闫静 作品数:16 被引量:123 H指数:7 供职机构: 首都医科大学附属北京儿童医院北京市儿科研究所 更多>> 发文基金: 北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目 中国国际公共关系协会项目 北京市中医管理局中医药科技项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
2003年北京地区流行的麻疹野病毒株的基因型分析 被引量:6 2006年 目的了解北京地区2003年流行的麻疹病毒的优势基因型。方法采集2003年北京地区暴发和散发麻疹临床病例咽喉拭子,使用WHO推荐的Vero/SLAM细胞进行麻疹病毒分离。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增麻疹病毒分离株的核蛋白(N)基因碳末端450个核苷酸。对扩增产物的核苷酸序列进行测定和分析,并与麻疹病毒基因库中参考株进行比较,参考株包括H1a基因型9株,H1b基因型2株,H1c基因型7株,H2基因型1株,A基因型3株。结果从北京的7个行政区县的麻疹患者的咽喉拭子中共分离到8株麻疹病毒,经对分离株的核蛋白(N)碳末端450个核苷酸进行序列测定和分析,并与国内基因库中的22个参考株进行基因亲缘性关系比较,该8株麻疹病毒均为H1a基因型。该8株病毒与H1a参考株Chin9322、H1b参考株Chin9475和H1c参考株Chin9427的平均遗传距离分别为0.004—0.011,0.026—0.031和0.015—0.022;而与H1a参考株中的Anhui01-1,Anhui02-2的平均遗传距离最近,为0.000—0.009。结论2003年北京地区流行的麻疹病毒的优势基因型为H1a基因型,与北京往年的本土流行株存在明显核苷酸差异,H基因型的H1b、H1c以及H2基因型在北京地区可能已经消失。 谢正德 姬奕昕 王艳 张燕 刘亚谊 张辉 刘春艳 王燕 闫静 买颖 申昆玲 许文波关键词:麻疹病毒 基因型 2005-2010年北京地区儿童原发性EBV感染流行株EBNA1与LMP1基因特征分析 2012年 目的分析2005-2010年北京地区儿童原发性EBV感染流行株EBNA1与LMP1基因特征,为研究EBV变异株与疾病临床表型间是否存在相关性提供背景资料。方法应用PCR方法扩增EBV的EBNA3C、EBNA1和LMP1基因片段,测序后应用BioEdit 7.0.9和Mega 4.0.2软件进行序列分析。结果62例进行了EBV分型,以EBV-Ⅰ型为主,检出率为98%。62例EBNA1基因扩增阳性,其中V—val亚型(均是Vvvl变异株)为98%。50例LMP1基因羧基段扩增阳性,以China1为主,其检出率为90%。Vvv1变异株和China1变异株在EBV—IM与EBV—HLH中的检出率差异均无统计学意义(P=1.00)。40例进行了多基因连锁分析,其中EBV—Ⅰ型、EBNA1-Vvv1变异株和LMP1-China1变异株高度连锁,其连锁检出率为90%。35例患儿LMP1基因全长扩增阳性,CG1-CG4的检出率分别为85%、6%、6%和3%。结论北京地区儿童原发性EBV感染疾病中,EBV亚型以EBV-Ⅰ型为主,Vvv1变异株和China1变异株分别是EBNA1和LMP1变异株中的优势变异株,且二者高度连锁。儿童原发性EBV感染流行株可以分为CG1-4组,其中以CG1为主。 艾军红 谢正德 刘春艳 高立伟 闫静关键词:膜蛋白质类 婴儿胆汁淤积性肝病综合征119例人巨细胞病毒检测的意义 被引量:4 2009年 目的探讨人巨细胞病毒感染(CMV)与婴儿胆汁淤积性肝病综合征的关系,以及血清学和分子生物学方法在诊断CMV感染中的作用。方法婴儿胆汁淤积性肝病综合征住院患儿119例。男71例,女48例;年龄1~7个月,平均2个月。分别在入院时采集急性期和出院时采集恢复期血清进行抗人CMV-IgM抗体和人CMV DNA检测。血清中抗人CMV-IgM抗体检测应用间接ELISA法;应用实时荧光定量PCR检测方法检测血清中人CMVDNA拷贝数。