王金晶
- 作品数：18 被引量：133H指数：7
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：军队医药卫生科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝实质细胞和肝窦血管内皮细胞体外共培养的实验研究被引量：6
- 2005年
- 将小鼠肝实质细胞与肝窦血管内皮细胞共同培养。结果培养初期肝实质细胞均匀分布,随培养时间延长其逐渐在内皮细胞成片的区域聚集成团,而在内皮细胞很少的地方几乎没有肝实质细胞。证实二者共培养对保持肝实质细胞功能和活性有重要作用。
- 王金晶徐迎新
- 关键词：肝细胞共培养肝组织工程
- 血管组织工程实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的获得血管组织工程的实验依据。方法获取大鼠血管内皮(VEC)和平滑肌细胞(VSMCs),进行培养扩增,然后接种到血管组织工程支架上;将VSMCs-血管支架移植到大鼠体内,观察移植后大鼠活体和组织病理反应。结果培养的细胞符合血管种子细胞的形态特征;VSMCs接种到血管组织工程支架上获得成功;VSMCs-血管支架移植到大鼠体内10d后,支架被纤维组织包裹,支架内见VSMCs生长,支架中央管腔存在,但与正常血管结构有很大差别,而且不具备血管功能。结论利用血管组织工程支架构建的大鼠VSMCs-血管支架移植到大鼠皮下是可行的;人工构建血管具有类似血管雏形,但尚不具备血管的正常结构。
- 尹太徐迎新吴仕和王金晶鄂玲玲李荣李瑞新张西正
- 关键词：血管壳聚糖血管移植
- 基质条件对骨髓间充质干细胞定向肝细胞分化率的影响被引量：3
- 2005年
- 曹亮胡祥安伟德刘巨超王金晶徐迎新
- 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞多聚赖氨酸胶原蛋白
- 白细胞介素-1受体相关激酶1蛋白过表达对细菌脂蛋白耐受的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨细菌脂蛋白（BLP）信号转导分子Toll样受体2（TLR2）和白细胞介素-1受体相关激酶1（IRAK-1）与BLP耐受发生的关系。方法在人胚肾293（HEK293）细胞中过表达TLR2以及IRAK-1蛋白，利用蛋白质免疫印迹法和双荧光素酶报告基因检测实验观察其对BLP耐受的影响。结果以BLP刺激稳定转染并表达TLR2的HEK293细胞可以剂量依赖性地诱导NF—xB活化，而且BLP预处理HEK—TLR2细胞可诱导BI，P耐受的发生。在HEK—TLR2细胞中过表达IRAK-1可以剂量依赖性地增加NF—KB的活化并逆转BLP耐受：转染前BLP活化组与耐受组的NF—κB活化程度分别为0．3294±0．010和0．168±0．010；转染0．02／μgIRAK-1质粒后活化组与耐受组的NF—κB活化程度分别为0．493±0．010和0．427±0．035，均比转染前明显升高，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论HEK293细胞中过表达TLR2不能阻止BLP耐受的诱导，但是在HEK—TLR2细胞中过表达IRAK-1可部分逆转BLP耐受，提示IRAK-1蛋白表达水平的变化在BLP耐受发生中起关键作用；IRAK-1可作为细菌感染和脓毒症治疗的重要靶点。
- 李崇辉王金晶高丽杰汪江淮黄志强
- 关键词：信号转导
- 骨髓间充质干细胞定向肝细胞样分化的研究被引量：37
- 2004年
- 目的 探讨骨髓间充质干细胞定向肝细胞样分化的诱导条件 ,为肝组织工程提供新的种子细胞来源。方法 分离小鼠骨髓间充质干细胞 ,在特定肝细胞培养液中用肝细胞生长因子(HGF)和表皮细胞生长因子 (EGF)定向诱导。在倒置显微镜下观察细胞形态 ,应用免疫荧光法鉴定细胞性质。结果 骨髓间充质干细胞经HGF和EGF诱导 7d后变为肝细胞样圆形 ;2周后免疫荧光染色可见分化后细胞表达肝细胞标志物CK 18和白蛋白。结论 骨髓间充质干细胞在特定条件诱导下可以向肝细胞方向分化。有可能作为肝组织工程的种子细胞来源。
- 徐迎新王文杰宋旭华王金晶冯庆玲
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 骨髓间充质干细胞定向分化肝细胞及肝内移植研究被引量：25
- 2005年
