王淼 作品数:21 被引量:83 H指数:5 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 “首都临床特色应用研究”专项 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
不同部位血管舒缩反应性与多不饱和脂肪酸的血管活性作用分析 2024年 目的评价小鼠不同部位血管床的收缩和舒张反应性,比较多不饱和脂肪酸花生四烯酸(AA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的血管活性作用。方法分离小鼠股动脉(FA)、主动脉(AO)、肠系膜动脉(MA)、冠状动脉(CA),用微血管张力仪评价其对苯肾上腺素(PE)、U46619的收缩反应性和对乙酰胆碱(ACh)的舒张反应性,拟合剂量-效应曲线,对内皮功能良好的血管进行评价,比较AA、EPA、DHA的作用。结果各血管对U46619的收缩程度比对PE的收缩程度大,PE不收缩CA。以U46619作预收缩剂,比较各血管对ACh的舒张反应,发现MA的舒张程度最大,CA的舒张最不敏感。3种多不饱和脂肪酸诱导CA舒张的程度最小,诱导MA舒张的程度最大、最敏感。与AA和EPA相比,DHA诱导各血管的舒张作用更敏感。结论小鼠不同部位血管床的舒缩反应性有明显差异,各血管均显示对3种多不饱和脂肪酸的舒张反应,其中对DHA的舒张效应最敏感。 吴逸飞 杨建峰 陈虹 王淼关键词:多不饱和脂肪酸 血管舒张 花生四烯酸 二十碳五烯酸 18F-PSMA PET/CT联合多参数磁共振对前列腺癌分级的诊断价值 被引量:3 2022年 目的探讨联合应用18F-前列腺特异性膜抗原(PSMA)PET/CT和多参数磁共振(mpMRI)检查对不同级别前列腺癌的诊断预测能力。方法回顾性分析2018年9月至2021年5月北京医院收治的49例经穿刺活检确诊为前列腺癌患者的病例资料,中位年龄68(64~75)岁。中位PSA水平14.74(7.75~24.19)ng/ml。穿刺前均行mpMRI检查。穿刺病理的国际泌尿病理协会(ISUP)分级分组1组6例(12.2%),2组16例(32.7%),3组12例(24.5%),≥4组15例(10.9%)。将患者分为ISUP分级分组高级别组(≥4组)和低级别组(1~3组),两组的中位年龄分别为65(62~76)岁和71(65~74)岁,中位PSA水平分别为15.11(6.63~42.86)ng/ml和12.31(7.94~18.25)ng/ml,差异均无统计学意义(P=0.334,P=0.448)。确诊前列腺癌后4周内均行18F-PSMA PET/CT检查。记录患者PET/CT检查主要病灶的最大标准化摄取值(SUVmax)和mpMRI检查主要病灶的最低表观弥散系数(ADCmin),并计算SUVmax/ADCmin比值,分析各参数与ISUP分级分组的相关性,比较不同级别分组的参数差异。通过受试者工作特征(ROC)曲线分析各参数对不同级别前列腺癌的诊断能力。结果本研究49例的ADCmin为(0.57±0.16)×10^(-3)mm^(2)/s,SUVmax为15.30±12.54,SUVmax/ADCmin比值为(29.69±23.72)×10^(3)。高级别组和低级别组的ADCmin分别为(0.54±0.20)×10^(-3)mm^(2)/s和(0.58±0.14)×10^(-3)mm^(2)/s,差异无统计学意义(P=0.411);SUVmax分别为21.97±14.83和12.36±10.30,SUVmax/ADCmin比值分别为(45.07±27.02)×10^(3)和(22.91±10.30)×10^(3),差异均有统计学意义(P=0.012,P=0.002)。SUVmax(r=0.501,P<0.001)和SUVmax/ADCmin比值(r=0.527,P<0.001)与ISUP分级分组呈正相关,ADCmin与ISUP分级分组呈负相关(r=-0.296,P=0.039)。