高华
- 作品数：40 被引量：67H指数：4
- 供职机构：北京市神经外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 微弧氧化和碱处理技术在多孔钽修复兔颅骨缺损中的应用被引量：7
- 2019年
- 目的观察微弧氧化和碱处理对多孔钽表面性状、生物相容性和成骨能力的影响。方法微弧氧化和碱处理多孔钽片后,扫描电镜观察表面微孔数量、表面钙磷沉积和接触角。植入钽片修复兔颅骨缺损模型,在4周和12周观察骨愈合情况。结果扫描电镜显示处理组表面有更多的微孔和钙磷沉积以及更小的接触角(P<0.05)。植入多孔钽片后,所有动物均生长良好,伤口愈合佳。CT观察多孔钽片和周围骨组织耦合良好;钙黄绿素标记检测显示12周时有新生骨长入多空钽材料内部;扫描电镜观察发现4周时多空钽材料内部有新生血管,12周时有骨小梁长入材料内部。结论微弧氧化和碱处理能改变多孔钽材料表面形状,处理后多孔钽片具有良好的生物相容性和成骨能力。
- 李振宗薛亚轲高华
- 关键词：骨修复生物相容性微弧氧化
- MicroRNA在建立DJ-1基因敲减细胞模型中的应用被引量：1
- 2011年
- 目的与传统的siRNA方法建立基因敲减模型不同,探讨合成microRNA（miRNA）在DJ-1基因敲减细胞模型中的应用。方法构建针对DJ-1基因的合成miRNA载体,合成DJ-1基因的siRNA干扰片段。在脂质体介导下,将上述两种小干扰RNA载体或片段分别转染MN9D细胞系,应用real-time PCR和Western blot检测目的基因DJ-1的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,转染合成microRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调90%（P〈0.05）,蛋白水平下调70%~85%（P〈0.05）;而转染siRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调50%~70%（P〈0.05）,蛋白水平下调20%~50%（P〈0.05）。结论 microRNA与siRNA均可作为基因敲减的重要研究手段。与传统的siRNA相比,合成microRNA对目的DJ-1的干扰效率更为显著。
- 赵莎莎鲁玲玲高华吕瓅赵焕英杨慧
- 关键词：DJ-1MICRORNASIRNARNA干扰
- 过表达DJ-1减轻鱼藤酮引起MN9D细胞线粒体损伤和细胞凋亡被引量：2
- 2013年
- 目的观察过表达DJ-1蛋白能否保护MN9D细胞抵抗鱼藤酮所致的线粒体损伤和细胞凋亡。方法在MN9D细胞中分别过表达野生型DJ-1(WT)和L166P突变型DJ-1(L166P),随后给予鱼藤酮处理。MTT法观察细胞活力、JC-1染色观察线粒体膜电位(ΔΨm)以及流式细胞仪AnnexinⅤ+PI染色和TUNEL染色观察凋亡。结果单纯鱼藤酮处理组细胞活力下降48.2%±6.4%,而过表达WT时,加入鱼藤酮后细胞活力仅下降22.0%±3.7%(P<0.05),过表达L166P组跟单纯鱼藤酮组无显著性差异;鱼藤酮引起MN9D细胞ΔΨm下降,过表达WT则可以部分恢复ΔΨm,L166P无此作用;过表达WT-DJ-1组凋亡率分别为5.4%和9.7%,较单纯鱼藤酮处理明显下降(P<0.05),而转染L166P细胞凋亡率跟鱼藤酮组无差异,TUNEL实验证实了同样的结果。结论过表达野生型DJ-1能缓解鱼藤酮对MN9D细胞的损伤,具有线粒体保护功能,减少细胞凋亡的发生,而突变型L166P则无此作用。
- 高华隋雷鸣谷利杨巍巍鲁玲玲赵莎莎杨慧
- 关键词：帕金森病DJ-1鱼藤酮线粒体功能障碍
