马勇斌 作品数:11 被引量:44 H指数:5 供职机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 公益性行业(农业)科研专项 陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
甘蓝CMS下胚轴和子叶的离体培养与植株再生研究 被引量:6 2010年 【目的】探索一种利用甘蓝胞质雄性不育系(CMS)下胚轴和子叶进行快速扩繁的技术,为利用CMS大量繁制甘蓝杂交种提供一条新途径。【方法】以甘蓝CMS05—2—10为试材,将苗龄5~7d无菌苗的下胚轴和子叶切下,接种于MS培养基上,45~50d后统计再生芽数,比较6一BA与NAA不同质量浓度配比对不定芽的诱导情况;将诱导出的不定芽接种于添加不同质量浓度(O,0.1,0.3,0.5mg/L)NAA的MS生根培养基上,20d后比较生根率和根的长势。【结果】在对下胚轴和子叶进行不定芽诱导时,MS培养基中分别添加1.0和4.0mg/L的6-BA对下胚轴、子叶的诱导效果较好,其芽再生频率和分化系数分别为83.3%,53.0%和3.6,3.0。在MS培养基中添加1.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA,其对下胚轴不定芽的诱导效果较好,芽再生频率为80.7%,分化系数为3.4,褐化率为1.5%;在MS培养基中添加4.0mg/L6-BA+0.3mg/LNAA,其对子叶不定芽的诱导效果较好,芽再生频率为50.0%,分化系数为3.2,褐化率为3.4%;二者的褐化率均明显低于仅添加6-BA的处理。在MS生根培养基中添加0.3mg/LNAA时,不定芽的生根效果较好,生根率达100%,且根系生长健壮。【结论】利用甘蓝胞质雄性不育系CMS05—2—10的下胚轴和子叶作为外植体进行不定芽的诱导,对于下胚轴,其适宜培养基为MS+1.0mg/L6-BA+30g/L蔗糖+8g/L琼脂;对于子叶,其适宜培养基为MS-4-4.0mg/L6-BA+30g/L蔗糖+8g/L琼脂。不定芽诱导生根的最适培养基为MS+0.3mg/LNAA+30g/L蔗糖+8g/L琼脂。 许念芳 张恩慧 李殿荣 许忠民 程永安 王小艳 马勇斌关键词:甘蓝 胞质雄性不育系 下胚轴 子叶 离体培养 甘蓝株龄和环境温度对小孢子诱导出胚的影响 诸多因素影响着甘蓝游离小孢子的培养技术,其小孢子供体植株生长环境温度或株龄对出胚率是否影响成为本研究目的。在露地栽植成株与半成株,温室栽植成株高温24℃、28℃、32℃处理和相同品种成株移栽温室与露地栽培,游离花蕾小孢子... 张恩慧 杨安平 许念芳 马勇斌 许忠民 程永安关键词:甘蓝 小孢子培养 环境温度 株龄 出胚率 一种促进甘蓝游离小孢子胚胎发生的方法 本发明公开了一种促进甘蓝游离小孢子胚胎发生的方法,该方法是在含有3mL NLN-13悬浮小孢子的培养皿中直接添加秋水仙素生物碱和噻二唑苯基脲(TDZ)细胞分裂素诱导胚状体发生。具体包括下列步骤:1)分别配制秋水仙素和TD... 张恩慧 杨安平 许念芳 许忠民 程永安 马勇斌 王小艳 马青山文献传递 秋水仙碱对甘蓝游离小孢子胚胎发生及发育的影响 被引量:6 2010年 【目的】研究秋水仙碱对甘蓝小孢子胚胎发生及发育的影响,为促进甘蓝小孢子培养技术的有效利用提供依据。【方法】以甘蓝一代杂种及不同自交代数的高代自交系、低代自交系为试材,在游离小孢子培养基中添加不同质量浓度秋水仙碱,处理时间为48h,以不添加秋水仙碱为对照(CK),在同等条件下进行小孢子培养,分别比较产胚量和胚胎发育状况的差异。【结果】(1)培养基中添加10mg/L秋水仙碱的40份甘蓝材料中,有19份产生了胚状体,产胚材料比率为47.5%,较对照提高25%;(2)以9份甘蓝一代杂种及不同自交代数的高代自交系、低代自交系为试材,在培养基中添加1,10,50mg/L秋水仙碱后,每蕾产胚数、子叶形胚率均较对照有所增加,其中一代杂种及低代自交系材料在1或10mg/L秋水仙碱处理时增加幅度较大,每蕾产胚数和子叶形胚率分别为1.30~2.20个和15.0%~69.1%,而高代自交系材料在10或50mg/L秋水仙碱处理时增加幅度较大,每蕾产胚数和子叶形胚率分别为0.78~1.98个和14.1%~70.6%;(3)在培养48h时,用倒置显微镜观察各试材的小孢子,发现培养基中分别添加1,10,50mg/L秋水仙碱时,膨大小孢子数量均较对照明显增多;在静止培养期间用倒置显微镜观察各试材小孢子的胚胎发育情况,发现培养基中添加1,10,50mg/L秋水仙碱处理的多细胞原胚、球形胚、心形胚、鱼雷形胚频率均较对照高。【结论】在甘蓝小孢子培养基中添加秋水仙碱,可使培养无反应材料的部分材料产胚,使培养有反应材料的产胚量提高,同时也对胚胎的良好发育有促进作用。 杨安平 张恩慧 郑爱泉 尚丽荣 许念芳 马勇斌关键词:OLERACEA 小孢子培养 秋水仙碱 胚胎发生 甘蓝小孢子培养几个因素探讨和DH植株再生技术研究 本试验进行了甘蓝游离小孢子培养技术和DH株再生技术研究,主要探讨了花蕾的长度,不同基因型,花蕾供体植株生长环境和不同自交世代对小孢子诱导出胚的影响以及不同培养基组成队胚状体诱芽效果;同时进行了小孢子再生植株倍性鉴定和开展... 