范斌 作品数:14 被引量:16 H指数:3 供职机构: 上海海洋大学 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 上海市教育委员会重点学科基金 上海市教育委员会创新基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌微生物制剂 本发明涉及一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌,其保藏编号为CCTCC M 2013240。本发明还提供这种短小芽孢杆菌的应用以及以这种短小芽孢杆菌或其发酵液为活性成分的微生物制剂。本发明优点在于:本发明以紫色杆菌... 宋增福 范斌 陈彪具有群体感应(Quorum sensing)抑制效果芽孢杆菌的筛选与鉴定 细菌性疾病是危害水产业健康的主要原因之一,从抑制调控致病菌毒力表达的群体感应(quorum sensing,QS)入手是水产动物疾病防治研究新的热点方向。本研究以紫色杆菌(Chromobacteria violaceum... 宋增福 范斌 郭婧 李娟英 潘连德 张庆华关键词:短小芽孢杆菌 具群体感应抑制作用短小芽孢杆菌F3-1菌株的诱变育种 被引量:1 2018年 【目的】获得群体感应(QS)信号分子降解能力更强的突变短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),增强其在水产细菌性病害防治中的效果,为水产养殖业利用细菌QS淬灭机制防治细菌性疾病提供借鉴。【方法】以具有降解QS信号分子特性的短小芽孢杆菌F3-1为出发菌株、紫外线和亚硝酸钠(Na NO2)为诱变剂进行诱变选育;以紫色杆菌(Chromobacteria violaceum ATCC12472)为报告菌株筛选正向突变,经连续传代25代后测定其遗传稳定性;采用单因素试验测定培养时间、p H、盐度和温度对突变菌株降解QS信号分子能力的影响,同时通过扩增QS抑制基因aii A及SDS-PAGE分析验证突变菌株的蛋白表达情况。【结果】两种诱变方法共获得205株突变菌株,以紫色杆菌为报告菌株通过紫外诱变筛选出具有QS抑制作用的正向突变株4株,编号分别为FF1-2、FF3-2、FF3-3和FF4-1。其中,突变菌株FF1-2的蛋白产量达47.48±2.87μg/m L,约是出发菌株F3-1的3.12倍,对紫色杆菌的褪色圈直径是出发菌株F3-1的2.96倍,抑制紫色素的能力较出发菌株F3-1提高64%,说明该突变菌株具有很强的QS抑制能力;连续传代25代后,突变菌株FF1-2的产蛋白能力及对紫色素的抑制作用无显著变化(P>0.05)。突变菌株FF1-2在培养时间为40 h、温度30℃、盐度0.5%、p H 7.0时,紫色素褪色效果最佳。从出发菌株F3-1和突变菌株FF1-2中均能扩增获得753 bp的aii A基因,且通过SDS-PAGE分析验证二者在28 k D处均呈现出特异条带。【结论】采用诱变育种技术筛选得到的突变菌株FF1-2能显著提高QS抑制能力,且该抑制能力能稳定遗传,即通过诱变育种技术提高短小芽孢杆菌的产酶量及酶活力具有可行性。 彭孟凡 范斌 张庆华 张庆华关键词:短小芽孢杆菌 诱变育种 AIIA基因 一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌微生物制剂 本发明涉及一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌,其保藏编号为CCTCC?M?2013240。本发明还提供这种短小芽孢杆菌的应用以及以这种短小芽孢杆菌或其发酵液为活性成分的微生物制剂。本发明优点在于:本发明以紫色杆菌... 宋增福 范斌 陈彪文献传递 一种地衣芽孢杆菌、筛选方法及用途 本发明属于微生物技术领域,本发明提供了一种地衣芽胞杆菌,其能分泌多种酶类,促进动物酶活性并提高动物的免疫力,减少病原菌侵害;此外还能降解养殖水体中的氨氮、残余饵料蛋白质和淀粉,净化养殖水体。