白永延
- 作品数:43 被引量:563H指数:14
- 供职机构:中国科学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学自然科学总论更多>>
- 生长素结合蛋白cDNA的克隆及其在烟草中的表达被引量:1
- 1997年
- 基于拟南芥内质网生长素结合蛋白基因的cDNA序列,设计合成了Ap5和Ap3两个引物,应用RT-PCR技术扩增了拟南芥的ABP基因。将该基因克隆在植物表达载体p35SSIN的35S启动子和Nos3’端之间,得到植物表达载体p35SE。通过农杆菌个导的方法对烟草SR1进行了转化,由分子杂交等检测证明,生长素结合蛋白基因已在烟草中表达,同时转基因烟草后代对生长素的敏感性明显增加。
- 张洪霞白永延许智宏
- 关键词:生长素结合蛋白CDNA转基因植株克隆烟草
- 稻瘟病菌侵染诱导的水稻早期反应基因的cDNA片段克隆与序列分析被引量:17
- 1999年
- 以稻瘟病菌感染水稻,利用mRNA 差异显示技术分离了稻瘟病菌侵染诱导的水稻早期反应基因ER1(early responsive gene) 的cDNA 片段。Northern blot 分析表明,ER1 基因在稻瘟病菌侵染水稻叶片6 h 后开始表达,8 h 最强,10 ~12 h 开始减弱,16 h 消失。Southern blot 分析表明,ER1 基因属于水稻基因组。对ER1 基因片段(219 bp) 进行了克隆和序列分析。经查询,在GenBank 中没有与ER1 同源的基因序列。
- 周建明朱群白永延
- 关键词:水稻稻瘟病菌MRNA
- 全文增补中
- 双向启动子的分离及嵌合基因拼接的优化研究被引量:1
- 1989年
- 从带有 pTi15955 TR-DNA 片段的克隆 pAR17出发,经一系列 DNA 重组步骤,我们分离到了—490bp 的双向启动子 DNA 片段。DNA 顺序分析表明,与 pTiAch5一样,pTi15955TR-DNA 的基因1′和基因2′启动子皆具典型的 TATA 盒,它位于起始密码上游90bp 处,但基因1′和2′皆无典型的 CAAT 盒。转录起始可能在基因1′和2′的起始密码上游60bp 处。为了研究嵌合基因5′端启动子的优化拼接以及3′末端结构方向对嵌合基因表达的影响,我们对分离的双向启动子2′进行了改造,将 BamHI 酶切位点移到了起始密码 ATG 处,并构建了三种萤光素酶嵌合基因,经植物基因工程载体 pGV3850,分别将这三种嵌合基因引入了烟草,结果表明,经改造的双向启动子2′要比未改造的强,胭脂碱合成酶基因3′末端当以反向与萤光素酶结构基因相拼时大大降低其基因在转化烟草中的表达。
- 朱群白永延罗士韦
- 关键词:双向启动子嵌合基因基因表达
- 高等植物水分胁迫诱导的基因及其表达调控被引量:15
- 1999年
- 高等植物在生长发育过程中经常受到恶劣环境的胁迫,很多环境胁迫如干旱、盐渍、低温和高温等都表现为不同程度的对植物体内水分状况的影响,因此,水分胁迫是高等植物面临的主要环境问题。在长期进化过程中,高等植物通过一系列的生理或发育的变化来响应环境的水分胁迫。高等植物对水分胁迫的耐受性在一定程度上具有相同的分子基础。
- 周建明朱群白永延汤章城
- 关键词:植物水分胁迫基因表达
- 在烟草中酵母脯氨酸基因B的转化(英文)被引量:4
- 1993年
- 重组质粒PYP22带有一从酵母基因文库分离到的4.6 kb DNA片段,此片段含有脯氨酸(Pro)合成途径必须的基因B(ProB)。用BamHⅠ酶解PYP22,回收ProB基因,重组入pGA471的Bg Ⅲ切口,形成含有ProB的双质粒载体PBYU4。pBYU4含有能在植物中表达的新霉素磷酸转移酶基因Ⅱ(NPT—Ⅱ),可做转基因植株的筛选标记。借助于辅助质粒pRK2013,pBYU4经过三亲结合转移到农杆菌LAB4404,在含有四环素12.5μg/ml、链霉素100μg/ml和利福平50μ/ml加的AB培养基上筛选出转接合子。