谭晓晶 作品数:11 被引量:44 H指数:4 供职机构: 四川大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家科技型中小企业技术创新基金 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 化学工程 医药卫生 更多>>
胆固醇氧化酶的发酵条件及酶学性质研究 被引量:3 2006年 Brevibacterium sp.可以发酵生产胆固醇氧化酶,实验中对该菌种进行了底物诱导及发酵条件的优化, 确定其最适培养基为(%):蔗糖0.3,酵母膏0.2,蛋白胨0.3,牛内膏0.3,K_2PO_4 0.1,MgSO_4 0.05,pH6.8。最适培养条件为:接种量5%,24℃培养20h,通气量为50mL 培养基/250mL 三角瓶,200r/min。在最适培养基及最适条件下,胆固醇氧化酶的酶活力可达到24.01U/mg,比未优化前1.71U/mg 提高了14倍。该酶具有较强的酸碱稳定性和热稳定性,最适 pH 为6.5,最适温度为54℃。在最适 pH 和温度条件下测得该酶 km 值为7.1 ×10^(-5)mol/L。 许晓燕 张锐 谭晓晶 余彩霞 辛渝 杨波 孟延发关键词:BREVIBACTERIUM 发酵 正交实验 胆固醇酯酶高产菌株的筛选及动力学性质研究 被引量:7 2006年 通过平板初筛和摇瓶复筛,得到一株胆固醇酯酶的高产菌株,研究了pH值、温度、底物浓度、一些有机和无机试剂对胆固醇酯酶酶促反应速度的影响。研究发现,胆固醇酯酶有较好的酸碱稳定性,pH值为5.0 ̄8.0;最适pH值和最适温度分别为pH7.0和40℃,该酶的动力学研究表明,对胆固醇亚油酸酯和胆固醇油酸酯都表现为典型的米氏规律,Km值分别为2.2×10-5mol/L3.1×10-5mol/L,同时研究了一些金属离子和有机化合物对酶活性的影响,发现Mg2+、EDTA对胆固醇酯酶有激活作用。 武翠玲 谭晓晶 姚明明 张锐 卢戌 孟尧 孟延发关键词:RHODOCOCCUS 动力学特性 产朊圆酵母尿酸酶形成条件研究 2005年 择到一株产尿酸酶较高水平的产朊圆酵母(Torula utilisHenneb).对此菌株尿酸酶形成条件的研究表明:蔗糖、葡萄糖是酶形成的适合碳源;蛋白胨和酵母膏是产酶的适合氮源,另添加无机氮源对产酶略有帮助作用;尿酸、黄嘌呤和鸟嘌呤对酶形成起诱导作用,底物尿酸是适宜的诱导物.尿酸酶形成最适培养基组成为(%):蔗糖3,蛋白胨2,酵母膏0.5,(NH4)2SO40.05,尿酸0.05,KCl 0.04,Pb2+、Fe3+、Hg2+、Mg2+、Ag+、Ca2+、Zn2+不利于产酶.另对培养条件做了优化探索:最适pH为6.0,在250mL三角瓶中装30mL培养液,接种量10%,在200r/min的旋转摇床上28℃振荡培养23h. 杨波 余彩霞 辛渝 许晓燕 谭晓晶 卢戌 喻堃 武翠玲 孟延发关键词:尿酸酶 发酵 朊圆酵母尿酸酶的基本特性研究 被引量:6 2006年 研究了尿酸酶分离纯化条件和pH、温度、底物浓度、一些有机和无机试剂对尿酸酶酶促反应速度的影响.研究结果表明,用Triton X-100及巯基乙醇处理细胞悬液(pH8.5),再用超声波处理破碎细胞效果最佳.硫酸铵沉淀尿酸酶的最佳浓度为75%.用Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析和Xamhine-agarose亲和层析两步纯化步骤可获得理想纯度的酶制剂.在一定的条件下,尿酸酶的最适pH和酸破稳定pH范围分别为8.5和5.0~12.最适温度为37℃;热稳定性较好,在50℃处理30min时活性保持90%,在60℃处理30min时活性仍保持80%.在最适条件下,该酶催化尿酸的米氏常数(Km)为3.34×10^-5mol/L.一些金属离子和有机化合物对酶活性的影响也进行了研究. 孟尧 辛渝 谭晓晶 许晓燕 余彩霞 杨波 孟延发关键词:尿酸酶 动力学特性 Rhodococcus sp.发酵条件及其胆固醇酯酶的部分性质 被引量:2 2006年 Rhodococcussp.经发酵培养可合成分泌胆固醇酯酶。对该菌种进行诱导及发酵条件的优化,确定其培养基为(%):蛋白胨1.3,KCl 0.5,牛肉膏0.1,Na2HPO40.632,MgSO40.06,油酸0.4,卵磷脂0.25,Triton X-100 0.16;最适培养条件为:pH7.4,250 mL三角瓶中装量40 mL,接种量6.0%,摇床转速180r/min,30℃培养24h。在最适培养基及最适培养条件下,胆固醇酯酶比活力可达到5.47 U/mg。酶学性质研究结果表明,该酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0。 武翠玲 谭晓晶 孟尧 张锐 姚明明 卢戌 孟延发关键词:RHODOCOCCUS 发酵 正交实验 Rhodococcus sp.