顾存林 作品数:15 被引量:16 H指数:2 供职机构: 青海大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国科学院西部之光基金 青海大学中青年科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 轻工技术与工程 更多>>
慢性低氧对HPH大鼠RAS经典轴和反向调节轴的影响 被引量:1 2022年 目的探讨慢性低氧对HPH大鼠RAS经典轴和反向调节轴的影响。方法选取8周龄SD大鼠20只,随机分为对照组与低氧组,对照组大鼠在西宁地区喂养,低氧组在低压氧舱(模拟海拔4500 m)喂养,各组大鼠分别给予充足的食物和活动空间,28 d后采用右心导管术测定平均肺动脉压(mPAP);取腹主动脉血检测血常规;取各组大鼠肺组织用苏木精-伊红(HE)染色,应用图像采集系统及图像分析软件观察并计算肺血管管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)、管壁厚度占血管直径的百分比(WT%)以及管腔面积与血管总面积的百分比(LA%);用免疫组化法检测肺动脉内皮标志物CD31抗原的表达;用蛋白免疫印迹法检测ACE、AngⅡ、AT1R、ACE2和Mas蛋白的表达。结果与对照组相比,低氧组大鼠的mPAP显著升高(P<0.05)。血常规结果显示,低氧组大鼠白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)水平较对照组显著升高;而血小板(PLT)数量较对照组显著降低(P<0.05)。形态学结果显示,低氧组大鼠肺血管管壁厚度显著增加,管腔狭窄,WA%与WT%较对照组显著升高(P<0.05),LA%较对照组显著降低(P<0.05)。免疫组化结果显示,低氧组大鼠肺动脉内皮标志物CD31抗原的表达较对照组显著降低。蛋白免疫印迹结果显示,与对照组相比,ACE、AngⅡ、AT1R蛋白的表达量在低氧刺激下显著升高(P<0.05),而ACE2、Mas蛋白表达量在低氧损伤后明显降低(P<0.05)。结论低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的RAS经典轴ACE/AngⅡ/AT1R上调,反向调节轴ACE2/Ang(1-7)/Mas下调。 孙旭阳 杨占婷 南星梅 顾存林 芦殿香 李占强关键词:低氧 肾素-血管紧张素系统 低氧性肺动脉高压 虚拟仿真和TBL案例教学在生物化学理论教学中的应用——以“糖代谢”教学为例 2023年 通过引入生物化学相关案例,学生可将所学理论知识与实际问题相结合,提高问题解决能力和创新思维。虚拟仿真技术的应用为生物化学理论教学带来了新的可能性。通过虚拟实验和模拟操作,学生能加深对生物化学原理的理解。结合具体案例和实例,教师按照逻辑关系逐步提出问题,小组则逐步深入讨论,教师同步进行分析,激发学生独立思考和探索精神。结合小组内部、小组之间以及教师的评分,对教学效果进行评价。并通过问卷调查,获取教学经验,为未来的案例教学改革和提高课堂教学效果提供参考。 顾存林 魏晓星 安娟关键词:生物化学 理论教学 二氯化钴对胃癌细胞SGC7901凋亡和增殖的影响 被引量:2 2012年 目的了解胃癌细胞系SGC7901在缺氧状态下凋亡和增殖情况,探讨低氧诱导因子(hypoxia induced factor,HIF-1α)与胃癌细胞SGC7901凋亡和增殖的关系。方法以二氯化钴(CoCl2)作为缺氧模拟剂,利用RT-PCR、免疫荧光及Western blotting法检测SGC7901细胞HIF-1α在转录水平和翻译水平上的表达,利用流式细胞仪检测SGC7901细胞在不同缺氧程度下的细胞凋亡率,利用MTT法观察SGC7901细胞的增殖情况。结果 (1)50μM CoCl2处理SGC7901细胞24小时后,HIF-1a mRNA及蛋白表达明显增加;(2)50μM CoCl2处理SGC7901细胞24小时后,细胞凋亡减少;(3)50μM CoCl2处理24小时后,细胞生长和增殖均加快。