黄朝阳
- 作品数：23 被引量：94H指数：6
- 供职机构：厦门大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 闽南地区α和β地中海贫血的遗传异质性研究被引量：11
- 2014年
- 目的了解闽南地区α和β地中海贫血（地贫）的基因突变类型和频率，为地贫的基因诊断和遗传咨询提供参考。方法用聚合酶链反应（PCR）、反向斑点杂交（RDB）及测序技术对1065例疑诊为地贫患者进行地贫基因分析。结果地贫患者检出率为56．06％（597／1065）。α地贫340例，其中216例为东南亚缺失型杂合子（αα／-SEA）、42例α3.7缺失型杂合子（αα／-α3.7）、5例α3.7缺失型杂合子（αα／-α4.2）、αα／αCSα、αα／αQSα、αα／αwSα突变杂合子各2例、血红蛋白H病71例（-α／-SEA59例，-α4.2／--SEA2例，αCSα／-SEA10例）；β地贫255例（IVS-Ⅱ-654杂合子108例，CD41-42杂合子101例，纯合子1例，CD17杂合子30例，-28M杂合子10例，CD71-72（＋A）杂合子2例，IntM3例）；α与β复合地贫2例．包括1例αα／-α3.7联合CD41-42M突变杂合子和1例αα／αWSα联合IVS-Ⅱ-654突变杂合子。结论初步阐明闽南地区α与β地贫的基因突变类型和频率，有必要在闽南地区开展地贫基因检测和产前诊断。
- 胡斌孙鸣黄朝阳沈关心
- 关键词：地中海贫血基因检测产前诊断
- 不同结核病患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞表达的变化被引量：6
- 2010年
- 目的分析不同结核病患者体内CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Tr）表达的变化，探讨其在结核病免疫中的作用。方法对33例结核病患者以及同期30例健康体检者运用流式细胞术检测其外周血CD4^＋CD25“。“和CIM^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr表达情况。结果结核组CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr检测结果分别为（8．84±2．55）％、（6．30±1．38）％，高于对照组（7．09±1．09）％、（5．22±0．64）％，差别有统计学意义（t=3．57，4．01，P〈0．01）；痰涂阳患者CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr检测结果分别为（10．52±3．27）％、（7．18±1．77）％，高于痰涂阴患者（8．21±1．94）％、（5．97±1．06）％，两组问差别均具有统计学意义（t=2．51，2．42，P〈0．05）；初治患者和复治患者间CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋检测结果无统计学意义（t=0．03，0．02，P〉0．05）。结论结核病患者体内CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr检测结果高于健康人群，提示患者体内存在免疫系统抑制状态。
- 马晓波黄家禹洪强宋秀宇黄朝阳郑燕青
- 关键词：结核病CD4^+CD25^HIGH调节性T细胞
- 变异链球菌ldh基因启动子的克隆及活性检测被引量：1
- 2016年
- 目的克隆变异链球菌ldh基因启动子,并验证其活性。方法以变异链球菌UA159基因组为模版,PCR扩增变异链球菌ldh基因候选启动子,将其插入β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase,gusA)报告基因表达载体pIB107 BamH I/XhoI之间,构建ldh基因启动子gusA报告载体pCKS11,PCR、酶切及测序鉴定;经ScaI酶线性化后转化变异链球菌UA159,卡那霉素筛选阳性克隆SCKS11,经PCR和测序鉴定后,检测其GusA活性。结果成功扩增出大小为269bp的ldh基因候选启动子;经PCR、酶切及测序鉴定,变异链球菌ldh基因候选启动子gusA报告基因表达载体pCKS11构建正确;PCR和测序鉴定,ldh基因候选启动子gusA报告株SCKS11构建成功;变异链球菌ldh基因候选启动子启动的GusA活性是无启动子的阴性对照的5.8倍,是阳性对照变异链球菌clpP基因启动子的0.9倍。结论成功克隆变异链球菌ldh基因启动子序列,具有较强的启动转录活性,为研究ldh基因的表达调控机制奠定基础。