胆固醇酯酶分离纯化与基本性质研究 胆固醇酯酶/(COE,EC3.1.1.13/)在食品、医药等方面的功能日益受到重视,为此本课题从以下四个方面研究胆固醇酯酶,从而为它的应用提供依据:胆固醇酯酶高产菌株的筛选、菌株鉴定;胆固醇酯酶高产菌株培养条件的优化;胆... 谭晓晶关键词:马红球菌 发酵 分离纯化 文献传递 红毛五加多糖的分离纯化和表观分子质量测定 被引量:9 2005年 红毛五加经热水浸提,用Sevag法脱蛋白,经DEAE cellulose32离子交换层析和SephacrylS 200HR凝胶层析纯化得到3个主要多糖组分:AHP I、AHP II、AHP Ⅲ.经HPLC和SephacrylS 300HR凝胶层析鉴定,3种多糖均为均一组分.HPLC测定AHP I、AHP II、AHP Ⅲ的表观分子质量分别为:7.0kD、59.5kD和12.9kD,SephacrylS 300HR凝胶层析进行验证,得到相似结果. 陈永 卢戌 谭晓晶 孟尧 辛渝 许晓燕 杨波 李强 于彩霞 孟延发关键词:红毛五加 多糖 分离纯化 产朊圆酵母(Torula utilis Henn 2.281)尿酸酶快速提取法的研究 被引量:1 2005年 The combination of ultrasonic and Triton X-100 and β-ME made it easy to release Uricase from Torula utilis Henneb 2.281 quickly when the pH of cell suspending mixture varied from 7 to 11.The results of our researches were obtained as follow : the cell suspending mixture obtained the highest enzyme activity(20.4U/mL),after being treated with by Triton X-100 and β-ME(5%,v/v) and ultrasonic.The enzyme activity obtained by this method was obviously higher than by single treating method,e.g.ultrasonic(7.6U/mL) or Triton X-100 and β-ME(15.2U/mL). 余彩霞 杨波 辛俞 谭晓晶 许晓燕 孟延发关键词:尿酸酶 细胞壁 酵母菌产甘油激酶的发酵条件优化 被引量:1 2006年 筛选得到产甘油激酶(GK,EC2.7.1.30)德巴利酵母菌,对其发酵条件进行了优化,确定其最适培养基配方为葡萄糖0.1%,KCl0.18%,酵母膏0.3%,柠檬酸0.6%,甘油0.5%。最适培养条件为接种量6%,装液量为120mL/250mL,160r/min、31℃培养25h。在最适培养基及最适条件下,甘油激酶的酶活力可达1.19U/mg。 许晓燕 谭晓晶 余彩霞 辛渝 孟延发关键词:酵母 发酵 红毛五加多糖的基本性质研究 被引量:15 2004年 本文从红毛五加中分离得到了三种多糖 ,并对它们的基本性质进行了研究。红毛五加经热水浸提 ,用Sevag法脱蛋白 ,经DEAE cellulose 32离子交换层析和SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析纯化得到三个主要多糖组分 :AHP I、AHP II和AHP III。HPLC测定AHP I、AHP II和AHP III的表观分子质量分别为 7.0kD、5 9.5kD和 12 .9kD。红外光谱分析三种多糖具有多糖类物质的一般特征。经纸层析和GC结果综合分析得知 ,AHP I含有阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖 ,其摩尔比为 1.0 0∶1.4 0∶0 .6 4∶3.13∶2 .0 9;AHP II含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖 ,其摩尔比为 0 .36∶1.0 0∶0 .15∶0 .2 0∶1.10 ;AHP III含有鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖 ,其摩尔比为 1.2 2∶1.0 0∶0 .4 0∶0 .2 8∶0 .2 6∶1.0 3。咔唑 硫酸法测得AHP II、AHP III的糖醛酸含量分别为 6 .7%和 6 .0 % ;AHP I不含糖醛酸。体内试验表明 ,红毛五加粗多糖对小鼠S180 肉瘤有明显抑制作用。 陈永 李强 谭晓晶 卢戌 许晓燕 辛俞 杨波 余彩霞 孟延发关键词:红毛五加多糖 甘露糖 S180肉瘤 糖醛酸 鼠李糖 硫酸法