛癌抑制属性的检测方法,包括如下步骤:2.1、构建质粒与肿瘤细胞系培... 丁伟峰 郭士成裸鼠移植瘤实验研究APRIL在人结直肠癌中的作用 目的利用RNA干扰技术增殖诱导配体(APRIL)对BALB/c裸鼠体内人结直肠癌作用的研究。方法pGCsi-vetor和pGC-shAPRIL(含APRIL sh637干扰片段质粒)G418稳定转染SW480细胞。实验动... 王敬春 王惠民 丁伟峰 孙宝兰 景蓉蓉文献传递