郝建忠
- 作品数：18 被引量：18H指数：2
- 供职机构：潍坊医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金潍坊市科技局资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人牙成釉细胞相关蛋白启动子的克隆和转录活性分析被引量：1
- 2010年
- 目的:构建人牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast-asssociated protein,ODAM)基因不同长度的上游启动子荧光素酶报告基因载体,比较不同的启动子片段在成釉细胞、Hela细胞中的活性,为进一步判定上游启动子的转录调控区奠定基础。方法:以PCR方法获取基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中,瞬时转染成釉细胞及Hela细胞,通过检测荧光素酶活性来分析启动子区域的转录调控能力。结果:成功地获得了不同长度的ODAM基因启动子目的片段,酶切鉴定表明不同长度启动子荧光素酶报告基因载体构建成功,不同长度的启动子在不同的细胞中活性不同,-333～-195与-195～-96区域为特异的转录调控作用区。结论:初步确定了ODAM基因启动子的转录活性区,为进一步研究该基因转录调控特点奠定基础。
- 韩婷婷刘晓影郝建忠高玉光
- 关键词：启动子成釉细胞
- 转录因子c-fos/c-jun调控成釉细胞基质金属蛋白酶20基因的表达
- 2015年
- 背景:基质金属蛋白酶20是在成釉细胞中特异性表达的一种蛋白酶,其在牙齿釉质发育过程中具有重要作用。从分子角度研究基质金属蛋白酶20可受到的调控机制,为进一步做动物实验奠定基础。目的:通过研究转录因子c-fos/c-jun对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶20基因的调控作用,初步确定c-fos/c-jun在牙釉质发育中的作用。方法:首先构建c-fos真核表达载体重组质粒,分别利用双荧光素酶基因检测报告系统和定时定量RT-PCR法分析c-jun、c-fos转染成釉细胞对基质金属蛋白酶20基因活性的影响;并利用基因定点突变和双荧光素酶基因检测报告系统进一步分析c-jun、c-fos对基质金属蛋白酶20基因活性的影响。结果与结论:双荧光素酶基因检测报告系统和定时定量RT-PCR法分析显示c-jun、c-fos转染转染小鼠成釉细胞后,基质金属蛋白酶20基因表达显著上调;突变基质金属蛋白酶20启动子的AP1结合位点后,c-fos/c-jun失去上调基质金属蛋白酶20启动子的转录活性的作用。结果提示c-fos/c-jun对基质金属蛋白酶20基因表达具有重要的调节作用,表明其在釉质发育过程中有其重要的生物学意义。
- 唐培娟王长磊宫春梅唐培倩郝建忠
- 关键词：骨组织工程实时定量RT-PCR
- 富血小板血浆在自体骨修复山羊颅骨缺损中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的 观察富血小板血浆（PRP）在自体骨修复山羊颅骨缺损中的作用,验证自体骨与富血小板血浆混合物的修复效果.方法 制作山羊颅骨缺损模型,设空白对照组,分别用自体骨渣、自体骨渣与富血小板血浆混合物修复颅骨缺损,12周后行病理学检查,16周后行生物力学检查.结果 颅骨修复后12周的标本组织学检查示实验组成骨较对照组有明显增加.自体骨/PRP组缺损完全修复.生物力学测试最大载荷、最大负荷对应挠度实验组与对照组无显著差异.自身最大载荷比有显著性差异（P=0.015）.结论 PRP对骨形成有促进作用,PRP/自体骨渣混合物是一种优良的骨缺损修复材料.