- 张加勤黄珊珊徐巧丽饶慧华马晓波黄朝阳房丽丽郑港森宋秀宇
- 关键词：变异链球菌启动子
- 降钙素原及CRP在外科感染早期诊断中的应用被引量：23
- 2010年
- 目的探讨降钙素原及CRP在外科感染性疾病早期诊断中的应用。方法分析2007年至2008年厦门大学附属第一医院外科收治的患者60例,按感染程度分为无感染对照组(22例)、重症感染组(13例),局部感染组(25例)。检测入院时血清降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP),用SPSS13.0进行数据分析。结果在全身感染时,血清PCT和CRP浓度升高均有显著性(P<0.05),但PCT显著性更高。PCT≥2μg/L作为全身感染的诊断依据,其敏感度和特异度均优于CRP。结论与CRP相比,PCT是一个较好的外科感染的诊断指标,能有效地发现早期重症感染,以指导临床早期用药。
- 侯喜琴戴淑惠黄朝阳黄宇
- 关键词：降钙素原C反应蛋白外科感染
- 双纸片抑制增效试验在AmpC酶检测中应用分析
- 2014年
- 目的探讨分析双纸片抑制增效试验在肺炎克雷伯菌产AmpC酶的检测应用,评价该方法在临床实验室的应用价值。方法采用头孢西丁纸片法,头孢西丁三维试验,双纸片抑制增效试验,以及耐药基因多重PCR技术对临床分离菌株进行检测。结果 137株临床分离肺炎克雷伯菌中,对头孢西丁不敏感的菌株共有22株,头孢西丁三维试验阳性有11株;双纸片抑制增效试验FOX/FOX+PBA双纸片组中阳性有18株,CTT/CTT+PBA双纸片组中阳性有11株;多重PCR技术检测阳性有19株。头孢西丁三维试验阳性结果与PCR结果符合率为47.4%(9/19),双纸片抑制增效试验中,CTT/CTT+PBA双纸片组阳性结果与PCR结果符合率为57.9%(11/19);FOX/FOX+PBA双纸片组阳性结果与PCR结果符合率为94.7%(18/19)。结论双纸片抑制增效试验,其方法简便,结果准确性高,其中FOX/FOX+PBA双纸片组可应用于临床分离肺炎克雷伯菌产AmpC酶的检测。
- 郑港森张加勤黄朝阳马晓波
- 关键词：肺炎克雷伯菌头孢菌素酶头孢西丁
- 临床分离金黄色葡萄球菌的调查与耐药性分析被引量：3
- 2015年
- 目的了解医院临床分离金黄色葡萄球菌的分布及耐药性,为临床治疗相关感染提供参考依据。方法收集2013年1-12月医院临床送检各类培养标本中分离金黄色葡萄球菌共676株,采用法国生物梅里埃公司VITEK-2Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统对菌株进行细菌鉴定和药物敏感性检测,并用Excel软件进行数据分析。结果 2013年各种临床标本分离金黄色葡萄球菌共676株,标本分布主要以痰液为主占61.69%,其次是分泌物和脓液,分别占17.44%和8.73%;临床科室分布依次是儿科、耳鼻喉头颈外科和新生儿室,分别占19.53%、11.54%和8.28%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为24.41%,诱导克林霉素耐药菌株检出率为18.64%;金黄色葡萄球菌对万古霉素、替加环素、喹奴普汀/达福普汀、利奈唑胺的耐药率最低,均为0,对红霉素、克林霉素和四环素耐药率较高,MRSA对红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星等耐药率均比甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)高,且两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论临床分离金黄色葡萄球菌对红霉素、克林霉素和四环素的耐药性已比较高,应注意在临床的合理使用;MRSA表现出耐药性高、多药耐药的特性,应加强监测控制,防止其流行传播。
- 郑港森黄朝阳张加勤黄宇马晓波
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性
- 抑制剂Rottlerin对巨噬细胞在结核分枝杆菌刺激下NO和TNF分泌的影响
- 2014年
