胡长江
- 作品数：11 被引量：53H指数：4
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人端粒酶逆转录酶上调Cdx2表达促进胃黏膜肠化生被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)在胃黏膜肠化生的作用及其可能存在的分子机制。方法 hTERT真核表达质粒构建成功后,用脂质体转染法转染人胃癌MKN45细胞。应用qPCR技术从RNA水平检测转染前后相关肠化生基因(Cdx1、Cdx2和Cdx4)的改变;进一步采用Western blot技术从蛋白水平证实其表达变化;继而构建Cdx2基因启动子,采用双荧光素酶实验分析hTERT与Cdx2的作用机制;采用Co-IP证实hTERT与p65结合情况;加入NF-κB抑制剂后,双荧光素酶实验和Western blot检测Cdx2表达变化情况。结果转染MKN45细胞hTERT基因后,qPCR证实肠化生相关基因Cdx1、Cdx2 mRNA表达明显上调,而Cdx4 mRNA则无明显变化;Western blot证实过表达hTERT后只有Cdx2的蛋白表达上调;双萤光素酶报告实验证实与对照组相比,hTERT组Cdx2的启动子活性明显增加(P<0.05);免疫共沉淀(CO-IP)实验证实hTERT与NF-κB亚基p65存在蛋白-蛋白相互作用;另外双荧光素酶实验和Western blot表明NF-κB抑制剂(Bay78-1102)能有效抑制hTERT对Cdx2的启动子的活性,并下调Cdx2蛋白的表达。结论 hTERT可以通过活化NF-κB信号通路促进Cdx2的表达,从而促进胃黏膜的肠化生的发生。
- 陈柏君周源肖煜峰胡长江谢睿何兵汪苏敏吴玉云凌贤龙杨仕明
- 关键词：人端粒酶逆转录酶肠上皮化生胃黏膜胃黏膜癌前病变
- hTERT上调FOXM1乙酰化影响胃癌细胞侵袭能力被引量：1
- 2017年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse enzyme,hTERT)促进胃癌细胞侵袭的分子机制。方法构建稳定过表达hTERT的细胞株SGC-7901-hTERT,采用Western blot检测叉头盒蛋白(forkhead box M1,FOXM1)的表达,q RT-PCR和Western blot检测FOXM1下游侵袭相关基因基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的m RNA和蛋白表达;构建FOXM1的sh RNA干扰质粒,在SGC-7901-hTERT细胞中转染该质粒,Transwell法检测细胞侵袭能力,q RT-PCR和Western blot检测MMP-2、MMP-9的m RNA和蛋白表达;构建FOXM1启动子活性报告质粒,在SGC-7901-hTERT细胞中用双荧光素酶报告实验检测FOXM1启动子活性,q RT-PCR检测FOXM1 m RNA表达;构建稳定过表达FOXM1的细胞株SGC-7901-HA-FOXM1,并在此细胞中转染hTERT过表达质粒,免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)检测FOXM1乙酰化水平变化,免疫荧光实验检测hTERT与FOXM1的细胞定位。结果与对照组比较,过表达hTERT促进FOXM1及其下游分子MMP-2、MMP-9的蛋白表达,同时也促进肿瘤细胞侵袭(P<0.01),但不影响FOXM1的启动子活性及m RNA表达;与过表达hTERT组比较,干扰FOXM1可抑制MMP-2、MMP-9的m RNA和蛋白表达,同时也抑制肿瘤细胞侵袭(P<0.01);hTERT与FOXM1存在细胞共定位,且过表达hTERT可上调FOXM1乙酰化水平。结论 hTERT通过上调FOXM1乙酰化促进胃癌细胞侵袭。
- 廖国斌彭瑞琨节梦梦常杏吴亚冉陈杨胡长江杨仕明柏健鹰
- 关键词：端粒酶逆转录酶肿瘤侵袭