- 卢小生吴正华郝建忠季中蕾刘媛媛杨玉昌
- 关键词：富血小板血浆自体骨颅骨缺损生物力学
- TGF-β1调控成釉细胞ODAM基因表达的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨TGF-β1对ODAM基因表达的作用。方法:通过实时定量RT-PCR法观察TGF-β1对成釉细胞ODAM基因表达的影响;利用c-jun小RNA干扰(siRNA)技术,阻断转录因子c-jun基因表达,观察c-jun基因沉默对TGF-β1诱导ODAM基因表达的影响;利用双荧光素酶基因报告系统研究成釉细胞中TGF-β1对ODAM启动子转录活性的调控作用。结果:TGF-β1刺激成釉细胞后,ODAM基因表达显著增强;利用小RNA干扰技术使c-jun基因沉默,实时定量RT-PCR法研究显示,TGF-β1调控ODAM基因表达的作用减弱。将pGL3-ODAM转染成釉细胞后,用TGF-β1刺激成釉细胞一定时间,ODAM启动子的转录活性增强。c-jun基因沉默抑制了TGF-β1对ODAM启动子的激活作用。结论:在釉质发育过程中,TGF-β1通过转录因子c-jun调控成釉细胞ODAM基因表达。
- 郝建忠孙学玲何永云梁广智刘晓影孙岩高玉光
- 转录因子Runx2调控前成骨细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达被引量：2
- 2015年
- 背景:细胞外基质磷酸化糖蛋白基因在骨的矿化和吸收、成骨细胞与破骨细胞的平衡中起重要的作用,研究细胞外基质磷酸化糖蛋白的功能及其调控机制可为骨质疏松症的治疗提供新的思路。目的:分析转录因子Runx2在小鼠前成骨细胞中对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的调控作用,进而初步研究转录因子Runx2在骨形成发育过程中的作用。方法:首先根据Genbank中Runx2的基因序列构建Runx2真核表达载体;然后利用双荧光素酶基因检测报告系统分析Runx2对不同长度的细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响,以确定Runx2有明显作用的启动子区段,分析3种MAPK信号通路抑制剂调控Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响;最后利用定时定量RT-PCR法分析Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子表达活性的影响。结果与结论:成功构建Runx2真核表达载体;双荧光素酶基因检测报告系统分析显示Runx2能够上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子在前成骨细胞中的转录活性,在(-300-+66)366 bp片段区域内上调效果较为显著,Runx2可通过激活MEK激酶MAPK通路上调细胞外基质磷酸化糖蛋白启动子活性;定时定量RT-PCR法检测再次验证Runx2上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达水平。提示转录因子Runx2可以通过MEK激酶MAPK信号通路对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因表达进行调节,为探讨细胞外基质磷酸化糖蛋白在骨形成发育过程中的意义奠定基础。
- 孙玉娇宫春梅郝建忠孙岩刘晓影
- 关键词：骨细胞RUNX2
- 釉成熟蛋白真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:构建釉成熟蛋白真核表达载体pcDNA3.1-Amelotin,并观察其在293T细胞中的表达情况。方法:以出生后6 d的昆明小鼠下颌磨牙中提取的总RNA为模板,设计合成特异性引物,通过RT-PCR法扩增小鼠的釉成熟蛋白[Amelotin(GeneID:71421)],包括编码区全长在内的部分cDNA序列,克隆到pMD18-T克隆载体,酶切鉴定正确;然后亚克隆至pcDNA3.1真核表达载体中,双酶切鉴定及测序正确。将构建的重组载体磷酸钙法转染293T细胞,检测Amelotin的表达情况。结果:成功克隆了Amelotin基因编码区全长序列;构建出重组真核表达载体pcDNA3.1-Amelotin,磷酸钙法转染后可检测到Amelotin基因在293T细胞中的表达。结论:构建了重组pcDNA3.1-Amelotin真核表达载体,并成功表达,为进一步研究该蛋白的生物学活性奠定了基础。
