李静心
- 作品数：20 被引量：26H指数：3
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 猪卵母细胞体外成熟及胚胎体外发育系统的优化
- 本研究通过优化猪卵母细胞体外成熟期间的激素添加方式及孤雌胚胎的激活方案，以期建立比较完善的猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育系统，并将其应用于转基因体细胞核移植胚胎的体外发育。
- 王慧利孟春花张庆晓李静心苏磊贺强朱前明曹少先
- 关键词：胚胎工程猪卵母细胞孤雌激活胚胎发育
- 小鼠卵母细胞减数分裂过程中HDACs对组蛋白H3S10磷酸化的调控
- 引言/目的 组蛋白修饰及其相互间的调控具有重要的生物学功能,它们对细胞周期进程、转录调控、细胞凋亡、DNA损伤修复、DNA复制重组意义重大.组蛋白不同修饰间调控的研究均集中于有丝分裂及低等动物减数分裂,哺乳动物卵母细胞减...
- 王慧利王婧孟春花李静心张俊钱勇曹少先
- 猪APOBEC3F基因外显子6单核苷酸多态性及其与PRRSV易感性的关联分析
- 2014年
- 载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽3F(APOBEC3F)是有效阻止内源性与外源性反转录病毒复制的新型宿主细胞因子。本文对猪APOBEC3F基因外显子6序列进行扩增和测序,筛选多态性位点,并分析其与PRRSV易感性的相关性。测序发现外显子6存在3个单碱基突变(g.337 T/G、g.341 G/A和g.343 T/C)。针对g.341 G/A建立CRS-PCR-RFLP方法,检测9个猪群193个样本,发现仅在姜曲海猪和梅山猪中有GG(0.79/0.80)和GA(0.21/0.20)基因型,其他7个猪群体只检测到GG基因型。GG基因型猪肺泡巨噬细胞中PRRSV拷贝数在接毒后18h显著高于GA基因型个体(P<0.05)。表明APOBEC3F基因外显子6与猪种PRRSV抗性相关,外显子6的341位点A等位基因更有利于抵抗PRRSV的感染,这为进一步探讨APOBEC3F基因作为猪种PRRSV抗性辅助选育标记提供了试验依据。
- 朱前明孟春花李静心王慧利王亚磊王婧茆达干曹少先
- 关键词：载脂蛋白BPRRSV易感性
- 6个绵羊品种微卫星多样性分析被引量：8
- 2014年
- 为检测兰坪乌骨绵羊的遗传多样性及其与其他5个绵羊品种(湖羊、小尾寒羊、杜泊羊、特克塞尔羊和无角陶赛特羊)的亲缘关系,试验选择9个微卫星位点对共计117个体进行了检测,将各微卫星位点的PCR扩增产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,POPGEN32软件计算遗传参数。结果表明,9个微卫星位点均表现为高度多态,各绵羊群体内的PIC平均值为湖羊(0.7211)>陶赛特羊(0.6780)>小尾寒羊(0.6492)>乌骨绵羊(0.6479)>特克塞尔羊(0.5930)>杜泊羊(0.5728)。6个品种中乌骨绵羊的平均杂合度最大(0.9543),而杜泊羊最小(0.2556)。UPGMA聚类分析表明,湖羊与小尾寒羊首先聚为一类,乌骨绵羊与湖羊、小尾寒羊遗传距离较近,而与3个引进品种的遗传距离较远。这些结果提示乌骨绵羊可与湖羊或小尾寒羊杂交提高繁殖力,与引进品种杂交提高肉用性能。
- 王亚磊李静心茆达干王慧利李隐侠钱勇孟春花曹少先
- 关键词：绵羊微卫星
- 乌骨绵羊NR5A2基因编码区序列克隆及特征分析被引量：3
- 2014年
- 为了研究NR5A2基因在乌骨绵羊中的序列特征,利用PCR和克隆测序技术获得乌骨绵羊NR5A2基因的外显子序列,用DNAMAN软件和DNAStar软件对序列进行比对和拼接、运用Clustal软件与其他物种相应序列进行同源比对分析,MEGA5.1软件用来构建哺乳动物NR5A2蛋白质系统进化树,用DNA池方法对其编码区序列的SNPs位点进行筛选。结果显示:乌骨绵羊NR5A2基因编码区全长1 488 bp,共编码495个氨基酸;乌骨绵羊的NR5A2基因编码区核苷酸序列与湖羊和牛的同源性分别为99.87%和85.51%;氨基酸序列的一致性分别为99.41%和89.66%。与湖羊相比,乌骨绵羊NR5A2基因编码区共发现3个单碱基突变(C1069A、C1419T和G1485A),其中C1069A位点突变引起了氨基酸的改变,从亮氨酸变为异亮氨酸。在乌骨绵羊的编码区现了一个单核苷酸突变位点G999C。
- 李隐侠张俊李静心孟春花钱勇王慧利钟声曹少先
- 关键词：乌骨绵羊基因克隆单核苷酸多态性
- 以β-乳球蛋白为靶基因的锌指核酸酶构建与筛选体系的探索
- β-乳球蛋白是反刍动物乳清蛋白中含量最高的组分，目前已有多种外源蛋白通过β-乳球蛋白基因调控序列指导在乳腺中实现了特异性高效表达，同时它也是一种主要致敏原。锌指核酸酶(Zinc Finger Nuclease，ZFN)技...
