罗建
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠CALB2基因及其小分子干扰RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定
- 目的为研究钙视网膜蛋白(Calretinin,CALB_2)在生殖内分泌系统中的作用,本文构建了CALB_2基因重组腺病毒载体和CALB_2基因小干扰RNA(siRNA)重组腺病毒载体。方法用RT-PCR方法,以小鼠CA...
- 王菁罗建刘姗孙雪萍高超高莉杨晓玉刘嘉茵崔毓桂
- 小鼠CALB2基因SiRNA重组腺病毒载体的构建
- 目的为研究Calretinin(CALB_2)在中枢神经系统、生殖内分泌系统、视觉传导中的作用,本文构建了小鼠CALB_2基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒载体。方法根据SiRNA靶序列设计并合成2条互补的6...
- 罗建王菁刘珊代晓南蒋春艳高超刘嘉茵崔毓桂
- 双酚A作用于人胚胎干细胞类胚体系统的基因组学研究
- 目的检测环境内分泌干扰物双酚A(Bisphenol A,BPA)作用后的人胚胎干细胞类胚体全基因组表达谱。方法人胚胎干细胞(Human Embryonic stem cell,hESC)在无饲养层细胞、无碱性成纤维细胞生...
- 罗建蒋春艳崔毓桂刘嘉茵
- 双酚A的生殖毒性研究进展
- 2012年
- 双酚A(Bisphenol A,BPA)作为一种重要的工业原料,广泛存在于塑料制品中。人类通过多种途径接触吸收、并在体内蓄积BPA,职业接触人群和日常生活接触人群的体内BPA水平差别较大,但即使低于安全摄入剂量[50μg(/kg.d)],母体在围生期接触BPA后也会对胚胎发育有影响,成人长时间接触BPA对其生殖系统的健康也会产生作用;影响的程度及范围会随着摄入剂量的增加而增大。因此,提前预防过早过多接触BPA类物质是非常必要的。从BPA的接触途径介绍分析BPA对人体的胚胎期、婴儿期及成年期生殖系统发育的影响,以及不同剂量浓度下产生的影响变化情况,为以后预防和研究方向奠定基础。
- 罗建黄博贤崔毓桂
- 关键词：胚胎发育泌尿生殖系统性腺障碍双酚A
- 小鼠Calb_2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:为了体外研究Calretinin(Calb2)基因在生殖系统、神经系统、视觉传导中的作用,构建小鼠Calb2基因表达重组腺病毒载体。方法:用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,以小鼠Calb2cDNA为模板,扩增Calb2基因。亚克隆后,将Calb2基因片段克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上,构建穿梭质粒pAdTrack-Calb2。将穿梭质粒pAdtrack-Calb2转化至BJ-5183感受态细菌中,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,获得重组质粒AdCMV-Calb2。重组质粒AdCMV-Calb2转染AD-293细胞,进行病毒包装和扩增,通过绿色荧光蛋白(GFP)报告基因观察重组病毒的产生。同时,构建对照腺病毒载体AdCMV-GFP。用获得的重组腺病毒感染AD-293细胞,通过观察GFP检测感染效率、蛋白质印迹方法检测Calb2基因的表达。结果:测序和酶切鉴定重组腺病毒质粒构建正确;经AD-293细胞包装后可观察到GFP表达;获得的重组腺病毒载体体外感染AD-293细胞,观察到GFP表达;经蛋白质印迹方法检测,与未感染腺病毒载体组(Mock)和感染对照腺病毒载体组(AdCMV)相比,Calb2基因腺病毒载体(AdCMV-Calb2)感染组CALB2蛋白水平显著增高(P<0.05)。结论:成功构建了小鼠Calb2基因重组腺病毒载体,并在AD-293细胞超表达,为课题组研究Calb2基因在生殖相关疾病的生理与病理生理作用奠定了基础。
- 王菁罗建刘珊代晓南高莉高超刘嘉茵崔毓桂
- 关键词：腺病毒科泌尿生殖系统