- 魏亚红郝建忠孙岩高玉光官秀梅
- 口腔颌面部损伤的临床治疗疗效初步观察
- 2018年
- 目的探讨口腔颌面部损伤患者的临床治疗效果。方法采用回顾性方法对我院88例口腔颌面部损伤患者进行研究,在分析以往病例的基础上,分析其临床疗效。结果 88例患者治疗后都取得了成功,没有死亡人数,手术完成后1例患者出现感染,张口困难人数为2例,神经损伤患者为1例,咬合对位欠佳患者为1例,不良反应总发生率为5.68%。结论针对不同患者的具体病情,采用对症治疗措施可帮助患者更好的康复,减少感染、神经损伤等并发症的产生,值得在临床实践中进一步推广。
- 于天资郝建忠唐琳琳李哲陈剑飞
- 关键词：口腔颌面部损伤疗效
- 全瓷嵌体修复后牙牙体缺损166例疗效分析被引量：3
- 2018年
- 目的对166例后牙牙体缺损患者进行全瓷嵌体修复,分析其临床治疗效果。方法对我院332例全瓷嵌体修复后牙牙体缺损患者进行研究,根据治疗方法不同将其分为研究组和常规组,各166例,分别对其实施全瓷嵌体修复和复合树脂嵌体,观察两组修复情况。结果研究组修复成功率为96.39%,明显高于常规组的75.30%,研究组咀嚼能力为98.80%,美观度为100%,食物阻塞为96.99%,明显高于常规组的81.32%、84.34%、80.12%,两组相比,有统计学意义(P<0.05)。结论和复合树脂嵌体相比,全瓷嵌体修复效果更好,满意度更高,值得推广。
- 李哲王霞于天资李学谦王珂郝建忠
- 关键词：全瓷嵌体后牙牙体缺损疗效
- CGRP影响人牙髓干细胞增殖分化的研究
- 2017年
- 目的研究降钙素基因相关肽(CGRP)对人牙髓干细胞增殖分化的调控作用,并初步探讨CGRP的调控信号通路。方法首先获取健康的牙髓,体外培养并筛选牙髓干细胞;采用MTT法检测不同浓度的CGRP对牙髓干细胞的增殖作用,获取适宜的作用浓度;利用茜素红染色法观察CGRP作用下牙髓干细胞形成矿化结节的效果;在实时定量RT-PCR法及免疫印迹法检测CGRP作用下牙髓干细胞中Ⅰ型胶原(Col-1)、转录因子Runx2的mRNA和蛋白表达水平;最后利用实时定量RT-PCR法检测MAPK信号通路抑制剂作用下CGRP对牙髓干细胞中Ⅰ型胶原、Runx2 mRNA表达水平的影响。结果经过筛选培养获得生长稳定的牙髓干细胞;MTT法检测可知CGRP可促进牙髓干细胞的增殖,在CGRP的浓度达到10^(-7)mol/L时效果最显著;在CGRP作用牙髓干细胞28 d后,经茜素红染色可见矿化结节;经实时定量RT-PCR法和免疫印迹法检测可知CGRP作用下牙髓干细胞中Col-1、Runx2的mRNA和蛋白表达水平得到显著提高;MAPK信号通路中ERK激酶通路能够调控CGRP作用下牙髓干细胞中Runx2表达的水平,ERK激酶和p38通路能够调控CGRP作用下牙髓干细胞中Col-1表达的水平。结论 CGRP能够促进牙髓干细胞的增殖分化,这一作用受到MAPK信号通路的调控。
- 刘航郝建忠栾可峰李哲于天资张继萍
- 关键词：降钙素基因相关肽牙髓干细胞分化MAPK信号通路
- 太极扣附着体修复牙周病合并游离端缺失的应用被引量：1
- 2007年
- 目的评价太极扣附着体修复牙周病合并游离端缺失的临床应用价值。方法165例牙周病合并游离端缺失的患者，随机分为2组，实验组86例，用太极扣附着体修复，对照组79例，为常规卡环式可摘义齿修复，比较2组的临床效果满意率。结果经1-3年临床观察，2组比较有显著性差异（P〈0．01），结论太极扣附着体义齿修复牙周病合并游离端缺失优于卡环式可摘义齿，解决了患者因牙周病不能修复的问题.
- 谷德岩韩超英郝建忠李瑞智李德仁
- 关键词：太极扣附着体牙周病游离端缺失卡环