- 李静心
- 关键词：Β-乳球蛋白靶基因锌指核酸酶基因敲除
- 猪卵母细胞体外发育系统的优化及转基因体细胞核移植系统的建立被引量：1
- 2012年
- 为改善猪卵母细胞体外发育系统,依次对卵母细胞体外成熟期激素处理、成熟后胚胎激活方式、激活后胚胎培养液选取进行优化,并将优化后系统应用于转基因体细胞核移植。结果显示,优化后的系统为:成熟前24.0 h添加10.0 IU/ml孕马血清促性腺激素(PMSG)和10.0 IU/ml人绒毛膜促性腺激素(hCG),激活方式为电脉冲(1.2 kV/cm,30μs)联合细胞松弛素B处理(5μg/ml,3.0 h),胚胎培养液为PZM3。在此系统下,卵母细胞成熟率达80.9%,卵裂率达92.8%,囊胚率达53.7%,将此系统应用于转EGFP基因胎儿成纤维细胞核移植,囊胚率达18.3%。以上结果表明,此系统可用于猪卵母细胞体外发育及转基因体细胞核移植。
- 王慧利孟春花张庆晓李静心苏磊贺强朱前明曹少先
- 关键词：卵母细胞体外发育体细胞核移植
- Kiss-1基因多态性与苏淮山羊产羔数的关联分析被引量：8
- 2014年
- 为了研究Kiss-1基因多态性与苏淮山羊产羔数之间的关系,本研究采用DNA池测序技术筛选苏淮山羊Kiss-1基因突变位点,采用AS-PCR和PCR-RFLP方法检测130只苏淮山羊Kiss-1基因突变位点的多态性,并分析其与产羔数的关联性。结果表明,在苏淮山羊内含子1中发现2个突变位点g.2270C>T和g.2510A>G,其中g.2510A>G位点有3种基因型AA、AG和GG,基因型频率分别为0.209、0.496和0.295;g.2270C>T位点在苏淮山羊中共检测3种基因型(CC、CT和TT),基因型频率分别为0.143、0.750和0.107。关联分析发现,g.2510A>G位点3种基因型在苏淮山羊各胎产羔数和平均产羔数间差异不显著,g.2270C>T位点中CC型的二胎产羔数显著高于CT和TT型(P<0.05)。单倍型分析发现,g.2510A>G和g.2270C>T位点在苏淮山羊群体中共构建8种单倍型,其中AGCT是主要的单倍型;各单倍型与苏淮山羊产羔数的关联分析发现仅AGCT单倍型的头胎产羔数与AACT单倍型的头胎产羔数间差异显著,其他单倍型在苏淮山羊的各胎产羔数间差异均不显著。综合以上研究表明,Kiss-1基因的g.2270C>T位点可能对苏淮山羊繁殖性状的选育具有一定的指导作用。
- 李隐侠张俊钱勇李静心孟春花王慧利钟声曹少先
- 关键词：KISS-1基因PCR-RFLPAS-PCR产羔数
- 猪APOBEC3F基因外显子8单核苷酸多态性与PRRSV易感性的关联性分析
- 为研究猪载脂蛋白B mRNA 编辑酶催化多肽3F(APOBEC3F)基因多态性及其对猪PRRSV易感性的影响，本文对猪APOBEC3F基因外显子3、4、8和内含子3序列进行扩增和测序，筛选多态性位点，分析其与PRRSV易...
- 朱前明孟春花茆达干王慧利李静心王婧王亚磊曹少先
- 关键词：PCR-RFLPPRRSV易感性
- 人α-乳白蛋白转基因克隆奶山羊的获得与鉴定
- 引言目前,世界上已获得乳白蛋白转基因小鼠、大鼠、猪和牛等动物,但山羊上的研究较少。此外,随体细胞克隆技术的发展,已诞生多种克隆动物,但克隆效率总体偏低,克隆操作程序仍需进一步优化。本实验目的是优化体细胞克隆操作中的激活及...
- 王慧利孟春花张庆晓李静心贺强苏磊汪薇曹少先
- 文献传递