ROC曲线结果显示,SUVmax/ADCmin比值、SUVmax、ADCmin的曲线下面积(AUC)分别为0.749、0.731、0.615。以SUVmax/ADCmin比值37.23×10^(3)为界值,诊断前列腺癌的敏感性和特异性分别为73.3%和85.3%。结论与单独应用PET/CT或mpMRI检查相比,联合18F-PSMA P 王淼 王淼 侯惠民 王萱 朱辉 李春媚 李春媚 刘辰 李慧 张伟 刘龙腾 张亚群 张亚群 杨志 王建业关键词:前列腺肿瘤 前列腺特异性膜抗原 肿瘤分级 喷昔洛韦对宫颈癌细胞系抑制作用的研究 被引量:3 2001年 目的:喷昔洛韦9位取代鸟嘌呤化合物,在体内外对单纯疱疾病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)、Ⅱ型(HSV-Ⅱ),带状疱疹病毒(VIV)有良好的抑制作用。我们从基础研究入手,在细胞水平上探讨喷昔洛韦对HPV(人乳头瘤病毒)相关细胞系的作用,为扩大此药的治疗适应症提供新的思路。方法:采用不同来源的宫颈癌细胞系CaSki(HPV16型阳性的人宫颈鳞状上皮细胞系)、Hela(HPV18型阳性的人宫颈腺上皮细胞系)、 N(由 HPV16 E6/e7基因和 HSV的 N片断共转染得到的恶性转化宫颈鳞状上皮细胞系)和2BS(人正常纤维细胞)及原代培养的正常人鳞状上皮细胞,加入不同浓度的喷昔洛韦,测定不同细胞在喷昔洛韦药物作用下的半数致死浓度(ED50),喷昔洛韦对上述细胞的ED50分别是2.5 × 10-3moL·L-1, 7·5 × 10-3mg·L-1, 25 × 10-3mg·L-15.0 × 10-3mg·L-1, 15.0 × 10-3mg·L-1。选择合适的喷昔洛韦浓度加到各种细胞系中,在不同时间下,用倒置显微镜观察细胞的形态结构改变及测定了各种细胞的生长速度(生长曲线),用透射电子显微镜观察了细胞的超微结构变化。结果:选择 7.5 ×10-? 陈连凤 王淼 王立良 司静懿 刘跃华 王家璧关键词:宫颈癌细胞系 药物治疗 HPV 重组人乳头瘤病毒6型病毒样颗粒诱导中和抗体 被引量:6 2003年 为研究重组病毒样颗粒 (virus -likeparticle ,VLP)免疫血清的抗感染作用 ,用重组杆状病毒在昆虫细胞中表达制备的人乳头瘤病毒 6型 (humanpapillomavirustype 6 ,HPV - 6 )L1VLP和HPV - 6L1+L2VLP免疫BALB/c小鼠 ,获得抗血清 ,ELISA法测定抗体滴度 ,在细胞水平和裸鼠异源组织移植模型中评价了免疫血清的中和病毒抗感染作用。VLP诱导了高滴度 ( >1∶10 0 0 0 )的血清抗体 ,抗血清可以特异地阻断人胚上皮细胞对VLP的摄入 ,并且能抑制从尖锐湿疣活检标本提取的HPV对人上皮组织的感染。重组HPV - 6VLP免疫小鼠诱导的血清抗体具有中和病毒、抑制感染的作用。提示重组VLP可以用于研制HVP预防性疫苗。 王淼 陈连凤 许雪梅 王立良 陈建国 刘士德 司静懿 宋国兴关键词:人乳头瘤病毒6型 病毒样颗粒 中和抗体 人乳头瘤病毒的病毒样颗粒的生产方法 本发明提供了一种利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备重组人乳头瘤病毒的病毒样颗粒(VLP)的方法,其中该病毒衣壳蛋白L2蛋白可以提高衣壳蛋白L1蛋白的表达量及病毒样颗粒的产量。本发明还涉及制备的重组病毒样颗粒在人乳头瘤病毒... 王淼 宋国兴文献传递 人乳头瘤病毒6型基因组晚期区序列分析 被引量:4 2001年 目的初步分析我国尖锐湿疣患者病变组织分离的乳头瘤病毒6型(HPV-6)基因组晚期区编码序列变异情况。方法采用重叠PCR设计,分别从HPV-6阳性尖锐湿疣患者病变组织扩增出主要衣壳蛋白L1和次要衣壳蛋白L2基因片段,插入质粒载体克隆,经测序、拼接获得HPV-6基因组晚期区序列。