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陈劲频: 作品数：11 被引量：39H指数：4; 供职机构：江苏大学附属四院更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划江苏省社会发展科技计划江苏省科技厅社会发展基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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融合结构域MM蛋白在杆状病毒中的表达和细胞定位: 2007年; 目的将C-Myb的DNA结合域与MEF的AML1结合区组合成的MM融合基因在杆状病毒中进行表达和细胞定位。方法将氨基酸融合有绿色荧光蛋白的MM基因插入到杆状病毒转移载体中,通过重组质粒和亲本病毒AcPak6共转染昆虫Tn5细胞,获得重组病毒AcNPV-GFP-MM,并对该重组病毒在Tn5细胞中进行表达和定位观察。结果通过荧光显微镜观察,在病毒感染48h后的Tn5细胞中,可见表达产物大量集聚在细胞核内,Westernblot证明表达的融合蛋白在相对分子质量约60000处出现特异条带,与预计的蛋白理论值相符。结论由杆状病毒表达系统表达的MM蛋白比较稳定,能正确地趋向于核内。可以通过这种表达方式获得大量产物。; 陈劲频张尤历朱彦王文兵; 关键词：C-MYB MEF 杆状病毒细胞定位

不同地区幽门螺杆菌cagA基因羧基端可变区及其蛋白序列差异分析被引量：15: 2007年; 目的:比较不同地区H pylori cagA 3'端可变区序列差异及序列的地域特征,分析差异与疾病的相关性.方法:选择本实验室所收集的20例cagA+的PCR产物进行测序,并通过ExPASy-Translation软件推测其氨基酸序列,搜索并收集GenBank中已公布的不同地区3-6个H pyloricagA 3'端可变区序列及其氨基酸序列进行比较分析.结果:cagA蛋白的氨基酸序列可分为具有明显地域特征的东亚型和西方型两类;部分东亚型菌株表现出西方型变异.87.4%的菌株具有3个串联排列的EPIYA基序,8.2%的菌株具有4个或以上EPIYA基序.新发现1条具有区域特征的含有3个氨基酸的序列.cagA蛋白氨基酸序列中的EPIYA数目与临床结果没有相关性.结论:H pylori cagA基因及其cagA蛋白序列具有明显多态性,可以根据H pylori cagA 3'端可变区的主要序列差异进行地域分型,cagA 3'端可变区的EPIYA基序的数目与临床结果没有相关性.; 吴莺张尤历王文兵陈劲频沈琰; 关键词：幽门螺杆菌

幽门螺杆菌诱发胃十二指肠疾病相关的信号传导通路: 2006年; 陈劲频张尤历; 关键词：幽门螺杆菌信号传导通路胃十二指肠疾病相关分子生物学技术革兰氏阴性

胃镜下射频治疗疣状胃炎76例观察被引量：3: 2008年; 目的:观察胃镜下射频治疗疣状胃炎的效果。方法:胃镜常规检查发现疣状隆起改变时,在胃窦及疣体上取组织分别做尿素酶实验和病理检查,并同时对应给予制酸、胃粘膜保护剂和(或)抗幽门螺杆菌等治疗。3个月后复查胃镜,对隆起不消失的患者,胃镜下行射频治疗,术后常规给予质子泵抑制剂等治疗2周,追踪记录症状,6个月后复查胃镜。结果:疣状胃炎214例中3个月后行射频治疗76例,症状缓解率96.1%,半年后内镜复查隆起消失率100%,术中、术后无1例出现出血、穿孔等并发症。结论:胃镜下射频治疗疣状胃炎是一种安全有效的方法,对药物治疗无效的疣状胃炎,应用射频治疗能达到根治目的。; 谈小明朱向前陈劲频; 关键词：疣状胃炎

家蚕iap基因在原核表达系统中的表达被引量：4: 2007年; 为研究IAP蛋白抑制细胞凋亡的作用,用PCR法扩增出家蚕iap基因的cDNA,然后插入pET28a载体,得到阳性质粒pET28a-iap,并转化感受态细胞BL21,使用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导IAP蛋白的表达,应用SDS-PAGE和Western Blotting法分析目的蛋白,得到一条分子量约为38.8 kDa的特异表达条带,与表达产物的理论值相符。为进一步研究BmIAP蛋白的功能奠定了基础。; 李西波陈劲频吴岩王文兵; 关键词：家蚕凋亡原核表达