- 目的观察体外诱导骨髓间充质干细胞分化及肝纤维化形成环境中移植情况。方法首先行骨髓间充质干细胞提取、分离和培养,加入肝细胞生长因子(HGF,20μg/L)和表皮生长因子(EGF,1.5mg/L)诱导定向分化。肝纤维化形成的大鼠随机分成2组,每组10只。使用5溴脱氧尿苷(BrdU)标记诱导的骨髓间充质干细胞,经门静脉向肝纤维化形成的SD大鼠肝脏移植,对照组用BrdU标记未经诱导的骨髓间充质干细胞。2周后通过免疫组织化学方法检测大鼠肝脏标记细胞的分布及BrdU+/ALB+细胞数量。结果体外诱导骨髓间充质干细胞定向分化的细胞CK8及ALB表达阳性。移植2周后大鼠肝脏均可检测到BrdU标记细胞,与对照组相比诱导后骨髓间充质干细胞组BrdU+/ALB+细胞数较多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论经体外诱导骨髓间充质干细胞能分化为肝细胞,移植在大鼠肝纤维化形成环境中,白蛋白表达细胞数更多。
- 安伟德胡祥曹亮王金晶刘巨超李力宋旭华徐迎新
- 关键词：定向分化肝细胞肝内移植
- 体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞定向分化肝样细胞被引量：2
- 2005年
- 目的观察骨髓间充质干细胞体外诱导分化为肝样细胞。方法自大鼠的股骨中提取骨髓细胞,利用 Percoll 法行骨髓间充质干细胞分离、纯化。取第3代的骨髓间充质干细胞,应用肝细胞生长因子(HGF)20ng/ml 表皮生长因子(EGF)1.5μg/ml 联合诱导。两周后免疫荧光染色及逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)鉴定诱导后细胞白蛋白的 mRNA 的表达。结果诱导分化一周骨髓间充质干细胞变为圆形,两周后免疫荧光染色可见肝细胞标志物 CK18和白蛋白表达,RT-PCR 检测有白蛋白的 mRNA 的表达。结论骨髓间充质干细胞体外诱导能定向分化为肝样细胞。
- 安伟德胡祥曹亮王金晶李力宋旭华刘巨超徐迎新
- 关键词：细胞定向分化逆转录-多聚酶链反应体外诱导分化细胞标志物CK18
- PKH26标记原代大鼠肝细胞的实验研究
- 2009年
- 目的建立一种简单有效的肝细胞标记方法。方法原代分离的成年大鼠肝细胞,按PHK26标记程序进行标记。标记的肝细胞与胶原凝胶复合后植入体内观察植入细胞的成活情况。采用荧光显微镜对标记的细胞进行观察。结果肝细胞经PKH26染料标记后,荧光显微镜下可见红色荧光均匀的分布在整个细胞膜上。皮下植入后1周,植入的肝细胞成活,可通过标记的荧光直接探测到。连续切片显示这些细胞在成三维立体生长,形成类肝样的组织。结论用PHK26对肝细胞进行荧光标记提供了一种追踪细胞转归的方法。
- 王金晶赵云山
- 关键词：PKH26大鼠肝细胞肝移植
- 预制微血管样结构凝胶的植入研究被引量：8
- 2005年
- 目的观察含有微血管样结构的凝胶块植入体内后与体内血液循环的连通情况,以及血管内皮细胞生长因子(VEGF165)对凝胶血管化的影响。方法在纤维蛋白凝胶中以VEGF165诱导小鼠微血管内皮细胞(MVEC)形成微血管样结构,设无VEGF165为对照,将制作的凝胶块用有微孔的塑料薄膜包裹后植入小鼠肠系膜间,2周后取样进行组织学切片,苏木素伊红(HE)染色和免疫组织化学染色,图像分析并测量血管化面积。结果凝胶植入2周见实验组凝胶周围有丰富的新生血管网经过塑料薄膜的小孔与凝胶内血管相连,对照组表面新生血管较少。组织学切片(HE染色)见VEGF组血管化总面积约为对照的50倍(P<0.01)。实验组新生血管直径10～100μm,分布于凝胶中心和周边部位;而对照组新生血管最大直径<20μm,主要分布于凝胶的周边。结论含微血管样结构的预制凝胶植入后能形成具有血流灌注的微血管网。纤维蛋白凝胶在此过程中充当了一种较为合适的细胞外基质的作用,而VEGF在这一过程中起到一种诱导、刺激和强化作用。
- 徐迎新吴仕和阎锡蕴宋旭华尹太王金晶李荣
- 关键词：植入体血液循环血管内皮细胞生长因子纤维蛋白凝胶
- 肝脏部分切除对骨髓间充质干细胞定向肝细胞分化的影响
- 2006年
- 目的:探讨肝脏损伤对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向肝细胞诱导分化的影响。方法:昆明系小鼠分两组,分别行肝脏2/3切除和开关腹手术,分别于术后12 h,24 h,36 h,48 h,72 h后提取MSCs,取第3代的MSCs,流式细胞仪鉴定MSCs后,应用HGF联合EGF诱导,20 d后免疫荧光染色鉴定肝细胞标志物ALB,CK8,计数ALB阳性细胞数量和同视野细胞总数,计算阳性率。结果:诱导分化20 d,两组均有ALB、CK8表达,24 h时间点,实验组阳性率(10.41±0.11)%,对照组阳性率为(9.83±0.32)%,实验组与对照组阳性率比较差异有显著性意义;其余时间点实验组和对照组阳性率比较差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:肝脏损伤后24 h,提取MSCs定向肝细胞的阳性率高。
- 曹亮胡祥徐迎新安伟德刘巨超李力宋旭华王金晶
- 关键词：肝切除术间充质干细胞肝细胞细胞分化
