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非小细胞肺癌中PTB对肿瘤抑制基因ceacam1选择性拼接的调控研究被引量：1: 2006年; 目的:研究在非小细胞肺癌及癌旁组织中ceacam1通过选择性拼接而产生的两种转录产物的调控机制。方法:将用PCR方法获得ceacam1基因中从内含子5至外显子8长1 606 bp DNA片段插入到真核表达载体pCMV中,构建成ceacam1迷你基因模型并与ptb基因共转染,用PCR法鉴定转染后的产物变化;根据外显子7序列设计的探针GAE(16-nt)及ACE(8-nt)进行凝胶阻滞分析实验。分离与探针结合的蛋白并进行质谱分析。结果:ptb3种cDNA与ceacam1迷你基因共转染后,CEACAM lL表达水平下降,其中ptb4对迷你基因的表达产物影响最大。仅转染迷你基因的细胞中ceacam1L在两条带中所占比例为76.7%,而与ptb3种重组质粒共转染后,比例分别下降至58.3%、64.8%和54.0%。凝胶阻滞实验表明,探针GAE能与核蛋白结合,而ACE基本不能与核蛋白结合,与GAE结合的蛋白经质谱分析为PTB。结论:PTB过表达与ceacam1低表达有明显的相关性,拼接因子PTB参与ceacam1的选择性拼接。; 袁榴娣丁洁缪峰; 关键词：凝胶阻滞分析非小细胞肺癌

糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法的探讨被引量：9: 2005年; 目的:对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法进行探讨,建立糖尿病大鼠血管平滑肌细胞模型,为糖尿病慢性血管并发症研究奠定基础。方法:建立糖尿病大鼠模型,用组织贴壁法体外培养胸主动脉血管平滑肌细胞。结果:糖尿病大鼠造模成功。用贴壁法培养糖尿病大鼠血管平滑肌细胞,3d后相差显微镜下可见细胞游出,培养7～10d左右细胞重叠生长达多层,高低起伏呈“峰—谷”状。平滑肌细胞actin免疫组织化学染色鉴定为平滑肌细胞。结论:糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖速度快,培养条件要求严格,在形态学上与正常大鼠平滑肌细胞相同。; 李艳平李新荣邓湘蕾李震缪峰; 关键词：体外培养方法主动脉血管平滑肌细胞慢性血管并发症 ACTIN 细胞模型正常大鼠

抗果蝇Trio蛋白抗体的制备及鉴定: 2008年; 目的:制备兔抗果蝇Trio蛋白的抗体。方法:以RT-PCR扩增Trio的1 173 bp的基因片段并克隆入pET28a(+)和pGEX-4T-1(His)6C表达载体中,表达并纯化Trio-His、Trio-GST融合蛋白。用纯化的Trio-His融合蛋白免疫家兔产生抗Trio的抗体,用Trio-GST亲和层析法进行纯化并采用Western blot法检测抗体生物学活性。结果:表达的Trio-His蛋白以包涵体的形式存在,用His亲和层析法分离纯化后得到较纯的Trio-His融合蛋白,以纯化的Trio-His免疫家兔制备的兔抗Trio的抗体,经Western blot分析显示该抗体可与果蝇S2细胞Trio特异性结合。结论:获得具有良好特异性的兔抗Trio抗体,为进一步研究Trio的功能奠定了基础。; 缪峰吕雯雯丁洁袁榴娣; 关键词：原核表达抗体制备

新型融合蛋白hIFNα1-CB表达载体的构建被引量：1: 2002年; 目的 :构建人干扰素α1(hIFNα1)和抗菌肽B(CB)的融合蛋白表达质粒。方法 :将人工改造后的hIFNα1基因与CB基因按正确的阅读框架融合 ,并定向克隆至大肠杆菌表达载体pBV2 2 0。结果 :经PCR检测及质粒的限制性分析 ,所挑选的Amp抗性菌落均含有插入了hIFNα1 CB融合基因的重组质粒pHC。结论 :以pBV2 2 0为载体 ,成功构建了hIFNα1 CB融合蛋白表达质粒pHC。; 邱定红毛晓华徐蘅李新荣缪峰张林元; 关键词：质粒干扰素Α 重组融合蛋白质类抗病毒药抗肿瘤药

基因工程原理与技术教学改革初探被引量：6: 2015年; 基因工程是现代生命科学的核心,《基因工程原理与技术》是医学院生物工程专业本科生必须掌握的一门理论性和实践性都较强的基础课程。为更好地培养全球化、复合型、具有较高综合素质和较强国际视野的本科生,本课题组从2013年开始对《基因工程原理与技术》这门课程实行教学改革探索,取得了一定的成效。本文从教学内容优化、教学方法和手段革新、实验设计变革等几个方面对《基因工程原理与技术》课程的教学改革探索进行初步总结。; 孔岩赵金凤缪峰袁榴娣; 关键词：基因工程教学改革

胶质细胞源性神经营养因子在链霉菌的分泌表达: 2002年; 目的 :构建胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)表达质粒 ,实现GDNF在链霉菌的分泌表达。方法 :从人基因组中克隆GDNF成熟肽编码基因 ,与链霉菌酪蛋白酶melC1启动子和信号肽DNA序列融合。melC1信号肽DNA与GDNF融合后无翻译框架的漂移 ,且GDNF的转录受控于melC1启动子。融合基因与链霉菌载体pIJ70 2连接并转化S .lividansTK2 4原生质体。结果 :经抗性筛选及限制性酶切分析获得重组质粒pIJMG。携带pIJMG的链霉菌培养上清存在约 15 0 0 0的特异性表达带 ,与GDNF成熟肽的分子质量吻合。结论; 毛晓华丁蕾李震缪峰张鉴堂; 关键词：胶质细胞源性神经营养因子链霉菌分泌

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缪峰