金坚
- 作品数：226 被引量：900H指数：16
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- HBeAg时间分辨荧光免疫分析被引量：5
- 2001年
- 黄飚肖华龙朱利国谭成蔡刚明金坚
- 关键词：HBEAG时间分辨荧光免疫分析乙型肝炎表面抗原
- 产HSA-CP融合蛋白毕赤酵母的发酵条件优化被引量：4
- 2009年
- 为提高重组毕赤酵母生产人血清白蛋白-C肽融合蛋白(HSA-CP)的产量和生产强度,在摇瓶条件下考察了甲醇诱导时间和浓度对目的蛋白产量的影响。结果表明,质量浓度10 g/L的甲醇诱导72 h最适于产物表达。通过对7L发酵罐中各因素的优化,得到最佳条件为:初始甘油质量浓度10 g/L,30℃培养,菌体生长期和诱导期的pH及溶氧分别控制在pH5.0、30%溶解O2或pH6.0、15%的溶解O2。10 g/L的甲醇诱导72 h,最终使干细胞质量浓度达到56.43 g/L,目的蛋白产量达368.45 mg/L。生产强度为3.920 mg/(L.h),目标蛋白的比生产速率为5.12 mg/(L.h)。
- 孔静静王长城杨海麟张玲周利苹金坚王武
- 关键词：巴斯德毕赤酵母发酵优化
- 一种脱氧雪腐镰刀烯醇的光激化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法
- 一种脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)的光激化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法，属于光激化学发光免疫分析LICLIA技术领域。包被有DON-BSA的发光微粒加入微孔板，顺序加入DON标准或样品、兔抗DON抗体、生物素化羊抗兔抗体...
- 黄飚高雷赵卫国金坚张艺
- 文献传递
- 酸性铁蛋白与肝癌临床关系的研究被引量：7
- 1994年
- 测定了肝癌、肝硬化、迁延性乙型肝炎和急性肝炎患者血清酸性铁蛋白含量，其肝癌诊断的阳性率为７５．９０％，基本不受非癌性肝损伤的影响．与ＡＦＰ联合检测，肝癌诊断的阳性率可达９０．０７％，部分弥补了ＡＦＰ阴性肝癌的诊断．
- 张满达金坚唐晓雷张志斌王博诚
- 关键词：肝肿瘤甲胎蛋白放射免疫测定
- 水蛭素对凝血过程中凝血酶活化的纤溶抑制物的影响被引量：2
- 2006年
- 凝血酶活化的纤溶抑制物（TAFI）是一种最近被证实的血浆中的纤溶抑制物，在凝血和纤溶方面具有重要的作用。van Tilburg等的研究显示，TAFI升高可使静脉血栓的危险性轻度增加。Hori等发现2型糖尿病患者TAFI血浆浓度和活性显著高于健康对照组，肥胖患者TAFI浓度和活性显著高于非肥胖的糖尿病患者和非肥胖的健康个体。
- 黎明张荣军曹国宪孙钧铭金坚
- 关键词：纤溶抑制物凝血过程水蛭素TAFI血浆浓度肥胖患者
- ^(99)Tc^m-重组水蛭素的制备及血栓动物模型显像研究
- 1999年
- 采用亚氨基噻吩盐酸盐修饰法制备９９ Ｔｃｍ 重组水蛭素（９９ Ｔｃｍ ｒ Ｈ），并进行小鼠体内分布及兔股动、静脉血栓模型显像分析。结果表明：９９ Ｔｃｍ ｒ Ｈ 的标记率为 ９０８％ ， Ｐ Ｄ１０ 过柱前后放化纯度分别为８８８％ 和９３９％ ，比活度为 ３２９２ Ｇ Ｂｑ／ｇ；，在小鼠心、脑、肝、脾、肺摄取低，肾浓聚高，１５ ｍ ｉｎ达到（６４７２±５．０４）％ Ｉ Ｄ，血清除迅速；兔股动、静脉血栓于 １ ｈ 可清晰显影， Ｔ／ Ｂ 分别为 ２２４ 和１９５。
- 万卫星张荣军季顺东谭成孙瑞辉王博诚韩玉珉金坚
- 关键词：重组水蛭素凝血酶显像血栓
- 改良毕赤酵母分泌表达外源蛋白能力的研究进展被引量：14
- 2011年
