王祥宁 作品数:161 被引量:473 H指数:12 供职机构: 云南省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 云南省应用基础研究基金 云南省科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 经济管理 医药卫生 更多>>
一种日光温室内获得高质量百合鳞片扦插籽球的方法 本发明提供了一种日光温室内获得高质量百合鳞片扦插籽球的方法,其特征在于它包括以下步骤:1)百合种球破休眠处理成鳞片,2)鳞片消毒处理,3)鳞片促籽球形成、生长,4)鳞片扦插,5)鳞片培养成籽球,6)籽球破休眠处理、种植,... 杜文文 崔光芬 段青 李想 马璐琳 贾文杰 王祥宁中国桔梗PgF3’5’H及其突变型基因在毕赤酵母中的表达差异分析 2021年 F3’5’H是催化合成蓝色花色素的关键酶,F3’5’H蛋白序列中一段编码9个氨基酸的特殊序列区段可能与F3’5’H催化合成的蓝色花色素有关,但该特殊序列区段的催化功能和作用机制尚不清楚。为了探究PgF3’5’H中,该特殊序列结构的催化功能及作用机制,本研究通过重叠延伸PCR技术去除PgF3’5’H编码的9个氨基酸特殊序列区段,获得缺失突变型基因;将PgF3’5’H野生型及其突变型基因同时导入毕赤酵母;通过qRT-PCR检测野生基因及其突变基因在酵母中转录水平基因表达量的差异;通过SDS-PAGE检测PgF3’5’H野生型基因及其突变型基因在酵母中的合成蛋白量的差异。qRT-PCR分析结果显示PgF3’5’H野生型基因较其突变型在酵母中呈现更高的表达量;SDS-PAGE电泳结果显示重组子分泌生成了分子量大小约为52.0 k D的目标蛋白,且野生型蛋白量相比其突变型蛋白量高。因此,推测Pg F3’5’H蛋白序列中9个氨基酸的特殊序列与调控该基因在RNA和蛋白水平的表达量有关,进而可能影响该基因的催化功能。研究结果将为观赏植物蓝色花色形成分子机制及蓝色花色分子育种提供一定研究基础。 马璐琳 段青 段青 杜文文 崔光芬 贾文杰 王祥宁关键词:毕赤酵母 基因表达 蛋白表达 泸定百合镰刀菌枯萎病抗性相关基因的筛选与克隆 本研究以泸定百合(Lilium Sargentiae Wilson)为材料,构建其组培苗经百合尖孢镰刀菌侵染后的叶片SSH文库,从中筛选镰刀菌枯萎病抗病相关基因。从正向SSH文库中随机挑取300个单克隆测序后得到280条... 马璐琳 张艺萍 崔光芬 段青 贾文杰 杜文文 王祥宁关键词:镰刀菌枯萎病 SSH文库 抗病基因 CAT基因 国内外花卉种植精细灌溉技术的运用及发展趋势 被引量:3 2009年 花卉种植在云南省的农业现代化产业发展进程中扮演着重要角色,作为特色产业越来越受到政府的重视和社会的关注。而花卉种植精细灌溉技术的运用是提升花卉产品质量的关健因素。该技术在发达国家已广泛推广运用,在中国,由于多种因素限制,该技术还处于起步运用阶段。分析了花卉种植精细灌溉技术在中国的运用及发展趋势,强调该技术对加快花卉产业发展、发展高品质花卉、促进花卉企业增收的重要性。 黎启江 卢永志 王祥宁 王家金关键词:花卉 钝裂银莲花UBQ内参基因及其引物与应用 本发明涉及钝裂银莲花<I>UBQ</I>内参基因及其引物与应用,属于基因工程技术领域。所述<I>UBQ</I>内参基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该<I>UBQ</I>基因可做为对钝裂银莲花以及与其亲缘关系... 马璐琳 王继华 段青 贾文杰 崔光芬 王祥宁 杜文文 李慧敏文献传递 泸定百合过氧化氢酶(Ls-Cat1)基因的克隆及表达分析 被引量:7 2017年 过氧化氢酶(CAT)参与植物的多种胁迫反应。为探究百合中的CAT基因与百合抗镰刀菌病害的关系,根据百合尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)诱导的泸定百合(Lilium sargentiae Wilson)SSH文库中筛选到的CAT基因中间序列片段,通过RACE结合RT-PCR技术从泸定百合中克隆到1个CAT基因全长c DNA序列,该基因全长1 743 bp,包含1个1 479 bp的开放阅读框,编码492个氨基酸,命名为LsCat1(Gen Bank登录号:KU355272)。序列比对分析表明,Ls-Cat1编码的氨基酸序列中包含已确定的CAT保守基序。系统进化树分析显示,Ls-Cat1与其它物种CAT基因编码的氨基酸序列具有较高的相似性。