结论 50μM CoCl2处理SGC7901细胞24小时后,细胞增殖能力增加,细胞凋亡减少,HIF-1α表达增加,提示其在此过程中发挥重要作用。 顾存林 耿排力 吕有勇关键词:胃癌细胞 缺氧 凋亡 低氧诱导因子 亚高原地区野百合碱诱导大鼠肺动脉高压模型的剂量研究 2021年 目的探讨亚高原地区野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导大鼠肺动脉高压模型的最佳剂量。方法将从平原地区购买85只♂SD大鼠随机分为对照组、MCT-20 mg·kg^(-1)组、MCT-30 mg·kg^(-1)组、MCT-40 mg·kg^(-1)组、MCT-50 mg·kg^(-1)组、MCT-60 mg·kg^(-1)组。除对照组外,所有大鼠于同日接受单次不同浓度MCT皮下注射,随后置于亚高原地区饲养,MCT注射第28天末采用右心导管术检测大鼠平均肺动脉压力,并计算大鼠右心室肥厚指数以评估右心肥厚程度,取大鼠肺组织行HE染色以评价肺血管重构情况,同时将大鼠的一般情况、生存率、体质量变化、脏器系数、血液学指标和模型成功率作为辅助评价指标。结果与对照组比较,单次皮下注射MCT-30,40,50,60 mg·kg^(-1)均可引起大鼠平均肺动脉压力增高、右心室肥厚和血管重构(P<0.05),模型符合肺动脉高压诊断标准。结论30 mg·kg^(-1)是亚高原地区MCT诱导大鼠肺动脉高压模型的最佳剂量。 陈婷婷 杨占婷 华玉美多 冀磊 顾存林 王珊 张小楠 南星梅 李占强 芦殿香关键词:亚高原 野百合碱 肺动脉高压 胃癌弱差异基因表达谱中TINF2基因的表达和生物学作用 被引量:1 2012年 目的明确胃癌差异基因表达谱中弱差异表达基因的敏感性和生物学意义;探讨胃癌弱差异表达基因TINF2在胃癌发生发展中的生物学作用和意义。方法利用GoMiner软件研究TINF2的生物学功能。并利用Real-Time PCR法以及Western blot法验证胃癌弱差异基因表达谱中TINF2基因的表达水平。结果弱差异表达基因TINF2定位于染色体端粒区,主要具有蛋白结合、端粒DNA结合活性,通过端粒酶调节端粒长度的功能;通过20对胃癌及配对的癌旁正常组织实验室验证,TINF2的mRNA及蛋白表达水平在胃癌组织中均表现为低表达(17/20,85%),差异具有显著性(P<0.001),与前期基因芯片中胃癌TINF2表达水平一致。结论 TINF2异常表达与胃癌的发生联系密切,并且可能在胃癌的发生发展中发挥重要的生物学作用。 孙伟 高芳 王晓龙 龙启福 王嵘 顾存林 沈国平 许博林 耿排力关键词:胃癌 基因表达谱 CD38在缺血/再灌注诱导的局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤及在炎症反应中的可能作用 2022年 目的探讨CD38在缺血/再灌注诱导的局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤及在炎症反应中的可能作用。方法建立SD大鼠局灶性脑缺血模型,给大鼠脑海马注射Ad-siCD38腺病毒,评估大鼠神经功能;用Elisa法检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平;用HE染色法观察大鼠脑海马组织形态学变化;用尼氏染色法观察大鼠神经元形态变化,用高尔基体染色法观察脑神经元及树突棘变化;用免疫组化法检测GFAP阳性细胞表达水平、RT-PCR和Western blot法检测大鼠脑组织中NF-kB、TNF-α、IL-1β、IL-6和CD38 mRNA及蛋白表达水平。结果与模型组比较,Ad-si CD38腺病毒干预能通过增加脑组织中尼氏小体、树突棘数量及神经元树突分支复杂性改善大鼠脑损伤情况,降低大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6含量,显著下调大鼠脑组织NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-6和CD38 mRNA及蛋白表达水平,并能减少大鼠脑组织中GFAP的阳性表达水平。