马勇斌关键词:甘蓝 小孢子培养 出胚率 植株再生 文献传递 灌水频率对甘蓝抗病性及品质和产量的影响 被引量:7 2010年 【目的】探究灌水频率对甘蓝栽培中抗病性、品质和产量3个主要性状指标的影响,为确定甘蓝生产的最适宜灌水频率及制定其标准化栽培技术提供参考。【方法】选用国家审定甘蓝品种"秦甘60"为试材,秋季栽培后于第1片莲座叶展开时进行1次统一灌水后,采用相同灌水量不同灌水频率,即间隔6,8,10(CK),12和14d灌水共5个处理,在甘蓝结球中后期调查处理间病毒病和黑腐病的发病株数和发病程度,在叶球采收期统计产量并测定品质,比较灌水频率对"秦甘60"甘蓝品种抗病性、品质和产量等性状指标的影响。【结果】在"秦甘60"甘蓝品种栽培中,灌水频率为8d时病害最轻,病毒病和黑腐病的病情指数分别为1.48(HR)和1.85(HR),产量最高,可达71896.0kg/hm2,较对照增产9.3%;5个灌水处理中灌水间隔越短,结球越紧实,帮叶比较大,中心柱变长,可溶性糖和干物质含量增加,叶球鲜食口感更为脆甜,品质更优。【结论】"秦甘60"甘蓝品种在秋季栽培的水分管理中,当第1片莲座叶展开统一灌水后,以灌水频率为8或10d的灌水效果较好。总体而言,灌水频率为6,12,14d时,甘蓝植株容易感染病害,叶球品质变差,产量较低;而灌水频率为8或10d时,甘蓝植株高抗病毒病并兼抗黑腐病,叶球紧实度≥0.6g/cm3,帮叶比≤25.3%,中心柱≤5.86cm,营养丰富、质地脆甜、品质优良,产量高,可实现"秦甘60"甘蓝品种抗病优质丰产的标准化栽培目标。 张恩慧 马勇斌 程永安 许忠民 许念芳 王小艳关键词:甘蓝 灌水频率 抗病性 利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株技术研究 被引量:5 2011年 【目的】探索一种能将有限的DH株快速扩繁的植株再生技术,扩大DH株数量以提高育种效率。【方法】以甘蓝小孢子胚状体不定芽叶片为试材,MS为基础培养基,分别添加不同质量浓度的6-BA(1.0,2.0,3.0,4.0mg/L)和NAA(0.05,0.1,0.2,0.4mg/L),筛选出最优质量浓度组合;在6-BA和NAA最优质量浓度组合上,继续添加不同质量浓度的GA3(0.5,1.0,1.5,2.0mg/L),比较筛选小孢子不定芽叶片的最佳再生方法。最后,在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L不定芽诱导培养基上,研究不同生长日龄DH株叶片的诱导效果。【结果】在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L中,不定芽再生频率最高,为64.29%,分化系数4.03;添加6-BA、NAA和GA33种激素,对不定芽再生频率促进作用更大,其中MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA31.5mg/L诱导效率最高,不定芽再生频率达到了80.36%,分化系数为4.15。当DH株叶片生长日龄为25d时,不定芽再生频率相对最大,达到68.76%,分化系数为3.62,35d后诱导效果下降。【结论】甘蓝DH株叶片诱导植株再生的适宜培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA31.5mg/L;以生长日龄为25d左右的甘蓝DH株叶片作为外植体诱导植株再生效果较好。 马勇斌 张恩慧 李殿荣 肖怀娟 许忠民 程永安关键词:甘蓝 叶片 植株再生 一种促进甘蓝游离小孢子胚胎发生的方法 本发明公开了一种促进甘蓝游离小孢子胚胎发生的方法,该方法是在含有3mL NLN-13悬浮小孢子的培养皿中直接添加秋水仙素生物碱和噻二唑苯基脲(TDZ)细胞分裂素诱导胚状体发生。具体包括下列步骤:1)分别配制秋水仙素和TD... 张恩慧 杨平安 许念芳 许忠民 程永安 马勇斌 王小艳 马青山一种利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株的方法 本发明公开了一种利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株的方法,其特征在于,包括以下步骤:A1,胚状体不定芽诱导;A2,外植体获得:以小孢子胚状体诱导出不定芽叶片达1cm时起计算叶片生长日龄,选用生长日龄为25天的叶片作... 张恩慧 马勇斌 程永安 杨安平 许忠民 朱守亮 高海娜 马英夏 李伟 王朝阳文献传递 甘蓝Ogura胞质雄性不育基因的RAPD标记 被引量:4 2010年 以甘蓝Oguar胞质雄性不育系CMS451及其保持系为材料,优化甘蓝RAPD体系,并用RAPD标记分析了Oguar胞质不育基因。结果表明,适合甘蓝RAPD体系为,25μL中含有2.0 mmol/L MgCl2,0.2mmol/L dNTPs,0.56μmol/L pri mer,0.5 UTaqDNA聚合酶,20 ng DNA,2.5μL 10×buffer(剩余的用ddH2O补充);发现S20-495为不育基因的特异条带,在NCBI上比对此特异条带序列发现它与芜菁自交不亲和系SRK-46、SP11-46和SLG-46的基因全序列同源性达78%。 王小艳 张恩慧 许忠民 程永安 许念芳 马勇斌关键词:甘蓝 胞质雄性不育 RAPD