骆天红
- 作品数:65 被引量:213H指数:7
- 供职机构:上海交通大学瑞金医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- PPARγ2诱导脂肪细胞分化相关基因的克隆及鉴定被引量:5
- 2001年
- 目的分离和克隆小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ2 (mPPARγ2 )诱导脂肪细胞分化的相关基因。方法在体外建立mPPARγ2诱导NIH3T3成纤维细胞分化成脂肪细胞模型基础上 ,采用mRNA差异显示技术分离、克隆PPARγ2诱导的脂肪细胞高表达或低表达的cDNA片段 ,再通过半定量RT—PCR证实。 结果经mRNA差异显示技术分离到 2 0条差异显示片段 ,进一步对差异显示片段进行PCR扩增、T/A亚克隆及测序分析 ,与GenBank基因数据库比较后 ,得到 8个已知基因 ,一条新基因序列 ,2个EST序列和 7个新的EST序列。半定量RT—PCR结果显示UNR基因在PPARγ2诱导的脂肪细胞中表达上调 ,而凋亡抑制因子 5 (API5 )的表达则下调。
- 李果左祥生丁伟骆天红李纪平罗敏
- 关键词:PPARΓ2MRNA差异显示基因克隆CDNA脂肪细胞分化
- 极低密度脂蛋白受体基因单核苷酸多态与2型糖尿病的关系
- 2011年
- 目的探讨极低密度脂蛋白受体(VLDLR)基因单核苷酸多态(SNP)与2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法使用PCR测序方法,对VLDLR基因的外显子以及临近的内含子进行测序以确定该基因的单核苷酸多态(SNP),对高频的SNP在华东地区汉族T2DM人群与正常人群中进行基因分型。结果 VLDLR基因有5个SNP,2个SNP为高频。其中,启动子的一个SNP在T2DM人群与正常人群有显著差异(P<0.05)。结论 VLDLR基因的SNP可能与华东地区T2DM的发病有关。
- 吴刚董艳李果骆天红罗敏
- 关键词:单核苷酸多态2型糖尿病
- 小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ_2重组逆转录病毒载体在NIH3T3细胞中的表达被引量:1
- 2001年
- 目的 通过应用重组逆转录病毒介导小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ2(mPPARγ2 )基因整合入NIH3T3细胞基因组中并进行表达。方法 从经测序证实含正确序列mPPARγ2的重组质粒pcDNA3/mPPARγ2 中 ,双酶切下约 1.5Kb的mPPARγ2 全长cDNA编码序列 ,亚克隆入逆转录病毒载体pGCEN中构建重组逆转录病毒载体pGCEN/mPPARγ2 。pGCEN/mPPARγ2 及pGCEN经LipofectAMINE感染病毒包装细胞系PA317细胞 ,通过筛选PA317细胞G418抗性克隆 ,收集病毒上清 ,然后用其感染靶细胞NIH3T3细胞 ,用免疫荧光染色及Western印迹方法鉴定mPPARγ2 在NIH3T3细胞中的表达情况。结果 构建了含mPPARγ2 全长cDNA重组逆转录病毒载体 ,获得了滴度分别为 5×10 4 CFU/ml和 6× 10 5CFU/ml的pGCEN/mPPARγ2 及pGCEN的病毒上清。经鉴定pGCEN/mPPARγ2 能有效地感染靶细胞NIH3T3细胞并表达mPPARγ2 。结论 本研究结果为在体外建立脂肪细胞分化模型及为进一步研究PPARγ2
- 李果左祥生骆天红李纪平刘赟孙卫华罗敏
- 关键词:NIH3T3细胞逆转录病毒科小鼠脂肪细胞
- 人胰岛素原单克隆抗体的制备血胰岛素原免疫放射测定法的建立及初步临床应用
- 骆天红
- 华东地区汉族脂肪分化相关蛋白基因SNP的研究被引量:5
- 2003年
- 目的研究华东地区汉族 2型糖尿病病人脂肪分化相关蛋白 (ADRP)基因的单核苷酸多态 (SNP)。方法使用PCR测序方法 ,对ADRP基因的启动子、外显子以及临近的内含子进行测序 ,确定该基因在华东地区汉族2型糖尿病病人中所存在的SNP。 结果所测ADRP基因片段总长度为 5 0 0 3个碱基 ,有 2 1个SNP ,高频、低频分别是 5、16个。 结论ADRP基因在华东地区汉族 2型糖尿病病人中存在SNP ;对某些SNP进行基因分型可以进一步确定ADRP基因中与 2型糖尿病相关的SNP存在情况。
- 吴刚李果骆天红董艳黄薇罗敏
- 关键词:2型糖尿病脂肪分化相关蛋白单核苷酸多态性聚合酶链反应
- 中国人膜联蛋白A1基因单核苷酸多态性及其与2型糖尿病的相关性被引量:3
- 2004年
