马文学
- 作品数：24 被引量：42H指数：4
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表皮生长因子受体跨膜区编码序列的克隆
- 2002年
- 目的 :克隆表皮生长因子受体跨膜区 ( Transm em brane,TM )编码序列 ,为构建跨膜型超抗原和细胞因子的表达载体奠定基础。方法 :以表达 c- erb- B2癌基因的中国卵巢癌细胞系 HO- 8910细胞的 RN A逆转录产物( c DNA)为模板 ,用两条针对 c- erb- B2全长基因序列中编码 TM区序列特异性的引物 ,采用 RT- PCR方法克隆 T M区片段并测序。结果 :实验克隆的 TM编码序列 ,经测序证实与 Genbank中接受号为 M11730的 TM区序列完全一致 ;与接受号为 X0 336 3的 TM区序列存在 G→ A的多态性。结论 :成功地克隆了 TM编码序列 ,并证实源于中国的卵巢癌细胞系 H O- 8910中所包含的表皮生长因子受体基因中编码的 TM区序列存在多态性。
- 马文学余海易平勇金洪传严杰
- 关键词：表皮生长因子受体跨膜区克隆原癌基因基因表达C-ERB-B2
- 非病毒载体聚乙烯亚胺转基因因素的优化被引量：2
- 2005年
- 聚乙烯亚胺属于阳离子多聚物,可浓缩DNA作为转基因非病毒载体。但其转染影响变量较多,如果不能充分控制将不能得到重复的、良好的结果。这里测定了聚乙烯亚胺转基因效率的影响因素,为合成更复杂的人工转基因载体创造条件。我们通过聚乙烯亚胺转染编码β-半乳糖苷酶的pSVβ质粒到CO S-7和N IH 3T 3细胞中,测定质粒因素、血清、细胞密度、操作方式以及转染复合物的保存因素对聚乙烯亚胺转基因效率的影响。结果表明:质粒中生物活性抑制剂明显降低转染效率,通过截流分子量3000或10000的超滤可以除去生活性抑制剂;断裂的质粒降低转染效率;培养液中的血清、白蛋白降低转染效率;细胞密度影响转染效率;PE I/DNA复合物与细胞作用8h后吸去,转染效果最优。冻存显著降低PE I/DNA转染复合物转染效率。聚乙烯亚胺可以作为合成新型非病毒载体的骨架,但必须控制有关因素才能发挥最佳的和可重复性的转染结果。
- 李经忠王青青余海沈芬平马文学易平勇
- 关键词：聚乙烯亚胺基因转染非病毒载体
- 转移相关基因CD_(44)V_6表达与乳癌转移和预后关系的研究被引量：1
- 2000年
- 目的 :探讨 CD4 4V6表达与乳癌转移和预后之间的关系。方法 :用免疫组化染色方法和微波抗原修复技术 ,检测 78例原发性乳癌组织中 CD4 4V6蛋白的表达 ,分析各临床病理因素和 CD4 4V6表达与乳癌术后 5年生存率的关系。结果 :CD4 4V6的阳性表达率为 55.1% ( 4 3/ 78) ,腋淋巴结阳性乳癌中的表达率为 72 .7% ( 32 / 4 4 ) ,明显高于阴性乳癌中 CD4 4V6表达率 32 .4 % ( 11/ 34 ) ,P<0 .0 1。CD4 4V6阳性组乳癌患者的预后明显较阴性组差 ( P<0 .0 5)。结论 :CD4 4V6表达与乳癌转移和预后密切相关 ;CD4 4V6、腋淋巴结状况、肿瘤大小、组织学分级和 TNM分期是影响乳癌术后 5年生存率的重要因素。
- 马文学邓甬川
- 关键词：乳腺肿瘤CD44V6免疫组织化学肿瘤转移预后
- 重组超抗原葡萄球菌肠毒素A基因膜型表达载体的构建
- 目的:构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因的膜型表达载体，为进一步制备其具有靶向作用的抗肿瘤的融合蛋白创造条件.
方法:以葡萄球菌(ATCC 13565)的基因组DNA为模板，用两条针对SEA全长基因特异的引物，...