结果婴儿胆汁淤积性肝病综合征患儿119例中,人CMV感染63例,阳性率为52.9%(63/119例)。CMV感染阳性病例中,血清学方法共诊断52例,其中单份急性期血清抗人CMV-IgM抗体检测阳性47例;双份血清抗人CMV-IgM抗体由阴性转为阳性5例;通过荧光定量PCR检测诊断CMV感染11例(血清抗人CMV-IgM抗体检测阴性,血清CMVDNA检测阳性),占CMV感染病例的17.5%(11/63例)。119例患儿中,27例入院时荧光定量PCR检测CMVDNA阳性,其中16例患儿同时抗人CMV-IgM抗体检测阳性、11例血清抗人CMV-IgM抗体检测阴性;出院时15例患儿检测CMVDNA均为阴性。CMVDNA阳性患儿血清中CMVDNA平均拷贝数为1.96×106(6.15×105~8.76×106)拷贝/L。结论婴儿胆汁淤积性肝病中CMV感染较为常见,病毒感染诊断的确立要充分考虑血清学和分子生物学方法各自的局限性,二者可互为补充。 王燕 闫慧敏 张辉 么远 胡燕 闫静 谢正德关键词:人巨细胞病毒 婴儿 91例EB病毒相关疾病儿童血浆EB病毒DNA的检测 被引量:10 2009年 目的了解EB病毒(EBV)感染患儿外周血血浆中游离EBVDNA的拷贝数,确定EBV原发感染后外周血血浆中EBV游离DNA的拷贝数与发病天数及病情轻重的关系。方法应用荧光定量PCR方法,测定73例EBV原发感染和18例EBV相关重症疾病患儿外周血血浆中EBV游离DNA。结果①原发EBV感染患儿外周血血浆中EBV游离DNA随发病天数呈下降趋势,发病2周后很难检测到。②EBV相关重症疾病组患儿外周血血浆中EBV游离DNA阳性率明显高于原发EBV感染组,差异有显著性(89%vs16%,P<0.05)。结论原发EBV感染后随病程天数的增加,病毒复制水平逐渐下降。血浆中EBV游离DNA检测对评价EBV相关疾病的严重程度有一定参考价值。 段红梅 姚瑶 谢正德 闫静 胡英慧 幺远 周玲 申昆玲关键词:EB病毒 慢性活动性EB病毒感染 噬血细胞性淋巴组织细胞增生症 传染性单核细胞增多症 儿童 麻疹的实验室诊断和鉴别诊断 被引量:5 2006年 目的了解单份血清标本检测麻疹-IgM抗体在麻疹的实验室诊断中的作用和意义。方法研究对象为该院2005年1~6月间门诊诊断的疑似麻疹病例共705例,男390例,女315例,其中<8 m o 298例,8 m o^3 y 210例,3~6 y 115例,>6 y 82例。采用酶联免疫吸附方法(enzym e linked imm unosorben t assay,EL ISA)检测血清中的抗麻疹病毒特异性IgM抗体。对抗麻疹病毒特异性IgM抗体阴性的标本,同时检测抗风疹病毒、人类疱疹病毒6型、柯萨奇病毒和埃克病毒特异性IgM抗体。结果705例疑似麻疹病人中,抗麻疹病毒IgM抗体阳性547例(阳性率77.6%,547/705),其中<8 m o248例(45.4%,248/547),8 m o^3 y143例(26.1%,143/547),3~6 y 93例(17.0%,93/547),>6 y 63例(11.5%,63/547);麻疹-IgM阴性共158例,占总病例数的22.4%(158/705)。该158例麻疹可疑病例中,45.6%(72/158)的病例通过检测风疹病毒、柯萨奇病毒、艾柯病毒、人类疱疹病毒6型-IgM而确诊。结论6 y以下儿童为麻疹的高发人群,其中8 m o以下婴儿患病率最高,提示母传抗体的保护作用不足。单份血清在麻疹实验室确诊中存在缺陷,对于麻疹IgM阴性的临床麻疹疑似病例,不能除外麻疹,应查恢复期血清以明确诊断;另外临床麻疹疑似病例需要与风疹、肠道病毒感染和人类疱疹病毒6型等其它病毒感染所致的发热出疹性疾病相鉴别。 刘亚谊 闫静 王燕 张辉 买颖 刘春艳 谢正德关键词:麻疹 抗体检测 儿童EB病毒相关性噬血淋巴组织细胞增生症的病毒学特征 被引量:6 2005年 目的了解儿童EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)相关性嗜血淋巴组织细胞增生症(EBV-associated hemophagocyticlymphohistiocytosis,EBV-HLH)的血清学EB病毒抗体和病毒复制水平等病毒学特征。