潘俊
- 作品数:8 被引量:12H指数:2
- 供职机构:上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 内皮祖细胞复合血管无细胞基质替代输尿管的可行性被引量:1
- 2010年
- 背景:临床治疗输尿管缺损,缺乏有效的输尿管替代物,而无细胞基质在体内单独作为支架,常引起替代段输尿管狭窄,但内皮祖细胞移植能改善缺血组织,参与血管新生。目的:初步探讨内皮祖细胞复合的血管无细胞基质替代输尿管的可行性。方法:将自体猪来源的内皮祖细胞以及平滑肌细胞一起种植在同种异体的颈动脉来源的血管无细胞基质中,体外孵育后进行猪长段输尿管的替代。结果与结论:移植后4周,无细胞基质替代物已经开始与输尿管融合,替代物内可以明显见到上皮细胞层,肌细胞层以及新生的血管。但在移除输尿管支架管后,也就是在移植后12周的替代物标本中,发现移植物的萎缩和管腔的明显狭窄,移植物周围出现严重的纤维化炎症反应。替代段上方输尿管明显扩张积水,同侧肾脏明显萎缩,而且已经失去功能。
- 沈海波朱哲潘俊陈方
- 关键词:内皮祖细胞血管无细胞基质输尿管
- 羟基喜树碱对高危浅表性膀胱癌模型5637细胞的凋亡作用研究被引量:6
- 2009年
- 目的:观察羟基喜树碱(HCPT)对高危浅表性膀胱癌模型5637细胞的凋亡作用,研究HCPT不同作用时间和不同浓度对5637细胞的影响,进一步讨论HCPT在膀胱灌注化疗中的作用。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MIT)检测不同浓度、不同作用时间下HCPT对5637细胞增殖的影响;采用流式细胞术测定低浓度(5μmol/L)、不同作用时间(12、24 h)HCPT诱导5637细胞的凋亡率;用Hochest 33258染色观察细胞凋亡情况;采用荧光定量PCR检测5μmol/L HCPT作用5637细胞12 h相较未加药5637细胞中凋亡相关基因的变化。结果:5μmol/L HCPT作用5637细胞12 h后,早期凋亡细胞占23.5%。HCPT随着作用时间的延长,凋亡率并不会随之增加,HCPT诱导凋亡的作用在肿瘤细胞与药物作用后的某一时间点达到高峰。Hochest 33258染色和荧光定量PCR检测凋亡相关基因也证明HCPT这一浓度在这一时间点有诱导癌细胞凋亡的作用。结论:羟基喜树碱具有诱导高危浅表性膀胱癌细胞凋亡的作用。适当延长药物作用时间,可以促进其药效的发挥。
- 沈海波曾彦恺顾正勤张良康健潘俊周斌齐隽
- 关键词:膀胱癌羟基喜树碱细胞凋亡
- 输尿管无细胞基质移植物的制备和评价被引量:2
- 2009年
- 背景:与小肠黏膜下层等材料相比,脱细胞血管具有天然管状结构,与输尿管形态结构相近,替代输尿管时仅需端端吻合即可,手术操作简单,血管外壁光滑,获取及制备方法简便等优点。目的:拟应用同种颈动脉血管无细胞基质体外构建输尿管。设计、时间及地点:观察性实验,于2006-09/2008-06在上海交通大学医学院附属新华医院动物实验中心完成。材料:长风杂交白猪由上海松联实验动物公司提供。上海交通大学医学院实验动物中心提供的健康成年大鼠8只,用于血管无细胞基质的动物毒性实验。方法:剥去猪颈动脉血管外膜,PBS冲洗若干遍,然后将血管置于pH7.1的PBS中4℃下振荡清洗,0.5%十二烷基硫酸钠振荡24h,后使用双蒸水4℃下反复振荡洗涤1周,每日换双蒸水2次。对于解剖过程中肌肉残留相对稍多的血管,在双蒸水洗涤前以混合消化液37℃下振荡消化约2h,再行双蒸水洗涤。制备的无细胞基质置于青、链霉素溶液中,4℃保存,完成脱细胞支架制备。主要观察指标:光镜及电镜观察脱细胞后管壁无细胞基质片的主要成分。将同种异体来源内皮祖细胞培养增殖后植入血管无细胞基质,观察细胞生长情况,并进行血管无细胞基质动物毒性实验。