30K蛋白对家蚕细胞及幼虫存活的作用被引量：5: 2007年; 利用杆状病毒表达系统在家蚕BombyxmoriL.细胞BmN中表达家蚕30K蛋白,以亲本病毒BmPAK6为对照,将重组病毒Bm/r-30K分别感染BmN细胞及家蚕幼虫,观察其感染后不同时间的凋亡及存活率。与对照相比,重组病毒感染后的BmN细胞的存活率明显高于对照组,并且感染的家蚕幼虫存活时间也较长,表明体内过量表达家蚕30K蛋白有助于延长其细胞及幼虫的存活。; 唐平李兵沈卫德陈劲频王文兵; 关键词：家蚕杆状病毒

一种与细胞周期素A1互作的新基因的克隆和表达: 2006年; 目的:了解与细胞周期素A1互作的一个EST的组成结构和蛋白质细胞定位。方法:通过酵母双杂交试验获得了一个与细胞周期素A1互作的新EST,进一步获得了全长基因foca1,其读码框长度为666 bp,编码221个氨基酸。将该基因克隆进杆状病毒AcNPV及真核表达质粒pcDNA3中,分别进行了表达和定位。结果:获得了表达该基因的重组杆状病毒和融合了EGFP的真核表达质粒。蛋白印迹试验证明该基因在昆虫Tn5细胞中得到了表达;并发现该基因的产物在COS-7细胞中定向于细胞核内。结论:该蛋白与cyc lin A1(核蛋白)存在互作的可能性。此结果为深入研究foca1基因的功能打下了基础。; 张尤历陈劲频王文兵; 关键词：FOCAL 细胞周期素克隆杆状病毒

幽门螺杆菌对原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响被引量：1: 2007年; 目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)刺激胃癌细胞AGS后,对细胞内原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响。方法:分别将从不同种类(胃炎,溃疡及胃癌)患者分离到的H.pylori与AGS细胞共同培养1 h,用Western blot方法检测细胞内c-Fos和c-Jun基因表达的变化。结果:不同类型的菌株刺激细胞后,c-Fos和c-Jun蛋白的表达变化存在明显差异。溃疡类菌株只促进c-Fos表达的升高,胃炎类菌株只促进c-Jun表达的升高,而胃癌菌株刺激的细胞c-Fos和c-Jun表达均无明显升高。在不同类型菌株混合刺激下,即胃炎和溃疡菌株,及胃炎、溃疡和胃癌菌株3重混合,刺激后的细胞中c-Fos和c-Jun的表达量均升高。结论:不同H.pylori刺激ACTS细胞后原癌基因c-Fos和c-Jun的表达变化有差异,多类型菌株的混合刺激下c-Fos和c-Jun的表达量同时升高。提示多种类型菌株的复合刺激可能更易促进癌变的发生。; 陈劲频张尤历王文兵陈永昌印亦萍; 关键词：幽门螺杆菌原癌基因 C-FOS C-JUN

幽门螺杆菌对胃癌细胞RhoA表达和活性的影响被引量：2: 2007年; 目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对胃癌细胞中的RhoA的表达和活性的影响,探讨Hp与胃癌之间的相互关系。方法:Hp由人胃黏膜组织中分离,固体培养,收获后用超声波方法裂解Hp,以裂解液刺激胃癌细胞SGC-7901,用pull-down方法来获得细胞裂解液中的活性RhoA,用Western blot方法来检测细胞裂解蛋白中的活性RhoA的变化,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量法测定RhoA mRNA相对量。结果:用Hp裂解液刺激细胞10 min,总RhoA无明显变化,而活性RhoA升高。结论:Hp裂解液能增加胃癌细胞中活性RhoA的表达,呈剂量-效应关系,但总RhoA无明显变化,它可能是参与胃癌细胞的迁移。; 印亦萍张尤历陈永昌王文兵王瑛陈劲频吴莺; 关键词：幽门螺杆菌 RHOA

利用杆状病毒系统在昆虫细胞TN5中表达家蚕30K蛋白被引量：4: 2006年; 为研究30K蛋白抑制细胞凋亡的作用,利用RT-PCR从家蚕总RNA中扩增到30KC19基因,对其进行了序列分析并克隆到杆状病毒转座载体pFastBacHTb中,构建成重组转座载体pFastBacHTb-30KC19。利用杆状病毒(Bac-to-Bac)表达系统筛选重组杆状病毒,在昆虫细胞TN5中进行了表达和蛋白检测。结果表明30K蛋白在昆虫细胞中得到了高效表达。; 唐平王文兵李兵陈劲频沈卫德; 关键词：家蚕杆状病毒

陈劲频

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