方法对26例嗜血淋巴组织细胞增生症(HLH)和23例原发性EBV感染所致的传染性单核细胞增多症(EBV-associated,infectious mononucleosis,EBV-IM),用荧光定量PCR检测患者血清中EBV-DNA拷贝数,同时用间接免疫荧光法检测4项EBV抗体,包括:抗EBV衣壳抗原(capsid antigen,CA)IgG(EBV-CA-IgG)抗体、抗EBV衣壳抗原IgM(EBV-CA-IgM)抗体、抗EBV早期抗原(early antigen,EA)IgG(EBV-EA-IgG)抗体、抗EBV核抗原(nuclear antigen,NA)IgG(EBV-NA-IgG)抗体。结果7例HLH患者血清中EBV-DNA检测阳性,被诊断为EBV-HLH。EBV-HLH患者血清中EBV-DNA拷贝数均值为(4.586±0.107)×107/mL。从4项EBV抗体结果分析,原发感染3例(抗EBV-NA-IgG抗体阴性),既往感染或再激活4例(抗EBV-NA-IgG抗体阳性)。7例EBV-HLH患者中有3例EBV-CA-IgM阳性。23例EBV-IM患者血清中EBV-DNA检测均阳性,拷贝数均值为(6.865±0.305)×103/mL。EBV-HLH患者血清中EBV-DNA拷贝数显著高于EBV-IM患者血清中EBV-DNA拷贝数,二者比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论EBV-HLH可以发生在EBV感染的不同时期,EBV-HLH患者血清中EBV-DNA拷贝数显著高于IM患者,外周血中EBV-DNA荧光定量PCR检测在EBV-HLH的病因诊断中比血清学抗体检测更具价值。 谢正德 段红梅 张辉 闫静 刘亚谊 申昆玲关键词:传染性单核细胞增多症 EB病毒 荧光定量PCR 儿童SARS临床特征和远期随访观察 被引量:7 2006年 目的 了解北京地区儿童严重急性呼吸道综合征(SARS)病例的临床特征和远期随访结果.方法 截止2003-07-10,首都医科大学附属北京儿童医院SARS医疗小组收治的以及北京市卫生局科教处提供的北京地区儿童SARS病例共38例,根据卫生部SARS信息系统提供的临床信息总结分析儿童SARS病例的临床特征,在患儿出院后1年半左右,对38例患儿进行随访研究,随访的内容包括:(1)血压测量;(2)血常规检测;(3)肝肾功能检测;(4)肺:所有患儿进行X线胸片和肺功能检测,若二者之一有异常,则进一步进行高分辨CT检测;(5)股骨头X片;(6)心电图和心脏B超;(7)T细胞亚群检测;(8)患儿行为和主观生活质量评估,包括儿少主观生活质量和儿童行为量表;(9)血清冠状病毒特异性IgG抗体检测.结果 38例儿童SARS临床表现中,发热率为100%,咳嗽30例(78.9%),咳痰25例(65.8%),气促3例(7.9%),全身中毒症状中,乏力、肌肉关节酸痛和头痛的发生率分别是36.4%、7.9%和18.4%.从实验室检测看,38例儿童SARS中,外周血白细胞<4.0×109/L者8例(21.1%),(4.4~10.0)×109/L者25例(65.8%),>10.0×109/L者5例(13.2%).血小板减少2例(5.26%).部分病例肝肾功能和心肌酶轻度异常.共有16例儿童SARS病例家长按期完成随访研究.16病例中,血清抗SARS-CoV-IgG阳性和阴性各8例.血清抗SARS-CoV-IgG阴性和阳性病例的临床特征症状差异无显著性意义.患儿的心肝肾功能、股骨头X片、T细胞亚类均正常,无高血压病例.3例患儿肺功能检查均示轻度异常,表现为FEF50-75轻度减低,R20轻度升高,其中1例行高分辨CT检查,结果正常.共有8例8岁以上患儿进行了儿童行为调查和儿少主观生活质量评估,未见明显的心理和行为障碍存在.结论 SARS在儿童并不是一个严重的疾病,其临床表现轻、预后好,远期没有严重的并发症.