- 马文学余海金洪传严杰易平勇
- 关键词：葡萄球菌肠毒素跨膜区肿瘤治疗
- 文献传递
- 单抗导向及膜表达的超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A抗肿瘤作用研究
- 余海王青青曹雪涛马文学黄常新等
- 超抗原(Supcrantigen，Sag)是一类强有力的T细胞激活剂，对表达MHCII类分子的靶细胞产生细胞毒作用，这种作用近年来被用于恶性肿瘤的生物治疗。但由于超抗原无肿瘤特异性，大多数肿瘤又不表达MHC II类抗原，...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤超抗原生物治疗
- CD44v6与乳腺癌转移和预后的关系被引量：11
- 2000年
- 目的 研究CD44v6表达与乳腺癌转移和预后的关系。 方法 用免疫组化方法对 78例乳腺癌石蜡标本及 37例乳腺癌新鲜标本的CD44v6蛋白的表达水平进行了检测 ;RT PCR方法对 37例乳腺癌新鲜标本的CD44v6mRNA表达水平进行了检测。并对患者CD44v6的表达水平、肿瘤大小、腋淋巴结转移状况、TNM分期、组织学分级与预后间的关系进行了分析 ,同时比较 2种方法的敏感性。 结果 乳腺癌患者的CD44v6表达水平与原发肿瘤大小、腋淋巴结转移状况、TNM分期明显相关 ,是影响患者术后 5年生存率的重要因素。乳腺癌新鲜标本中CD44v6mRNA和蛋白的阳性表达率分别是 70 3%和 5 9 5 % ,两者差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。 结论 乳腺癌患者的CD44v6的表达水平与癌细胞的转移和患者的预后相关 ;免疫组化和RT -PCR 2种方法 ,在检测CD44v6的敏感性方面差异无显著性。
- 邓甬川马文学方晓明郑树
- 关键词：乳腺癌预后肿瘤转移CD44V6
- 双重免疫分子膜表面修饰瘤苗的制备及抗肿瘤作用的研究
- ＜正＞ 肿瘤的免疫抑制往往涉及到多种免疫活性因子的下调,研究表明多基因共转染瘤苗在打破肿瘤微环境的免疫抑制、激发机体的免疫应方面优于单基因转染瘤苗,但是基因转染法亦有其局限性,如原代细胞不易转染,转染效率低、整合后基因的...
- 易平勇余海马文学王青青
- 文献传递
- SEA基因与GPI信号肽序列融合基因的真核表达载体的构建和序列分析被引量：3
- 2002年
- 目的 将超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A (staphylococcusenterotoxinA ,SEA)基因与人胎盘碱性磷酸酶(hPLAP 1 )C末端信号肽序列 ,即糖基化磷脂酰肌醇 (glycosyl phosphatidylinositol,GPI)附着信号序列 ,拼接成融合基因 ,并构建该融合基因的真核表达载体。方法 利用基因SOEing法 ,分别扩增hPLAP 1C末端信号肽序列和SEA基因 ,然后将二段基因拼接起来 ,拼接后与pGEM T克隆载体连接 ,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3 .1 (+)中 ,测序鉴定。结果 分别成功扩增出hPLAP 1C末端信号肽序列 1 31bp和SEA基因 789bp ,并将二段基因序列成功拼接 (90 1bp) ,且成功构建了真核表达载体pcDNA3 .1 (+) /SEA GPI,经测序是正确的。结论 真核表达载体pcDNA3 .1 (+) /SEA GPI的构建 ,为研究SEA GPI抗肿瘤作用奠定了基础。
- 易平勇余海马文学
- 关键词：SEA基因融合基因真核表达载体肿瘤
- 糖基磷脂酰肌醇锚定型小鼠B7.1融合蛋白的制备及抗肿瘤作用研究被引量：5
- 2004年
- 目的制备糖基磷脂酰肌醇锚定型小鼠B7.1融合蛋白(mB7.1GPI),研究该蛋白制备的肿瘤疫苗的抗肿瘤作用。方法用已构建的重组糖基磷脂酰肌醇锚定型小鼠B7.1的表达载体pcDNA3.1(+)mB7.1GPI,转染到CHO细胞中,表达和纯化mB7.1GPI。采用流式细胞术和免疫荧光激光共聚焦显微镜观察其对细胞膜的锚定作用。建立C57BL6小鼠的淋巴瘤模型,观察用mB7.1GPI融合蛋白制备的肿瘤疫苗对荷瘤小鼠的免疫治疗作用。结果mB7.1GPI融合蛋白能够锚定在肿瘤细胞膜上,能有效刺激小鼠脾细胞增殖和分泌IL2与IFNγ。融合蛋白制备的肿瘤疫苗能够显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,并延长其生存期。结论糖基磷脂酰肌醇锚定型小鼠B7.1制备的肿瘤疫苗具有较强的抗肿瘤作用,有可能作为一种有效的新型疫苗用于肿瘤的治疗和预防。
- 易平勇余海王青青黄常新李经忠马文学
- 关键词：B7.1小鼠GPI融合蛋白磷脂酰肌醇PCDNA3
- 转移相关基因CD44V6在不同恶性肿瘤细胞系中的表达及意义被引量：3
- 2000年
- 目的 寻找具有高转移潜能的肿瘤细胞系。方法 采用免疫组织化学染色ＳＰ 法，检测ＣＤ４４ Ｖ６ 在不同恶性肿瘤细胞系中的表达。结果 仅有Ｃｏｌｏ２０５ 细胞表达ＣＤ４４ Ｖ６ ，其表现为细胞膜表面有呈连续线状分布的棕色颗粒。结论 大肠癌Ｃｏｌｏ２０５ 细胞可能具有较高的转移能力。
- 马文学邓甬川
- 关键词：肿瘤免疫组织化学肿瘤转移