结怡通过CD38基因下调调节炎症反应来延缓局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑损伤。 吴岳 刘皎如 顾存林 唐延军 赵洪乾 高如阳 吴穹关键词:局灶性脑缺血再灌注 CD38 RNA 主题式生物信息学教学理论和实践初索 2018年 生物信息学(Bioinformatics)是生命科学的研究中。我们本着教学和科研共促进的宗旨,融合分子生物学、医学统计学和计算机信息技术,充分结合网络环境,将理论授课和上机实践有机结合,通过课前问卷调查分析,依据调查结果制定教学方案并加以实施,然后进行课后分析,以完善医学生物信息学教学模式,为生物信息学在全校开展和生物信息学教学的进一步研究奠定了一定的基础。 安娟 刘芳 魏晓星 李耀东 顾存林关键词:生物信息学 教学研究 教学 医学生物化学实验教学改革的思考和探索 被引量:6 2010年 生物化学是医学相关专业的基础课程之一,搞好生物化学实验教学是学好本课程的关键环节,为了满足社会高素质人才的需求,对生物化学实验教学进行了探索和尝试,多种实验教学方式相结合能更好地适应新时期医学教育的要求和发展。 顾存林关键词:生物化学 实验教学 教学改革 胃癌弱差异基因表达谱建立的生物学意义 被引量:1 2013年 目的:明确用基因表达水平的贝叶斯分析(Bayesian analysis of gene expression levels,B A G E L)所建立的胃癌弱差异基因表达谱(fold change<1.5)的特异性及生物学意义.方法:Cluster3.0聚类分析基因DNA甲基转移酶3A[DNA(cytosine-5-)-methyltransferase3 a l p h a,D N M T3A]、发育分化增强因子2(development and differentiation-enhancing f a c t o r 2,D D E F2)、分化群59(c l u s t e r o f differentiation 59,CD59)的表达;机器学习和模式识别技术对弱差异基因表达谱(fold change<1.5,P<0.001)进行特征提取;GoMiner软件分析弱差异表达基因D N M T3A、DDEF2、CD59的生物学功能;RT-PCR在实验室验证弱差异表达基因DNMT3A、DDEF2、CD59在胃癌及癌旁配对组织中mRNA的表达水平.结果:从弱差异基因表达谱中得到能够识别样本类别的62个分类特征基因和4个分类能力较强的基因;GoMiner分析表明这组基因参与细胞黏附、细胞吞噬、免疫调节、基因甲基化、转录调控等重要生物学作用;RT-PCR确定基因表达变化与芯片中基因表达谱的数据一致,证实了弱差异基因表达谱的可靠性和灵敏性.结论:通过BAGEL分析得到的fold change<1.5的弱差异基因表达谱灵敏可靠,在肿瘤发生发展中关系密切. 孙伟 高芳 龙启福 王晓龙 朱德锐 顾存林 安娟 党国全 吴穹关键词:胃癌 基因表达谱 CD59 融合蛋白TOP_3原核表达载体的构建、表达及纯化研究 2009年 目的:利用HIV病毒TAT蛋白转导结构域、人缺氧诱导因子1α氧依赖降解结构域以及CASPASE3构建融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化。方法:分别构建原核表达质粒pET-28a(+)-TAT、pET-28a(+)-TAT-ODD、pET-28a(+)-TAT-ODD-CASPASE3(pET-28a(+)-TOP3);在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS内,利用镍-亚硝胺乙酸-组氨酸(Ni-NTA-His)亲和层析法对重组蛋白TOP3进行纯化。结果:成功构建了pET-28a(+)-TOP3的原核表达载体,经过优化表达和纯化条件,融合蛋白在IPTG诱导下获得特异性表达,纯化得到了高纯度的目的蛋白。结论:融合蛋白TOP3的成功表达及纯化,为该融合蛋白应用于肿瘤的治疗研究奠定了理论基础。 王嵘 刘芳 孙伟 龙启福 赵延礼 李耀东 顾存林