提取筛选得到的农杆菌总DNA,用ECoR 1酶解,1%琼脂糖电泳,Southern转移DNA到硝酸纤维素膜上。用α—^(32)P-dCTP标记的ProB片段,与转移好的硝酸纤维素进行Southern杂交。Southern杂交证明含有ProB基因的农杆菌,在加有乙酸丁香酮(acetosyringone)125μg/ml和章鱼碱(octopine)125μg/ml的MS液体培养基中,诱导过夜。用叶圆片法转化革新1号烟草(Nicotana tabacum var.Gexin No.1),叶片与菌液共培养2~5d。从叶片分化再生出的芽转移到含有卡那霉素(K_m)80μg/ml、6—苄基腺嘌呤(6BA)1μg/ml和头孢氨噻腭钠(Cef)500μg/ml的MS培养基,筛选3周,将绿色的芽转移到含l%NaCl,6BA 1μg/ml和Cef 500μg/ml的MS培养基,进行复筛。测定经过这样筛选的再生芽的NPT—Ⅱ活性。
- 袁朝兴白永延匡达人
- 关键词:烟草酵母
- 稻瘟病菌侵染水稻的机理被引量:17
- 1999年
- 深入了解水稻与稻瘟病菌相互作用的分子机理对稻瘟病防治是重要的,本文对这方面的研究进展作了阐述。
- 周建明朱群白永延
- 关键词:稻瘟病菌水稻
- 全文增补中
- 外源GUS基因在PEG介导的花椰菜原生质体中的瞬间表达被引量:10
- 1994年
- 为了将外源基因导入花椰菜原生质体获得转基因植株,本文研究了PEG介导的外源基因在花椰菜下胚轴原生质体中的瞬间表达。(1)20%PEG将质粒pBI221导入原生质体后GUS表达比13%PEG导入的高,但易造成原生质体损伤。(2)热激处理增强表达,但在随后的培养过程中易造成原生质体降解。(3)原生质体状况对表达有重要影响,5d龄下胚轴原生质体比8d龄的表达强。(4)不同质粒及启动子表达强度不同。质粒pKIWI101比pBI221表达强3倍左右。
- 杨仲南许智宏白永延卫志明
- 关键词:花椰菜原生质体PEG
- 光对拟南芥微管蛋白基因表达的负调节作用被引量:2
- 1998年
- 白光处理后拟南芥白化苗中的微管蛋白基因mRNA都有不同程度降低。白化苗中TUBI的mRNA量很高,连续用白光处理由化苗2-6h,TUB1mRNA降低。分析拟南芥幼苗根、下胚轴中的RNA发现根中TUBI基因转录水平不受白光影响。具子叶的下胚轴中TUB1基因转录水平受白光抑制。白先对TUB1基因表达的负调节具有组织特异性。
- 曹湘玲白永延
- 关键词:拟南芥微管蛋白基因表达白光
- 豇豆原生质体培养中体细胞胚胎发生和植株再生被引量:5
- 1993年
- 从豇豆(Vigna Sinensis Endl.)未成熟子叶分离原生质体,纯化后的产量为1.5×10~6-2×10~6/g fr.wt。在MS、B_5和KM_(8P) 3种培养基中,豇豆未成熟子叶原生质体培养以MS为优,细胞分裂频率为25.1%-30.7%。培养20—30天后,形成肉眼可见的小愈伤组织。在MS液体培养基中形成的愈伤组织转移到MSB(即MS无机盐+B_5维生素)+2 mg/L2,4-D+0.5mg/L BA培养基上继代培养,获得胚性愈伤组织。将胚性愈伤组织转移到MSB+1.0 mg/L 2,4-D+0.25 mg/L BA液体培养基中建立悬浮培养。随后,悬浮培养的胚性愈伤组织再转移到MSB+0.1 mg/L IAA+0.5 mg/L KT琼脂培养基上,经光照培养7-10天后,可观察到大量体细胞胚的形成。部分体细胞胚可发育到子叶期。子叶胚转入新鲜的MSB+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L IAA培养基后,迅速萌发生长成具真叶的小植株或小苗。
- 李学宝许智宏卫志明白永延
- 关键词:豇豆原生质体培养体细胞胚发生
- 高等植物核基因结构研究进展
- 1989年
- 本文较系统地介绍了高等植物核基因的5′末端和3′末端的结构研究新进展,并着重介绍了增强子结构及其对基因表达的调控作用。
- 朱群白永延
- 关键词:高等植物基因结构细胞核