齐海涛
- 作品数:11 被引量:22H指数:3
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 1株H3N2亚型猪流感病毒的分离鉴定
- 2012年
- 为了解广东猪流感病毒(SIV)的流行变异情况,2010年11月从广东某规模猪场采集流感症状的猪鼻拭子60份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到1株猪流感病毒,通过流感分型RT-PCR和HI试验鉴定为H3N2亚型SIV,命名为A/swine/Guangdong/L22/2010(H3N2),进行全基因序列测定及相似性分析发现,该分离株有低致病性流感分子特征,该毒株的8个基因片段连同最近广东猪群流行的流感毒株与2000年前后H3N2人流感病毒有较高的同源性。系统遗传演化显示,该病毒分离株可能是由1999年人源H3N2流感病毒A/Moscow/10/99(H3N2)进化而来。
- 齐海涛闫军霞粟硕黄震曹楠谭力凯孔维立张桂红
- 关键词:H3N2猪流感病毒
- 嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对致病性大肠杆菌粘附鸡肠纹状缘膜的影响被引量:4
- 2012年
- 为研究嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对致病性大肠杆菌(E.coli)粘附鸡肠纹状缘膜的影响,本实验以雏鸡小肠纹状缘膜为模型,以嗜酸乳杆菌和鸡致病性E.coli O78为研究对象,提取嗜酸乳杆菌表层蛋白、肽聚糖及E.coli O78菌毛,雏鸡小肠纹状缘膜,采用固相粘附试验和生物素标记法从分子间相互作用的关系评价了嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对菌毛粘附的抑制作用,结果表明:表层蛋白和肽聚糖对菌毛粘附具有明显的抑制作用,呈浓度依赖性抑制菌毛与纹状缘膜的结合,具有竞争性拮抗作用,这主要是由空间占位造成的。肽聚糖的抑制作用相对较小。
- 粟硕王艳菁齐海涛王利黄震陈济铛张桂红
- 关键词:嗜酸乳杆菌肽聚糖菌毛
- 多种亚型猪流感病毒混合感染的纯化和鉴定被引量:2
- 2013年
- 为了研究多种亚型猪流感病毒混合感染后病毒的纯化,试验采用鸡胚终点稀释法结合特异血清中和法对可能混合多种亚型猪流感病毒的样品进行纯化,并对纯化结果进行HI和RT-PCR试验进行验证。结果表明:此种方法纯化病毒是可行的,不同代次不含外源病毒。
- 曹楠齐海涛孔维立王衡谭力凯张桂红
- 关键词:猪流感病毒纯化
- 1株H3N2亚型猪流感病毒的分离鉴定
- 2013年
- 为了解广东猪流感病毒(SIV)的流行变异情况,2010年11月从广东某规模猪场采集流感症状的猪鼻拭子60份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到1株猪流感病毒,通过流感分型RT—PCR和HI试验鉴定为H3N2亚型SIV,命名为A/swine/6uangdong/L22/2010(H3N2),进行全基因序列测定及相似性分析发现,该分离株有低致病性流感分子特征,该毒株的8个基因片段连同最近广东猪群流行的流感毒株与2000年前后H3N2人流感病毒有较高的同源性。
- 齐海涛闫军霞粟硕
- 关键词:H3N2亚型猪流感病毒基因序列测定SPF鸡胚规模猪场
- 猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型RT-PCR方法的建立
- 引言/目的猪流感病毒是A型流感病毒属成员,属于正黏病毒科,分阶段的负链RNA病毒。A型流感病毒的亚型鉴定是根据血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)基因的抗原差异性来区...
- 齐海涛孔维立曹楠粟硕谭力凯黄震张桂红
- 猪源戊型肝炎病毒ORF2部分基因的原核表达及其鉴定被引量:2
- 2012年
- 本试验旨在表达猪源戊型肝炎病毒(sHEV)ORF2部分基因片段,纯化表达产物并进行抗原性分析。以sHEV的cDNA为模板,PCR扩增ORF2基因片段,构建重组质粒pET32a-dORF2,转化表达菌BL21,IPTG诱导,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting进行检测。试验结果表明,获得60ku的目的蛋白,该蛋白具有良好的抗原性,主要以可溶性形式存在。
- 欧阳昀张亮权刘志刚齐海涛徐廷川张民泽张超逸张桂红
- 关键词:戊型肝炎病毒ORF2基因重组质粒原核表达
- 猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型RT-PCR方法的建立被引量:7
- 2012年
- 根据GenBank中H1N1和H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(neuraminidase,NA)和M基因保守序列,分别设计合成了5对特异性引物,利用RT-PCR技术对SIV的型和亚型进行鉴定。结果表明,该方法的型RT-PCR可以检测出104 EID50病毒量所提取的RNA;H1、H3、N1和N2的亚型RT-PCR均可以检测出104 EID50病毒量所提取的RNA。除每对特异性引物所对应的亚型外,对其他亚型及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CS-FV)的检测均为阴性,应用该方法对临床样品进行检测,其结果与病毒分离结果符合率为100%。结果表明,该方法特异性好、敏感性高,有望成为SIV的一种特异、敏感、快速的分型检测方法,为猪流感分子流行病学的调查奠定了良好的基础。
- 齐海涛孔维立张桂红
- 关键词:猪流感病毒H3亚型RT-PCR方法
- 猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型RT-PCR方法的建立
- 目的:是建立一种特异、敏感、快速的鉴定分型检测方法,为猪流感分子流行病学的调查奠定良好的基础。方法:对猪流感病毒A/swine/GD/170/06 (H1NT), A/swine/GD/164/06 (H3N2)和A/s...
- 齐海涛孔维立曹楠粟硕谭力凯黄震张桂红
- 关键词:猪流感病毒RT-PCR法
- H3亚型猪流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:6
- 2012年
- 为建立一种快捷、可行的检测H3亚型猪流感病毒(SIV)的方法,本研究根据GenBank中登录的H3亚型SIV HA基因的保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了一种检测H3亚型SIV的SYBR GreenⅠ荧光定量检测方法,并进行灵敏度、稳定性和特异性试验,与普通PCR进行比较。研究结果表明,标准曲线的循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系,R2为0.994,CV在0.17%~1.41%之间,具有良好稳定性。除H3亚型SIV外,对H1、H4、H6、H9亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒和猪圆环病毒2型的检测均为阴性,与普通PCR相比更灵敏。该方法特异性好,准确率高,适于临床分离鉴别H3亚型SIV。
- 郭泗虎王文华张亮权齐海涛曹楠闫明菲黄昌力张超轶张桂红
- 关键词:猪流感H3亚型
- H1N2亚型猪流感病毒NS1的原核表达及抗原性分析
- 2011年
- 为了进一步监控猪流感病毒对猪群的感染情况,研究对H1N2亚型猪流感病毒NS1基因进行RT-PCR扩增,并将其克隆到表达载体pET-30a(+)上构建重组质粒pET-NS1获得纯化产物,结果表明:NS1蛋白能够高效表达,与预期分子质量大小相符;经Western-blot分析,NS1蛋白能很好地与猪流感活病毒产生血清反应,而不能与灭活疫苗产生血清反应;被检血清稀释度为1∶640时,ELISA检测阳性血清的OD490值约为阴性血清的3倍,差异明显。说明NS1蛋白具有良好的血清学反应特异性。
- 孔维立齐海涛曹楠亓文宝焦培荣张桂红
- 关键词:猪流感病毒NS1抗原性分析