郭元红
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金:重庆市自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- Runx3基因对HepG2细胞顺铂耐药性的影响被引量:2
- 2012年
- 目的探讨Runx3基因对HepG2细胞耐药性的影响及可能机制。方法取在1.6μg/ml顺铂(CDDP)下生长良好的HepG2耐药细胞(HepG2/CDDP-1.6),建立耐药HepG2/CDDP的动态变化模型HepG2/CDDP/2.0,并予以甲基转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理;将Runx3-shRNA表达载体转染HepG2/CDDP-1.6细胞,RT-PCR检测处理及转染前后细胞Runx3 mRNA的表达。MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪分析细胞周期,Hoechst 33258检测凋亡,Western blot检测P-gp表达的变化。结果在动态变化模型中随CDDP诱导时间的延长,Runx3 mRNA的表达逐渐降低。5-Aza-CdR处理后Runx3 mRNA的表达增加,细胞生长受到明显抑制,S期细胞逐渐增加,凋亡细胞明显增多,细胞内P-gp的表达减少。转染Runx3-shRNA载体后HepG2/CDDP-1.6细胞对CDDP的耐受性增强,G1期细胞增加,P-gp的表达增加。结论 Runx3基因的表达可抑制HepG2/CDDP耐药的形成,提高HepG2/CDDP细胞对化疗药物的敏感性。
- 郭元红陈伟庆房殿亮
- 关键词:RUNX3耐药DNA甲基化RNA干扰
- Runx3-shRNA表达载体的构建及其干扰作用的检测
- 2012年
- 目的构建Runx3基因shRNA重组表达质粒,并检测其干扰作用。方法人工合成靶向Runx3基因的shRNA序列,克隆至pGenesil-1.1表达载体上,构建重组表达质粒Runx3-shRNA,转染人耐药肝癌HepG2细胞;采用半定量RT-PCR及Western blot法检测重组表达质粒对HepG2细胞中Runx3基因的转录和表达水平的影响。结果重组表达质粒Runx3-shRNA经酶切及测序证明构建正确;其转染人耐药肝癌HepG2细胞后,细胞Runx3基因的转录和蛋白表达水平均明显降低,与空白对照组和阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论已成功构建了Runx3-shRNA表达质粒,为进一步研究Runx3基因在肿瘤耐药细胞中的作用奠定了基础。
- 郭元红陈伟庆房殿亮
- 关键词:RUNX3基因RNA干扰
- Runx3基因对HepG2细胞耐药性的影响及可能机制
- 目的:探讨Runx3基因对HepG2细胞耐药性的影响及可能机制。 方法:HepG2顺铂耐药细胞(HepG2/CDDP-1.6),用Runx3-shRNA表达载体(pRunx3-shRNA)转染HepG2/CDDP-1....
- 郭元红
- 关键词:RUNX3基因耐药性DNA甲基化细胞周期
- 文献传递