结果得到的两条长2869bp的HPV-6晚期区序列(GenBank序列索取号AY015006,AY015008)均具有完整的L1和L2开放阅读框(ORF),与原型序列比较,在L1和L2ORF中共有9个核苷酸变异,其中错义突变4个(有3个发生在L2ORF,1个在L1ORF)。分子进化分析表明,克隆的晚期区序列属于HPV-6b亚型。结论HPV-6基因组晚期区编码序列非常保守(核苷酸变异率小于0.28%),并且L1ORF比L2ORF更为保守,其中位于L1ORF中7081位的A→G和7099位的G→A两处共有突变在我国HPV-6分离物中具有代表性。本研究首次从我国尖锐湿疣组织标本克隆了HPV-6基因组晚期区全长编码序列。 王淼 张明策 许雪梅 陈连凤 宋国兴关键词:尖锐湿疣 克隆 重组人乳头瘤病毒6型病毒样颗粒的免疫原性分析 被引量:2 2003年 目的 研究重组人乳头瘤病毒 6型 (humanpapillomavirustype 6 ,HPV 6 )病毒样颗粒(virus likeparticle ,VLP)的免疫原性。方法 重组杆状病毒在昆虫细胞中表达制备的HPV 6L1VLP(L1 VLP)和HPV 6L1+L2VLP(L1+2 VLP)经鉴定后 ,用于免疫BALB/c小鼠 ,对诱导的体液免疫和细胞免疫反应进行了检测。结果 电镜观察显示L1 VLP和L1+2 VLP二者形态上无明显差异 ,为圆形颗粒 ,直径约 5 0nm ,SDS PAGE和Westernblot分析表明 ,L1+2 VLP中L1和L2蛋白摩尔比例为 4∶1。用ELISA法测定免疫小鼠血清抗体滴度 ,加佐剂L1 VLP免疫组和加佐剂L1+2 VLP免疫组血清针对HPV 6L1VLP的滴度在 1∶10 0 0 0以上 ,高于未加佐剂组免疫血清滴度 (1∶2 0 0 0 ) ,L1+2 VLP免疫诱导出了特异于L2抗原的抗体。血清抗体主要识别HPV 6构象依赖性抗原表位 ,与HPV 11抗原显示出一定的交叉反应 ,而与HPV 16无明显交叉反应。免疫小鼠脾淋巴细胞体外经HPV 6L1VLP再激活后出现了特异性增殖反应 ,3H TdR掺入值与未免疫组之间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,L1 VLP和L1+2 VLP两组间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,L1 VLP和L1+2 VLP免疫组刺激指数 (SI)分别为 6 .4和 6 .2 ,阴性对照组SI为 1.1。HPV 6L1VLP再刺激特异地诱导免疫组脾淋巴细胞IL 2和IL 10分? 王淼 陈莲凤 韩晔华 邹宇宏 霍淑敏 司静懿 宋国兴关键词:人乳头瘤病毒6型 病毒样颗粒 免疫原性 重组杆状病毒 湿疣 预防性疫苗 炎症因子C5a和肿瘤坏死因子α刺激对小鼠主动脉内皮细胞衰老与代谢的差异化网络调控作用 被引量:1 2021年 目的探讨炎症因子C5a和肿瘤坏死因子α(TNF-α)对内皮细胞代谢、衰老和功能行为的调控网络。方法体外培养小鼠胸主动脉内皮细胞,分别给予C5a(100 ng/ml)和TNF-α(30 ng/ml)刺激12 h,收集细胞和培养基上清,进行蛋白质组学质谱检测,提取细胞mRNA进行实时定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测特异基因的表达情况,利用生物信息学方法对蛋白质组学检测结果进行细胞组分(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析。