- 目的研究蛋白激酶C-δ在巨噬细胞识别结核分枝杆菌后产生免疫应答过程中的作用,探讨固有免疫抗结核的分子机制。方法用蛋白酶抑制剂预处理体外培养的小鼠巨噬细胞,通过Western Blot分析相关蛋白的表达及磷酸化水平,利用Griess法和ELISA方法检测巨噬细胞在结核分枝杆菌索状因子合成类似物TDB的刺激下释放一氧化氮(NO)和分泌肿瘤坏死因子(TNF)的水平。结果 Syk抑制剂Piceatannol能抑制TDB诱导的PKC-δ磷酸化;经过蛋白激酶C-δ抑制剂Rottlerin的处理,巨噬细胞受TDB诱导释放的NO浓度由对照组的30μM降至5μM,分泌的TNF浓度为对照组的10%。结论蛋白激酶C-δ抑制剂Rottlerin抑制TDB诱导的巨噬细胞释放NO和分泌TNF,提示PKC-δ在抗结核固有免疫中发挥重要的作用。
- 李珣黄朝阳赵元勋
- 关键词：巨噬细胞结核分枝杆菌
- TPPA、TRUST和电化学发光法检测梅毒螺旋体效果比较被引量：1
- 2010年
- 目的回顾性分析TPPA、TRUST和电化学发光法测定三种血清学检测方法，对不同梅毒患者的血清进行测定，并分析各检测方法的优缺点，为临床选择最佳的梅毒检测方法提供参考。方法2009年1月至2010年1月我院皮肤科确诊梅毒患者136例，以及同期我院正常健康体检者50例。结果一、二、三期梅毒患者TPPA法检测阳性率分别为94％、100％、100％；TRUST法阳性率分别为78％、92％、83％；电化学发光法阳性率均为100％。结论三种检测方法中电化学法检测阳性率略高。
- 侯喜琴黄朝阳戴淑惠黄宇郑燕青任小英宋秀宇
- 关键词：TPPATRUST电化学发光法梅毒
- 铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株的构建被引量：1
- 2015年
- 目的构建铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株。方法分别以质粒pUCGM和铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板PCR扩增庆大霉素抗性基因(GM)和铜绿假单胞菌clpP基因及其3′、5′侧翼序列,将clpP基因及其3′、5′侧翼序列克隆至pMD19T载体,EcoRV切除clpP基因37bp^453bp片段后,引入庆大霉素抗性基因,构建重组质粒pCKR2;EcoRⅠ/HindⅢ双酶切重组质粒pCKR2,回收FclpP-GM-clpPR片段,与自杀质粒pEX18Tc连接,得到clpP基因缺陷的同源重组载体pCKR3;将pCKR3质粒转化大肠埃希菌SM10,与铜绿假单胞菌PAO1双亲杂交,庆大霉素筛选得到铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株。结果经酶切鉴定同源重组载体pCKR3构建正确;PCR和DNA测序鉴定铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株构建成功。结论本研究成功敲除了铜绿假单胞菌clpP基因,为进一步研究clpP基因的生物学功能奠定了基础。
- 张加勤饶慧华徐巧丽黄朝阳房丽丽马晓波宋秀宇
- 关键词：铜绿假单胞菌同源重组
- clpC 基因对变异链球菌感受态形成的影响
- 2015年
- 目的：构建变异链球菌clpC缺陷突变株，检测该基因对变异链球菌感受态形成的影响。方法分别以变异链球菌UA159基因组和pIB107质粒为模板，PCR扩增clpC基因片段和卡那霉素基因盒（lox71-KMR-lox66）；将clpC基因片段插入pMD-19T simple载体，经ClaⅠ／EcoRⅠ酶切、补平后连入卡那霉素基因盒，构建clpC缺陷突变同源重组载体pCKX2；SalⅠ线性化pCKX2并转化变异链球菌，卡那霉素筛选阳性菌落；质粒pCrePA转化阳性菌株，30℃培养剔除卡那霉素基因盒；37℃培养去除pCrePA，获得clpC缺陷突变株，PCR和测序鉴定；提取细菌总RNA并逆转录成cDNA，用RT-PCR法扩增clpC缺失序列的核苷酸片段并进行产物的电泳分析；pDL276分别转化变异链球菌和clpC缺陷突变株，观察感受态细胞形成变化。结果 PCR和测序结果证实成功构建同源重组载体pCKX2及变异链球菌clpC缺陷突变株；RT-PCR结果显示，△clpC缺失的核苷酸片段PCR产物电泳结果并无相应的条带出现；clpC缺陷突变株的感受态形成期延迟并延长维持期。结论 clpC基因具有负调控变异链球菌晚期感受态细胞形成的作用。
- 徐巧丽饶慧华马晓波黄朝阳郑港森张加勤宋秀宇
- 关键词：变异链球菌感受态细胞