但其原因还需要进一� 谢正德 魏新苗 胡英慧 王惠玲 刘春艳 刘亚谊 张辉 王燕 孔晓慧 闫静 买颖 申昆玲关键词:严重急性呼吸道综合征 儿童 并发症 抗体亲合力检测对诊断儿童EBV相关性传染性单核细胞增多症的意义 被引量:18 2005年 目的评估抗EBV衣壳抗原IgG抗体亲合力检测在儿童EBV相关性传染性单核细胞增多症(infectiousmononucleosis,IM)诊断中的意义。方法检测了58例儿童IM患者病程2周内血清中4种抗EBV抗体,包括抗EBV衣壳抗原(CA)IgG抗体、抗EBV-CA-IgM抗体、抗EBV早期抗原(EA)IgG抗体、抗EBV核抗原(NA)IgG抗体和抗EBV-CA-IgG亲合力。结果58例IM患者血清中抗EBV-CA-IgG、抗EBV-CA-IgM、抗EBV-EA-IgG、抗EBV-NA-IgG的检出率分别为100%、81.0%、72.4%、3.5%;诊断EBV相关性IM56例;在病程2周内,100%的EBV相关性IM患者血清中抗EBV-CA-IgG为低亲合力抗体;84%的EBV相关性IM患者血清中抗EBV-CA-IgM阳性。结论单纯依靠抗EBV-CA-IgM阳性诊断EBV相关性IM敏感性偏低,结合EBV抗体谱和抗EBV-CA-IgG亲合力检测可提高诊断的敏感性。 谢正德 刘亚谊 张辉 闫静 申昆玲关键词:EB病毒 传染性单核细胞增多症 IGM抗体 淤积型婴儿肝病综合征的病毒病原检测分析(附78例报告) 被引量:2 2009年 目的探讨病毒感染与淤积型婴儿肝病综合征的关系。方法收集2007年3~12月在我院住院的78例淤积型婴儿肝病综合征患儿急性期和恢复期血清,进行病原学检测。采用间接ELISA法定量检测血清中巨细胞病毒(CMV)、EB病毒、单纯疱疹病毒和肠道病毒特异性IgM,荧光定量PCR法检测患者血清中CMV-DNA拷贝数,微粒子免疫发光法检测血清中乙肝病毒和丙肝病毒抗原和抗体,间接免疫荧光法检测血清中人类疱疹病毒6型(HHV-6)特异性IgM。结果78例中50例病毒病原检测阳性,阳性率为64.1%,其中人巨细胞病毒42例,阳性率为53.8%;人类疱疹病毒6型8例,阳性率为10.3%。血清中特异性EB病毒、单纯疱疹病毒、肠道病毒IgM抗体检测均阴性,乙肝病毒表面抗原和E抗原均阴性。有17例患儿进行了丙肝病毒检测,均阴性。结论CMV可能是淤积型婴儿肝病综合征的主要感染病原,HHV-6也可能与部分淤积型婴儿肝病综合征的发生相关。病毒感染诊断的确立要充分考虑血清学和分子生物学方法的意义和临床应用。 吕典一 谢正德 王燕 闫慧敏 张辉 幺远 胡燕 闫静关键词:婴儿 人巨细胞病毒 人类疱疹病毒6型 严重急性呼吸综合征患儿血清抗严重急性呼吸综合征相关冠状病毒免疫球蛋白G远期随访 被引量:1 2006年 目的远期随访严重急性呼吸综合征(SARS)患儿血清中特异性抗SARS相关冠状病毒(CoV)IgG(SARS-CoV-IgG)抗体,并探讨其临床意义。方法儿童SARS临床诊断病例16例和患儿的父母及与其密切接触家庭成员(其中包括7例SARS临床诊断病例、12例非SARS病例)19例。在SARS患儿病程1.5年左右,进行随访。采集患儿及其密切接触家庭成员外周静脉血2 mL,常规分离血清。应用间接免疫荧光法(IFA)检测受试者血清中抗SARS-CoV-IgG抗体。结果16例儿童SARS病例中,8例血清中抗SARS-CoV-IgG阳性,其中4例SARS患病期间抗SARS-CoV-IgM阳性,4例未查抗SARS-CoV-IgM抗体。另8例血清中抗SARS-CoV-IgG阴性,其中4例SARS患病期间抗SARS-CoV-IgM阴性,4例未查抗SARS-CoV-IgM抗体。8例血清中抗SARS-CoV-IgG阳性的SARS患儿的8个家庭中均有2例及2例以上SARS患者。8例血清中抗SARS-CoV-IgG阴性的儿童SARS病例的8个家庭中均只有患儿本人为SARS患者。结论在病程1.5年后,实验室确诊的儿童SARS病例的血清中仍能检测到抗SARS-CoV-IgG抗体。家庭聚集发病是实验室确诊的SARS病例的一个重要特征。 谢正德 魏新苗 胡英惠 王惠玲 刘亚谊 刘春艳 张辉 王燕 闫静 孔晓慧 买颖 申昆玲关键词:严重急性呼吸综合征 儿童 免疫球蛋白G