- 目的 筛查上海地区汉族人群中膜联蛋白 A1(annexin A1,ANXA1)基因的单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphisms,SNPs) ,并通过关联分析研究其与 2型糖尿病的相关性。方法 选取2 4例 2型糖尿病患者的 DNA样本 ,采用直接测序法对 ANXA1基因的启动子区、全部外显子及其临近内含子区作 SNPs筛查 ,并在其余的 171例 2型糖尿病和 189名正常对照间作进一步的基因分型。结果ANXA1基因测序长度 6 798bp,共检出 7个 SNPs,其中启动子区 2个 (- 7974 C>T,- 70 4 0 G>T) ,内含子区 3个 (+90 5 9A>G,+92 0 4 C>T,+10 4 86 A>G) ,5′-非翻译区 1个 (- 6 6 14 A>G) ,编码区 1个(+1784 A>G)。进一步的基因分型后显示这些 SNPs的等位基因频率在 2型糖尿病和正常对照组之间差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 ANXA1基因多态性与上海地区汉族人群中 2型糖尿病无显著相关性。
- 董艳李果骆天红吴刚黄薇罗敏
- 关键词:2型糖尿病单核苷酸多态性中国人
- My027融合蛋白表达载体构建及其在大肠杆菌的表达
- 2008年
- 目的探索My027蛋白的体外表达,通过原核表达获得大量可溶性My027融合蛋白。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增出My027片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-My027。转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,亲和层析法获得融合蛋白,采用十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)、Western印迹法及质谱进行鉴定。结果融合蛋白以水溶形式分泌于大肠杆菌BL-21胞质中,纯化后的目的蛋白经SDS-PAGE、Western印迹法及质谱证实高效表达,氨基酸序列正确。结论人脂肪细胞新蛋白My027在pGEX-4T-2原核表达载体可获高效表达,为进一步研究其功能奠定基础。
- 李晓华郑升刘优萍骆天红罗敏
- 关键词:融合蛋白原核表达
- 2型糖尿病侯选基因Neurod 1、Neurod 4和GPD 2的突变检测被引量:1
- 2004年
- 目的 研究侯选基因Neurod 1、Neurod 4和GPD2与2型糖尿病(2-DM)之间的关系。方法 采用双向测序和Polyphred软件,寻找单核苷酸多态性(SNP),对75~96份2-DM病人和75~96份正常人进行酶切、单管双向等位基因特异扩增和单碱基延伸反应进行基因分型及统计分析。结果 Neurod 1基因在中国2-DM病人中未找到SNPs,GPD 2基因找到1个 SNPs,Neurod 4基因找到6个SNPs。但基因分型研究未发现它们在2-DM病人和正常人之间有显著差异(P>0.05)。基因分型结果经测序检验均准确无误。结论 Neurod 1、Neurod 4和GPD 2基因与中国汉族人群2-DM无显著相关。
- 孙卫华李果姜正文骆天红黄薇罗敏
- 关键词:2型糖尿病突变
- 2型糖尿病分子遗传学研究的现今认识被引量:2
- 2007年
- 近年研究表明,遗传因素在2型糖尿病(2-DM)的发生中起重要作用。但2-DM的遗传模式不符合单纯的孟德尔遗传,而是呈复杂性遗传模式,即多个基因变异与环境因素的影响共同决定疾病的易感性。由于这类复杂性疾病存在着基因-基因及基因-环境间的相互作用,因而给研究这类疾病的易感基因带来很大困难。
- 骆天红
- 关键词:2型糖尿病分子遗传学
- TCF7L2基因多态性与中国人群2型糖尿病发病风险的关联研究被引量:7
- 2007年
- 目的:探讨TCF7L2基因微卫星多态性与中国人群2型糖尿病(2-DM)发病风险的关系。方法:应用ABI3700测序仪对921例2-DM患者和1107名正常人的微卫星(DG10S478)进行测序分型,并进行与2-DM的关联分析。结果:在本研究人群中共发现微卫星(DG10S478)的6种等位基因,分别是-8、-4、0、4、8和12。主要等位基因0在本研究人群中的平均频率为95.63%,非零等位基因X在正常组和2-DM组中的频率分别是3.61%和4.83%,其相对危险度为1.35(95%的可信区间为1.00~1.84,P=0.053)。X/0基因型在2-DM组中的分布频率较正常对照组显著升高(9.55%比7.23%,P=0.058),该基因型的相对危险度为1.34(95%的可信区间为0.98~1.84,P=0.069)。此外,胰岛功能相关指数IGI在携带风险等位基因X人群和非携带人群中有显著差异(1.22±0.31比1.41±0.25,P=0.042)。结论:TCF7L2基因微卫星D10S478的多态性可能与中国人群2-DM发病相关,但考虑到该风险等位基因在中国人群中属低频分布,故其在中国人群2-DM的发病过程中可能不起显著作用。
- 李文毅骆天红张宏利徐佳李果罗敏
- 关键词:2型糖尿病TCF7L2微卫星