- 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)由于能高效表达正确折叠加工的外源蛋白而成为目前最具应用前景的表达宿主。但随着对大量不同外源蛋白在毕赤酵母中分泌表达的研究发现,并不是所有蛋白均能高效分泌表达,这严重限制了毕赤酵母这一表达系统的推广应用。相关研究发现,外源蛋白在内质网中的聚集是限制酵母分泌表达外源蛋白的主要因素,因此近年来开始尝试通过基因操作改良毕赤酵母表达外源蛋白的能力。本文综述了这一领域的研究进展。
- 关波金坚李华钟
- 关键词：巴斯德毕赤酵母外源蛋白分泌表达
- 重组人血管抑素的表达、复性优化及活性研究被引量：1
- 2006年
- 目的探索一种实效、经济的血管抑素制备工艺。方法对基因工程菌(E.coli,M15/pQE/AS)的IPTG诱导条件及包涵体复性纯化条件进行优化,产物以SDS-PAGE鉴定纯度,在人微血管内皮细胞模型及鸡胚尿囊膜模型上鉴定其生物学活性。结果经优化后重组人血管抑素的表达量约达菌体蛋白的30%,纯化的重组人血管抑素可显著抑制人微血管内皮细胞的增殖,最高抑制可达47%,并可显著抑制鸡胚尿囊膜模型上血管的生成。结论该表达、复性工艺简单,高效可行。
- 陶永辉赵砚婷张莲芬蔡刚明金坚
- 关键词：血管抑素包涵体鸡胚尿囊膜
- 撞击器法测定吸入粉雾剂空气动力学粒径分布颗粒反弹的研究被引量：1
- 2017年
- 目的对撞击器(cascade impactor,CI)法检测吸入粉雾剂空气动力学粒径分布(aerodynamic particle size distributions,APSDs)时颗粒反弹和二次夹带进行研究,为涂层材料的选择提供方法。方法用甘油、硅油分别对收集杯/盘进行涂层或不涂层处理后,分别在30~90 L·min^(-1)流速下,按照《美国药典》601项下规定进行样品收集并分析检测结果。结果对收集杯/盘进行涂层处理能明显减少滤膜沉积率;用硅油涂层后,相同流速下质量平均空气动力学粒径(mass median aerodynamic diameter,MMAD)不随收集剂量的变化而变化,APSDs也较稳定。结论使用撞击器法检测吸入粉雾剂APSDs时,对收集表面进行涂层很大程度上能够消除颗粒反弹和二次夹带;新一代碰撞取样器(next generation impactor,NGI)检测格隆溴铵吸入粉雾剂APSDs时,用硅油对收集杯进行涂层,可使检测结果更准确。
- 卢嘉彤金坚
- 关键词：涂层吸入粉雾剂
- 内部核糖体进入位点(IRES)调控细胞血清饥饿应激条件下PRDM13的翻译
- 2016年
- PRDM13是锌指蛋白转录抑制因子（positive regulatory domain zinc finger protein,PRDM）家族中的一员,其在细胞分化、肿瘤的发生和恶性转化中起着重要的作用。而对于PRDM13基因侧翼序列是否含有内部核糖体进入位点（internal ribosome entry site,IRES）及其功能所知甚少。本研究对PRDM13 5＇端的非翻译区（5＇UTR）进行IRES结构与功能分析,探索其在细胞血清饥饿应激条件下对PRDM13翻译的影响。实验发现,在血清饥饿的条件下,肝癌细胞Bel7402/WT中PRDM13的蛋白质水平增加,但是其mRNA水平基本没有变化。将PRDM13 5＇UTR的序列插入双顺反子的报告载体（pRL-FL）中,并且将构建的载体（pRL-PRDM13-FL）转染进细胞中,结果显示,PRDM13 5＇UTR含有IRES,且发现PRDM13 5＇UTR中的105 nt（53~157）对其IRES的功能至关重要。在帽依赖的翻译（cap-dependent translation）机制被抑制时,IRES这种机制可有效维持PRDM13蛋白合成。本研究提供了在细胞压力条件下调节PRDM13蛋白合成的一种新的解释。
- 马文囡丁鹏鹏陶义芬陈蕴朱瑞宇金坚
- 关键词：内部核糖体进入位点翻译