- 分子生物学教学在医学学术型研究生创新能力培养中的实践与探索被引量：6
- 2018年
- 医学学术型研究生体系是我国培养高层次医学创新人才的重要举措,是提升国家医学研究水平和医疗保障能力的核心要素。与医学专业型研究生培养体系不同,国家对学术型研究生的科研能力培养有着更高的要求和定位。因此,亟需完善和提高相关的培养模式,以期满足国家和社会对学术型研究人才的需求。分子生物学是一门在分子水平探究生命现象的科学,是认识生命基本过程继而探索疾病病理生理规律的基础性学科。提高医学学术型研究生的分子生物学理论功底、思维能力和实践技能将为其创新能力的培养起到积极的促进作用。本文拟从阐述分子生物学在医学学术型研究生创新能力培养中的重要意义入手,深入剖析目前此方面的培养现状,并针对性地提出相关解决措施和方法,以期提升分子生物学教学在医学学术型研究生创新能力培养中的作用。
- 倪振洪罗小庆夏提古丽胡长江
- 关键词：分子生物学学术型研究生教学
- 端粒酶逆转录酶线粒体转位促进肝癌细胞干性及耐药的研究被引量：2
- 2017年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse enzyme,hTERT)线粒体转位对肝癌细胞干性及耐药的影响。方法采用大剂量顺铂(CDDP)冲击、间歇诱导的方法诱导肝癌细胞HepG2、Huh7耐药,构建耐药细胞株HepG2/CDDP、Huh7/CDDP,CCK-8检测细胞耐药能力;Western blot检测细胞线粒体hTERT表达情况;激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位;流式细胞术检测耐药细胞干性相关蛋白CD133、EpCAM表达情况;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Western blot检测耐药细胞干性相关因子OCT-4蛋白表达水平变化。结果与亲本细胞HepG2[耐药指数(7.69±0.86)μg/m L及Huh7(7.18±0.35)μg/m L]相比,耐药细胞株对CDDP耐药指数明显增加[HepG2(41.16±0.42)μg/m L,Huh7(33.48±0.33)μg/m L,P<0.01],经顺铂(CDDP)诱导耐药细胞线粒体hTERT表达显著升高,线粒体膜电位增强,CD133^+细胞比例[HepG2(1.44±0.41),HepG2/CDDP(23.15±1.55),P<0.01]及EpCAM^+细胞比例[HepG2(0.85±0.10),HepG2/CDDP(3.96±0.10),P<0.01]增加,克隆形成能力增强,干性相关因子OCT-4蛋白表达水平增加。结论经顺铂诱导的肝癌耐药细胞线粒体hTERT转位显著增加,且具有明显的肿瘤干细胞特征。
- 常杏胡长江邓盛瑜杨歆杨仕明凌贤龙
- 关键词：端粒酶逆转录酶线粒体肿瘤干细胞干性耐药
- miR-1182调控胃癌细胞人端粒酶反转录酶的分子机制及其对迁移能力的影响被引量：4
- 2014年
- 目的研究miR-1182在胃癌细胞中调控人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)的机制及对其迁移能力的影响。方法胃癌细胞MKN28中转染miR-1182类似物,qRT-PCR检测转染后细胞miR-1182的相对表达量,Western blot检测转染后细胞hTERT的表达变化;进一步通过生物信息学预测miR-1182与hTERT mRNA的结合位点,双荧光素酶实验分析miR-1182对hTERT mRNA的作用机制;Transwell实验检测转染miR-1182类似物对MKN28细胞体外迁移能力的影响。结果 qRT-PCR表明miR-1182组的miR-1182的相对表达量(10.168±2.645)明显高于对照组(1.008±0.167)(P<0.01)。Western blot结果显示在胃癌细胞系中过表达miR-1182后,hTERT的蛋白水平下调。