- 人PINK1抗血清的制备及其免疫活性物质在大鼠脑组织中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的制备帕金森病相关蛋白PINK1抗血清并检测其在大鼠脑组织中的表达特征。方法制备人PINK1基因重组蛋白,免疫新西兰大耳白兔获得抗PINK1抗血清;通过盐析法初步纯化、Western blotting法鉴定抗血清的敏感性和特异性、免疫组化法检测PINK1在大鼠脑中的分布。结果人PINK1基因重组蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达;纯化蛋白制备兔抗血清经盐析纯化后,兔抗人PINK1抗血清特异性识别人PINK1基因重组蛋白及大鼠脑匀浆中40000和66000的蛋白质,与预期结果一致;免疫组化染色显示PINK1广泛分布在嗅球、皮质、海马、纹状体、小脑、黑质和红核。结论制备了一种兔抗人PINK1多克隆抗血清;PINK1广泛分布于大鼠中枢神经系统;为以后深入研究PINK1表达的组织分布、细胞内定位及其生物学功能提供了有效地实验工具。
- 李继胜李尧华李昕于顺王年强高华孙晓红杨慧
- 关键词：PINK1抗血清重组蛋白
- 垂体腺瘤患者Delta样蛋白1同源物、母系表达基因3、母系表达基因8基因表达水平及其临床意义研究
- 2023年
- 目的分析垂体腺瘤患者Delta样蛋白1同源物(DLK1)、母系表达基因(MEG)3、MEG8基因表达水平及其临床意义。方法选取2015年6月至2019年12月于唐山市人民医院行手术切除的垂体腺瘤患者92例为研究对象。收集患者一般资料,采用RT-qPCR法检测肿瘤组织DLK1、MEG3、MEG8、POU类1同源框1(POU1F1)、类固醇生成因子1(SF-1)基因表达水平,采用免疫组织化学染色检测肿瘤组织生长激素(GH)、PIT1、SF-1表达情况,采用ELISA检测血清GH、胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平。比较GH腺瘤与无功能腺瘤患者一般资料,比较不同临床特征垂体腺瘤患者肿瘤组织DLK1、MEG3、MEG8基因表达水平,分析垂体腺瘤患者肿瘤组织DLK1、MEG3、MEG8基因表达水平与肿瘤组织POU1F1、SF-1基因表达水平的相关性,比较不同肿瘤组织DLK1、MEG3、MEG8基因表达水平垂体腺瘤患者肿瘤组织GH、PIT1、SF-1表达情况,分析GH腺瘤患者肿瘤组织DLK1、MEG3、MEG8基因表达水平与血清GH、IGF-1水平的相关性。结果GH腺瘤患者男性占比、年龄低于无功能腺瘤患者(P<0.05)。男性垂体腺瘤患者肿瘤组织DLK1、MEG8基因表达水平低于女性垂体腺瘤患者(P<0.05)。年龄≤52岁垂体腺瘤患者肿瘤组织DLK1基因表达水平高于年龄>52岁垂体腺瘤患者(P<0.05)。GH腺瘤患者肿瘤组织DLK1、MEG3、MEG8基因表达水平高于无功能腺瘤患者(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,垂体腺瘤患者肿瘤组织DLK1、MEG3、MEG8基因表达水平与肿瘤组织POU1F1基因表达水平均呈正相关,与肿瘤组织SF-1基因表达水平均呈负相关(P<0.05)。根据肿瘤组织DLK1、MEG3、MEG8基因表达水平的中位数,分别将患者分为DLK1基因高表达组(DLK1基因表达水平≥0.00015,46例)和DLK1基因低表达组(DLK1基因表达水平<0.00015,46例)、MEG3基因高表达组(MEG3基因表达水平≥0.00011,46例)和MEG3基因低表达组(MEG3基因表达水平<0.00011,46例)、MEG8基因高表达�
- 吴炜刘永亮王彦董晓柳张利马思伟张欢高华董伟
- 关键词：垂体腺瘤
- PRDM2和c-Myc在垂体生长激素腺瘤发生发展中作用的实验研究被引量：3
- 2020年