拉力实验了解血管无细胞基质材料的收缩性能。结果:颈动脉血管无细胞基质中已无细胞成分,无细胞基质主要由胶原成分组成。扫描电镜未见该材料表面存在细胞及细胞碎片,同时发现该无细胞基质存在孔隙样结构。体外同种异体来源的内皮祖细胞培养增殖后植入血管无细胞基质,细胞黏附于无细胞基质。血管无细胞基质按毒性分级属于无毒级。拉力实验说明该无细胞基质具有一定的韧性和牵张性。结论:采用胰酶和十二烷基硫酸钠制备的颈动脉血管无细胞基质材料无细胞残留,具有一定的韧性和牵张性,种植于其中的种子细胞具�
- 沈海波潘俊陈方
- 关键词:颈动脉无细胞基质输尿管
- 先天性肾上腺皮质增生症新生儿筛查及基因CYP21启动子研究
- 顾学范叶军周建德王秀敏韩蓓张雅芬赵毅高晓岚薛和平乌玉丽潘俊沈永年邱文娟黄晓东
- 对先天性肾上腺皮质增生症(CAH)进行了研究。采用PCR扩增、单链构象多态性(SSCP)分析、DNA序列测定、载体构建、基因转染等分子生物学、细胞生物学研究手段,发现了该病CYP21基因启动子区4种新的突变及一种-532...
- 关键词:
- 关键词:先天性肾上腺皮质增生症新生儿筛查CYP21基因
- 冷刺激诱导哮喘小鼠支气管上皮细胞炎症反应的研究被引量:3
- 2017年
- 目的探讨冷刺激对哮喘小鼠支气管上皮细胞炎症反应的影响以及蛋白激酶C(PKC)-核因子-κB(NF-κB)信号转导通道的变化情况。方法原代分离培养哮喘模型小鼠支气管上皮细胞,并将细胞分为对照组(37℃培养)、24 h冷刺激组(18℃培养)和48 h冷刺激组(18℃培养),实时荧光定量PCR方法检测三组细胞炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA表达,免疫荧光法检测磷酸化PKC及磷酸化NF-κB抑制因子(IκB)并测定其荧光值以判定PKC及NF-κB活性。结果各冷刺激后,除IL-1αmRNA表达量太低无法进行分析外,其余各基因表达量均显著升高(P<0.05)。其中IL-1β和GM-CSF表达在冷刺激24 h后增加最为明显,IL-13表达在冷刺激48 h后增加最为明显,而IL-4、IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α冷刺激24 h和48 h,作用效果基本一致。并且与对照组相比,24 h冷刺激组和48 h冷刺激组的磷酸化PKC、磷酸化IκB蛋白表达量均明显增加(P<0.05)。结论冷刺激能够诱导哮喘小鼠支气管上皮细胞的炎症反应,而PKC-NF-κB可能是这一过程中的重要信号转导途径。
- 刘海沛华丽刘全华潘俊鲍一笑
- 关键词:小鼠哮喘支气管上皮细胞冷刺激炎症蛋白激酶C
- 冷刺激通过瞬时受体电位M8型离子通道诱导哮喘小鼠支气管上皮细胞炎症反应的研究
- 目的 探讨瞬时受体电位M8 型离子通道(TRPM8)在冷刺激诱导哮喘小鼠支气管上皮细胞炎症反应中的作用及其信号转导途经。方法 建立“冷刺激诱导哮喘小鼠支气管上皮细胞炎症反应” 的细胞模型,在此模型基础上观察TRPM8 特...
- 刘海沛华丽刘全华潘俊鲍一笑
- 冷刺激通过瞬时受体电位M8型离子通道诱导哮喘小鼠支气管上皮细胞炎症反应的研究
- 刘海沛华丽刘全华潘俊鲍一笑
- 丝裂霉素(MMC)作用于高危膀胱癌细胞株后NF-kB及其靶基因表达情况的研究
- 目的在体外研究丝裂霉素对高危膀胱癌细胞株作用后,NF-kB及其下游凋亡相关基因和多药耐药相关基因的影响。方法运用免疫细胞化学(免疫荧光法)和Western blot方法检测NF-kB在加药(丝裂霉素C)前后,5637细胞...
- 齐隽沈海波曾彦恺顾正勤张良康健潘俊周斌
- 关键词:癌细胞株靶基因NF-KB丝裂霉素MMC
- 文献传递