结果GO分析结果显示,体外培养的小鼠胸主动脉内皮细胞在TNF-α刺激下,以血管紧张素4(ANGPT4)、Ⅳ型胶原α2链(COL4A2)为主的血管生成功能相关蛋白的表达水平降低,以血管细胞黏附分子-1(VCAM1)、趋化因子配体2(CCL2)为主的衰老相关蛋白表达水平升高,且血管生成与衰老作用通过CCL2和ENG相互作用,展现出一定的相关性;C5a刺激引起体外培养的小鼠胸主动脉内皮细胞中与血管生成功能相关的ANGPT4、COL4A2等蛋白表达水平下降,然并未影响衰老相关蛋白的表达。经过KEGG分析,两种炎症刺激展现出不同的代谢特征,TNF-α调控丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸等参与的糖代谢和脂肪代谢过程,并通过PI3K-Akt、缺氧诱导因子1(HIF-1)等信号通路分别调控细胞凋亡和细胞增殖;而C5a调节钙重吸收的代谢过程,通过PI3K-Akt信号通路、蛋白质消化吸收等调控细胞增殖。体外实验验证在TNF-α刺激下,小鼠胸主动脉内皮细胞Vcam1和Ccl2的mRNA水平增加,Angpt4和Col4a2 mRNA水平降低;C5a刺激也下调Angpt4和Col4a2 mRNA水平,与蛋白基因芯片结果一致。结论TNF-α通过糖酵解等代谢途径和HIF-1等信号通路参与血管生成和细胞衰老,C5a参与血管生成过程,但参与的细胞代谢相关的途径较少。本研究提示不同的炎症因子在内皮细胞衰老与代谢方面存在明显的功能差异。 郭子怡 徐传胜 陈虹 彭泽琨 张雨泽 王淼关键词:炎症刺激 细胞衰老 血管生成 MRI实时引导高能聚焦超声消融术局灶治疗中低危前列腺癌的初步结果分析 被引量:2 2021年 目的探讨MRI实时引导高能聚焦超声消融术(MRgFUS)局灶治疗中低危前列腺癌的可行性及安全性。方法回顾性分析2020年8月至2021年6月北京医院采用MRgFUS治疗的5例中低危局限性前列腺癌患者的临床资料。患者年龄中位值73(53~80)岁,前列腺特异性抗原(PSA)中位值7.34(5.19~8.40)ng/ml,前列腺体积中位值27.96(21.50~37.91)ml。术前国际前列腺症状评分(IPSS)中位值13(0~18)分;3例有保留勃起功能意愿患者术前国际勃起功能问卷(IIEF-15)评分分别为15、23、3分。5例术前穿刺共确诊6处前列腺癌灶,其中国际泌尿病理协会(ISUP)分级分组3组3处,1组3处。临床分期T2a期3例,T2b期2例。所有患者术前接受盆腔MRI检查,高能聚焦超声通过MRI引导消融病灶。术后监测血清PSA、盆腔MRI等评估肿瘤控制情况,采用IPSS、IIEF-15和国际尿失禁协会尿失禁问卷简表(ICI-Q-SF)评估功能学恢复情况。结果本组5例6处病灶中,MRgFUS治疗病灶5处;其中1例有1处MRI阴性病灶为无临床意义前列腺癌,未治疗。术中消融次数中位值8(5~13)次,消融时间中位值64(35~148)min,MRI扫描仪内总治疗时间中位值190(140~355)min。5例术后尿管留置时间中位值1(1~8)d。5例均无严重并发症。5例术后随访时间中位值6(3~12)个月。5例术后PSA均显著下降,最低点PSA分别为1.196、4.398、4.135、1.562、1.350ng/ml,其中4例PSA下降>50%。4例术后3个月行MRI检查,均未见明确前列腺癌病灶。5例末次随访IPSS中位值5(0~14)分,较术前下降;3例有保留勃起功能意愿患者治疗后IIEF-15评分分别为12、30、9分;5例术后均无尿失禁,ICI-Q-SF评分均为0分。结论MRgFUS是治疗中低危局限性前列腺癌安全可行的无创治疗方式,具有良好的功能保护作用和较低的并发症发生率。其肿瘤控制效果还需要大样本临床试验长期随访验证。 王淼 王淼 谷涛 沈承 王萱 王建龙 田子健 孟令峰 张磊 张磊 丁鑫 王建业 刘明关键词:前列腺肿瘤 冷冻复苏法高效转化大肠杆菌 被引量:7 2002年 对传统的CaCl2方法进行的质粒转化做出改进,用冷冻复苏法使得CaCl2转化方法更加高效,整个过程仅需2min左右。同时分析了质粒快速转化的必需条件。 王立良 王淼 陈连凤 宋国兴关键词:大肠杆菌