- 目的探讨视网膜母细胞瘤相互作用锌指蛋白1(PRDM2)和c-Myc在垂体生长激素腺瘤发生、发展中的作用。方法垂体腺瘤标本来自2013年7月至2016年12月首都医科大学附属北京天坛医院神经外科行手术治疗的70例垂体生长激素腺瘤患者,3例正常垂体组织标本来自遗体自愿捐献者。通过免疫组织化学染色方法检测肿瘤和正常垂体组织中PRDM2和c-Myc蛋白的水平。探讨肿瘤组织中PRDM2与c-Myc蛋白水平之间的关系,以及PRDM2和c-Myc蛋白与肿瘤侵袭能力、肿瘤体积的关系。体外培养大鼠垂体腺瘤GH3细胞株,设立对照组(空白细胞)、空载体组(转染空载体)和PRDM2组(转染PRDM2质粒)。通过细胞增殖实验检测PRDM2对细胞活力的影响;采用流式细胞术观察PRDM2对细胞凋亡的影响;行Transwell小室实验观察PRDM2对细胞侵袭能力的影响;采用蛋白质免疫印迹实验检测PRDM2对GH3细胞c-Myc表达水平的影响。结果根据70例肿瘤标本的免疫组织化学染色评分中位数(PRDM2:40分,c-Myc:170分)分组,PRDM2低评分组(<40分)较PRDM2高评分组(≥40分)有更高的侵袭机会(19/35对比9/35,P=0.015)和更大的肿瘤体积[(17.8±4.5)cm3对比(5.2±0.9)cm3,P<0.01]。c-Myc高评分组(≥170分)较c-Myc低评分组(<170分)有更高的侵袭机会(20/35对比8/35,P=0.003)和更大的肿瘤体积[(15.5±3.5)cm3对比(6.6±2.0)cm3,P=0.027]。70例肿瘤标本中的PRDM2与c-Myc水平呈负相关(r=-0.407,P=0.004)。GH3细胞转染24、48、72 h后,PRDM2组的细胞活力分别为对照组的(82.2±6.3)%、(68.5±5.2)%、(54.7±3.6)%(均P<0.05);而空载体组与对照组的差异均无统计学意义(均P>0.05)。流式细胞术检测结果显示,转染24 h后,PRDM2组膜联蛋白V(AnnexinⅤ)染色阳性细胞和碘化丙啶(PI)染色阳性细胞所占的比率分别为(14.66±3.72)%和(6.21±2.17)%,均高于对照组[分别为(3.35±1.03)%和(1.34±0.48)%,均P<0.05];而空载体组AnnexinⅤ阳性细胞和PI阳性细胞所占比
- 张树恒张树恒李振业李振业张亚卓
- 关键词：原癌基因蛋白质C-MYC肿瘤侵润
- O^6-环己基甲基鸟嘌呤对垂体瘤细胞系MMQ细胞增殖、凋亡、周期的影响及其机制被引量：1
- 2019年
- 目的 观察不同浓度O6-环己基甲基鸟嘌呤对垂体瘤细胞系MMQ细胞增殖、凋亡、周期的影响,并探讨其可能机制.方法 取对数生长期MMQ细胞2 mL,接种于6孔板中.加入0.4、4μmol的O6-环己基甲基鸟嘌呤和二甲基亚砜(分别计为A、B、C组).细胞增殖实验检测细胞OD490值,流式细胞技术测算细胞Annexin V阳性百分数、PI阳性百分数及S期、G1期细胞比例,蛋白印迹实验检测细胞Cdk2、p21、p27蛋白.结果 与C组比较,A、B组培养24、48、72 h的OD490值降低(P均<0.05).与C组比较,A组Annexin V阳性百分数、PI阳性百分数升高(P均<0.05);与B组比较,A组Annexin V阳性百分数降低(P均<0.05).与C组比较,A、B组S期细胞比例降低,G1期细胞比例升高(P均<0.05).与C组比较,A、B组Cdk2蛋白表达降低,A组p27蛋白表达升高(P均<0.05);与B组比较,A组Cdk2蛋白表达升高,p21蛋白、p27蛋白表达降低(P均<0.05).结论 O6-环己基甲基鸟嘌呤可抑制MMQ细胞增殖,诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞在G1期,4μmol较0.4μmol效果更为明显,机制可能与其可抑制CDK2蛋白表达有关.