双荧光素酶实验表明miR-1182可与hTERT mRNA的ORF区结合,且其主要结合部位为hTERT mRNA的ORF-1;在Transwell迁移实验中,miR-1182类似物转染细胞后,miR-1182组穿膜细胞数为(23.333±4.509)/视野,对照组穿膜细胞数为(71.000±4.582)/视野,miR-1182组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.01)。结论 miR-1182通过与胃癌细胞hTERT的ORF区结合,从而在转录后水平抑制hTERT的表达,并发现其可抑制胃癌细胞的迁移能力。
- 张丹郝宁波唐波吕沐瀚谢睿胡长江汪苏敏杨仕明
- 关键词：端粒酶反转录酶胃肿瘤肿瘤转移
- 研究生教学中SCI综述的写作方法
- 2018年
- SCI综述写作是研究生教学中的重要环节,也是研究生创新教育的重要突破口。然而目前不少研究生在SCI综述写作中,仍然存在选题不准、逻辑条理不强、内容空洞、科学性不严谨等问题。本文针对研究生SCI综述写作中的上述问题,从具体写作实例出发,提出了SCI综述写作的一般步骤、一般方法,并总结了写作中的具体注意事项,以期为研究生SCI综述的写作提供有益借鉴。
- 胡长江节梦梦李新哲常杏刘诚彭瑞琨魏逸鸣倪振洪杨仕明
- 关键词：研究生教学创新教育
- 血清中lncRNA HOTAIR检测方法的建立及其在结肠癌诊断中的应用价值被引量：11
- 2016年
- 目的建立血清中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HOTAIR的检测方法及评价其在结肠癌诊断中的作用。方法收集结肠癌患者血清样本47例,正常志愿者血清样本40例,10对结肠癌及癌旁组织。采用TRIzol LS和TRIzol分离组织和血清中的RNA;采用qRT-PCR检测HOTAIR在组织及血清中的表达。结果结肠癌组织或结肠癌患者血清中HOTAIR的表达显著高于癌旁组织或正常志愿者(P<0.05,P<0.01),且TNMⅢ/Ⅳ期的结肠癌患者血清中HOTAIR的表达高于正常志愿者(P<0.05),Ⅲ/Ⅳ期显著高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.01);淋巴结转移及非转移的结肠癌患者血清中HOTAIR的表达均显著高于正常志愿者(P<0.01),且淋巴结转移患者显著高于非转移患者(P<0.05);血清中HOTAIR的表达值诊断结肠癌的敏感性为65.96%,特异性为85.00%,曲线下面积为0.741 0;血清中HOTAIR的表达与CA199值呈显著正相关(P<0.01,R2=0.147 1)。结论成功建立血清中HOTAIR的检测方法,血清中HOTAIR的高表达可能作为诊断结肠癌的生物标志物。
- 杨歆黎伯胜胡长江邓西尹游扬常杏杨仕明凌贤龙
- 关键词：结肠癌血清生物标志物
- 血液灌流联合血液透析治疗药物性肝损害的临床疗效观察被引量：16
- 2013年
- 目的观察血液灌流(hemoperfusion,HP)联合血液透析(hemodialysis,HD)治疗药物性肝损害(drug inducedliver injury,DILI)的疗效,拟摸索出治疗药物性肝损害的血液净化方式。方法选取2010年12月至2011年11月在第三军医大学西南医院全军消化内科研究所住院治疗的10例以重度黄疸为主要临床表现的药物性肝损害患者。其中5例在住院第1周进行1～2次血液灌流联合透析治疗,另外5例为同时期未接受灌流及透析治疗的患者作为对照。观察治疗后7、14、30 d血清总胆红素(total bilirubin,TBIL)的变化情况,以及总胆红素水平下降的幅度,进行疗效判定。