本发明还提供了一种地衣芽胞杆菌... 张庆华 郭婧 王娟 封永辉 张永华 范斌文献传递 一株具水霉抑制特性芽孢杆菌的筛选及其分子生物学鉴定 研究以生物防治为切入点,通过筛选自实验室保存的九株芽孢杆菌与水霉进行简单对峙拮抗实验,发现芽孢杆菌BAl水霉抑制作用突出。通过形态观察、生理生化特性测定,确定其为芽孢杆菌属细菌;并进一步扩增了BAl基因组的16S rDN... 范斌 唐磊 赵世林 佘林荣 宋增福关键词:水霉 文献传递 具有群体感应抑制效果芽孢杆菌的筛选与鉴定 被引量:4 2013年 细菌性疾病是危害水产业健康发展的主要原因之一,从抑制调控致病菌毒力表达的群体感应(Quorum sensing,QS)入手是水产动物疾病防治研究新的热点方向。研究以紫色杆菌(Chromobacterium violaceum)为报告菌株,采用"T"型划线和滤纸片法,对分离自异育银鲫肠道及实验室保存的芽孢杆菌F3-1、F3-2、F6-4、F6-5、X77、X93、X3914进行分析测测试,筛选具有群体感应抑制效果的菌株。"T"型划线结果显示菌株F3-1能够抑制紫色杆菌紫色菌素的产生;滤纸片法结果显示抑制紫色杆菌紫色菌素产生的主要物质存在于菌株F3-1的胞外产物中。试验提取了菌株F3-1的培养物的粗提物,测定粗提物浓度分别在0、50、100、200、300 mg/L时紫色杆菌菌素在585 nm处的光密度值,结果显示随着粗提物浓度的增加其色素的产量显著降低(P<0.05),当粗提物浓度超过200 mg/L时,试管中观察不到紫色菌素存在;利用硫酸铵盐析的方法,提取了菌株F3-1的粗提物中蛋白产物,滤纸片扩散法结果显示表明其胞外蛋白是紫色杆菌QS系统的抑制物质。通过分子生物学16S rDNA鉴定,确定菌株F3-1为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus,GenBank accession No.JX984444)。电镜照片显示该菌具有短杆状特征,因此,分离自异育银鲫肠道的短小芽孢杆菌F3-1具有抑制细菌群体感应的作用。 宋增福 范斌 郭婧 李娟英 潘连德 陈彪 张庆华关键词:短小芽孢杆菌 具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌突变菌株 本发明涉及一种具有对群体感应系统高效抑制作用的短小芽孢杆菌的突变菌株,其保藏编号为CCTCC NO.2013534。本发明优点在于:本发明以F3-1菌株为出发菌株,首次通过诱变育种的方法筛选出能够稳定遗传的对QS信号分子... 宋增福 范斌 陈彪 张庆华文献传递 副溶血弧菌不同感染模式下对斑马鱼的致病力 本文以斑马鱼为模式动物,以浸泡感染、创伤感染、肌肉注射、腹腔注射、(17±2)℃腹腔注射、菌株活化2次后腹腔注射6种不同的感染方式,分别对浓度为106、107和108CFU/mL的副溶血弧菌(Vibrio parahae... 张永华 范斌 宋增福 张庆华关键词:副溶血弧菌 斑马鱼 致病力 文献传递 一株具水霉抑制特性的芽孢杆菌筛选及其分子生物学鉴定 被引量:5 2012年 以水霉菌(Saprolegnia ferax)的生物防治为切入点,通过对本实验室保存的9株芽孢杆菌(Bacillus spp.)与水霉菌JL菌株进行对峙拮抗试验,筛选出具有明显抑制水霉菌JL菌株的芽孢杆菌BA1(P<0.05)。经进一步测定菌株BA1对不同来源水霉菌株试验,结果显示菌株BA1对水霉菌株6#、10#、S2也有明显的抑制作用(P<0.05)。通过测定菌株BA1的16 S rDNA,利用BLAST软件进行同源性比对,发现与蜡样芽孢杆菌的同源性在99%以上。由此推测,菌株BA1为蜡样芽孢杆菌菌株,且具有明显抑制水霉菌作用,可以作为水产养殖上水霉病防治的生物制剂使用。 宋增福 范斌 佘林荣 唐磊 赵世林 吕利群 杨先乐关键词:抑菌试验 分子生物学鉴定