- 赵丽红李振业高华
- 关键词：P21蛋白P27蛋白
- Nrf3通路参与星形胶质细胞对抗鱼藤酮毒性的保护作用被引量：1
- 2010年
- 目的:寻找星形胶质细胞在对抗由鱼藤酮导致的氧化应激中发挥保护作用的相关分子并探讨其作用机制。方法:小鼠多巴胺能MN9D细胞分别在星形胶质细胞条件培养液(ACM)与星形胶质细胞用新鲜培养基中培养24小时后加入鱼藤酮作用48小时。细胞计数,评价星形胶质细胞条件培养液对MN9D细胞的保护作用。利用基因芯片技术寻找MN9D细胞在ACM处理后发生表达上调或下调基因,并对这些基因进行分析,找出有意义基因。结果:在不同作用时间和鱼藤酮浓度梯度下,经过ACM处理的MN9D细胞活性显著高于在普通培养基中培养的细胞。初步得到104个差异表达基因,其中62个表达上调基因,42个表达下调基因。这些基因主要与凋亡、肿瘤、细胞周期、代谢、信号转导、转录调节、翻译调节和传递蛋白等相关。对其中的Atp5a1,Nrf3基因进行分析,发现Nrf3通路参与了ACM的保护作用。结论:ACM能保护MN9D细胞抵抗鱼藤酮所致的细胞毒性,Atp5a1,Nrf3,GCL,NQO1等基因经ACM处理后发生差异表达,可能是星形胶质细胞保护作用的部分下游信号通路。
- 苏玉金曹倩鲁玲玲孙晓红高华赵莎莎杨慧
- 关键词：帕金森病星形胶质细胞基因芯片
- sFRP4和WIF1参与无功能垂体腺瘤侵袭和复发的研究被引量：3
- 2019年
- 目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(sFRP4)和WNT抑制因子1(WIF1)在无功能垂体腺瘤组织中的表达,分析其与临床特征的关系以及成为治疗靶点的可能性。方法标本取材于2012年1月至2016年12月首都医科大学附属北京天坛医院神经外科收治的且随访资料完整的126例无功能垂体腺瘤患者。构建54例侵袭性腺瘤(侵袭组)、72例非侵袭性腺瘤(非侵袭组)和6例正常垂体组织石蜡标本的组织芯片。免疫组织化学方法检测sFRP4和WIF1蛋白的水平;实时荧光定量PCR检测GT1-1细胞中sFRP4和WIF1的mRNA水平;细胞活力实验检测地西他滨对GT1-1细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测地西他滨对GT1-1细胞侵袭能力的影响。结果免疫组织化学染色结果显示,侵袭组中sFRP4和WIF1的H-Score值分别为134.5±45.3和73.7±24.1;而非侵袭组分别为223.3±47.6和133.6±35.7(均P<0.05)。随访资料显示,sFRP4和WIF1与肿瘤复发密切相关(r=-0.383,P=0.025;r=-0.557,P=0.006),与肿瘤大小、年龄和性别无关(均P>0.05)。给予地西他滨24 h、48 h和72 h后,与等体积二甲基亚砜(对照组)相比,药物组GT1-1细胞的细胞活力分别为(84.5±7.3)%、(74.3±6.5)%和(62.2±5.8)%(均P<0.05);Transwell实验结果显示,药物组的透膜细胞为(154±42)个,而对照组为(436±85)个(P<0.01)。实时荧光定量PCR实验结果显示,sFRP4和WIF1的mRNA水平随给药时间的延长则逐渐升高(P<0.05)。结论sFRP4和WIF1的表达水平与无功能垂体腺瘤的侵袭性密切相关,地西他滨能上调sFRP4和WIF1的水平,从而起到肿瘤抑制作用。
- 李丹王红云王大维王嵩陈一元张亚卓高华
- 关键词：垂体肿瘤肿瘤侵润地西他滨
- 垂体腺瘤临床诊疗与研究中心神经内镜技术培训经验及改进探索
- 2018年
- 近年来伴随神经内镜手术设备和神经内镜技术的日新月异,其在神经外科手术方面发挥的作用也越来越重要,因而带来内镜神经外科高级人才需求量的不断增大。首都医科大学垂体腺瘤临床诊疗与研究中心在依托国家卫计委神经内镜与微创技术培训基地基础上,举办了一系列神经内镜培训班,并总结了部分有益经验。中心将在现有培训基础上继续加大内镜神经外科高级人才培训,不断总结培训经验和不足并加以改进,以期能够为国家培养一批熟练的掌握神经内镜手术技术的高级医师队伍,为国内内镜神经外科的发展尽一份绵薄之力。
- 龚磊张亚卓高华
- 关键词：神经内镜神经外科