结果总胆红素在治疗前、治疗后第7、14、30天时,治疗组分别为(464.7±127.7)、(181.3±49.8)、(111.5±45.8)、(28.4±10.5),对照组分别为(373.2±65.8)、(363.4±165.6)、(256.4±131.1)、(75.2±43.3),两组在第14天差异有统计学意义(P<0.05);总胆红素下降幅度在治疗后第7、14、30天时治疗组分别为(283.4±156.5)、(353.2±136.4)、(436.4±134.6),对照组分别为(9.8±132.4)、(116.7±103.2)、(297.9±51.3),两组在第7、14天差异有统计学意义(P<0.05)。结论血液灌流联合血液透析治疗能提高药物性肝损害患者血清总胆红素降低速度,促进患者肝功能的恢复,对药物性肝损害患者应尽早应用,以获得最佳治疗效果。
- 李保华胡长江连军松杨仕明
- 关键词：药物性肝损害血液灌流血液透析血清总胆红素
- miR-29通过ITGB1抑制胃癌侵袭、转移的分子机制被引量：11
- 2013年
- 目的观察miR-29对胃癌细胞体外侵袭力的影响,探讨miR-29通过ITGB1调节胃癌侵袭和转移的具体机制。方法通过基因芯片筛选胃癌与癌旁组织中差异性表达的miRNA;采用生物信息学预测ITGB1调控相关miRNA,通过比对上述2个结果,筛选出miR-29;进一步以miR-29慢病毒及miR-29mimics过表达miR-29后,用Western blot检测胃癌细胞中ITGB1的表达变化;采用双荧光素酶实验分析miR-29与ITGB1的作用机制;采用Transwell侵袭实验及划痕实验检测miR-29慢病毒感染后细胞体外侵袭能力的变化;qRT-PCR检测60例胃癌患者癌组织和癌旁组织中miR-29的表达差异,并分析miR-29的表达与肝癌患者临床病理之间的关系。结果基因芯片及生物信息学预测发现miR-29在胃癌组织里高表达,同时又可能调控ITGB1;双荧光素酶实验证实miR-29可以结合在ITGB13'UTR,miR-29慢病毒及miR-29mimics过表达miR-29都能在蛋白水平下调ITGB1;qRT-PCR结果显示miR-29家族3条miRNA在胃癌组织中的相对含量均低于癌旁组织[miR-29a:癌旁(32.01±10.38),癌(14.16±6.25);miR-29b:癌旁(26.95±5.05),癌(9.82±1.86);miR-29c:癌旁(53.56±8.05),癌(16.79±1.97),P<0.01];进一步统计学分析表明,miR-29a与淋巴结转移有关(P<0.05),miR-29b在具有远处转移的病例组织中C/P比值较无远处转移的病例组织明显降低(P<0.05)。结论miR-29可以在转录后水平调控ITGB1的表达,从而抑制胃癌细胞的侵袭和转移。
- 何兵余松涛吕沐瀚吴玉云胡长江杨仕明
- 关键词：MIR-29胃肿瘤肿瘤转移
- hTERT调控Gli1的表达及其对胃癌细胞侵袭迁移的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse enzyme,h TERT)调控Gli1的表达及其对胃癌细胞侵袭迁移的影响。方法采用p IRES2载体构建h TERT过表达质粒,qRT-PCR和Western blot检测h TERT对Gli1表达的影响;构建Gli1启动子荧光素酶质粒,检测h TERT对Gli1启动子荧光素酶活性的影响;构建Gli1干扰质粒,并与h TERT过表达质粒共转染SGC-7901细胞;Transwell实验和划痕实验检测胃癌细胞的侵袭、迁移能力的变化;结果过表达h TERT显著上调Gli1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01),并显著增加Gli1启动子荧光素酶的活性(P<0.01);而si-Gli1显著抑制Gli1的表达;干扰Gli1的表达,减弱h TERT对胃癌细胞侵袭、迁移能力的影响。结论 h TERT通过促进Gli1的转录,增加Gli1的表达,进而增强胃癌细胞的侵袭迁移。
- 李阳张丹胡长江唐波覃勇汪苏敏吴玉云董辉杨仕明
- 关键词：人端粒酶逆转录酶GLI1胃癌转录调控