qPCR结果显示,Ls-Cat1经百合镰刀菌诱导后明显上调表达,推测该基因可能与百合抗镰刀菌病害相关。本研究结果为揭示百合对镰刀菌枯萎病的抗病分子机制提供了一定的理论依据。 马璐琳 崔光芬 王祥宁 贾文杰 段青 杜文文 王继华关键词:过氧化氢酶基因 基因表达 百合育性与花药发育过程中激素和内源物质含量及能量代谢酶活性的关系 被引量:8 2019年 为揭示百合雄性不育发生与其花药内源激素含量、几种内源物质含量和能量代谢酶活性变化的关系,该研究利用高效液相色谱法、串联质谱法和比色法,测定了可育系和不育系花药发育关键时期的激素、可溶性糖、可溶性蛋白、丙二醛、脯氨酸含量和COD及ATP能量代谢酶活性,分析激素含量、各激素间比值、内源物质含量和能量代谢酶活性对百合雄性不育的影响。结果表明:(1)在百合花药造孢细胞期到四分体期,花药内源激素含量、内源物质含量及能量代谢酶活性变化在不育系与可育系间均存在差异。其中,不育系花药的生长素(IAA)含量在发育的各阶段均高于可育系;ZR和GA4含量在花粉母细胞期不育系与可育系相差不大,但到四分体期不育系中的含量低于可育系;ABA含量在不育系四分体期出现盈积;JA含量在不育系的花粉母细胞期低于可育系,而在四分体期高于可育系。(2)花药内源物质中可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量表现为可育系均高于不育系,但不育系的丙二醛含量在四分体期显著高于可育系。(3)COD和ATP能量代谢酶活性在花药发育的各阶段均是可育系高于不育系。研究认为,在百合不育系花药发育关键时期(花粉母细胞期到四分体期),其IAA含量增加,ABA水平提高,GA4和ZR含量降低,影响了花药内源物质和能量的正常代谢,这可能是导致百合花药中花粉发育受阻、形成败育的原因。 贾文杰 郑洁 崔光芬 马璐琳 段青 杜文文 王祥宁关键词:百合 雄性不育 一种泸定百合HIS内参基因及其引物和应用 本发明提供了一种泸定百合HIS内参基因及其引物和应用,属于基因工程领域。所述泸定百合HIS内参基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供一个长为402bp的泸定百合HIS基因序列,可作为对泸定百合镰刀菌枯萎... 马璐琳 段青 崔光芬 贾文杰 杜文文 李想 王祥宁 王继华钝裂银莲花花色素合成相关基因qRT-PCR内参基因的筛选 被引量:12 2021年 为了筛选适合于钝裂银莲花类黄酮/花青素合成途径中相关基因qRT-PCR表达分析时的内参基因,根据钝裂银莲花蓝/白不同花色花器官组织的转录组测序结果,选取了多聚泛素酶基因(polyubiquitin,UBQ)、微管蛋白基因(β-tubulin,β-TUB)、水通道蛋白基因(aquaporin,AQP)、肌动蛋白基因(actin,ACT)、甘油醛-3-磷酸-脱氢酶基因(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、组蛋白基因(histone,HIS)、转录延伸因子基因(elongation factor 1-β,EF-1β)和60S核糖体蛋白基因(60S ribosomal protein L13-1,RPL13)等8个常用内参基因作为候选基因,以钝裂银莲花的叶片、茎杆和蓝/白色花器官等不同组织为试验材料,通过qRT-PCR检测这8个候选内参基因的表达情况,利用geNorm、NormFinder和BestKeeper等软件对其稳定性进行分析评价。结果表明:8个候选内参基因中,UBQ表现最稳定,而β-TUB相对稳定性最差。以最稳定的UBQ为内参对钝裂银莲花类黄酮/花青素合成途径中16个相关基因表达情况进行qRT-PCR分析,结果与前期转录组测序结果一致。UBQ为钝裂银莲花花色素合成途径相关基因表达分析的最适内参基因。 马璐琳 段青 段青 崔光芬 杜文文 贾文杰 王祥宁 王继华关键词:实时荧光定量PCR 内参基因 云南省阿子营百合花的生产与发展 被引量:1 2006年 阿子营百合是近几年发展起来的中国百合花区域性品牌花卉,分析了阿子营百合的发展过程及存在问题,提出阿子营百合持续发展之路是稳定夏季百合花生产,解决宿根栽培的关键技术;抓好百合花周年生产和重要节日定向生产,攻克调控产花期栽培的关键措施。更要重视生产与市场结合,搞好发展规划,避免盲目生产,加强基础条件建设,加大技术引进和改造,力求解决实际问题。 熊丽 王祥宁 吴学尉 屈云慧 王其刚 陈敏关键词:夏季生产 花期调控