李明
- 作品数：55 被引量：157H指数：7
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- miRNA-200c对非小细胞肺癌A549细胞甲氨蝶呤耐药性的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨miRNA-200c(miR-200c)在非小细胞肺癌A549细胞耐甲氨蝶呤(MTX)(A549/MTX)中的影响及可能的作用机制。方法通过实时荧光定量(q RT-PCR)法检测人肺癌亲本细胞株A549细胞、转染miR-200c模拟物(mimic)的A549/MTX细胞(A549/MTX-M)及转染miR-阴性对照(NC)A549/MTX细胞(A549/MTX-N)中miR-200c的表达水平。分别采用MTT法、锥虫兰染色及流式细胞术检测三组细胞对MTX的药物敏感度、细胞增殖能力及细胞凋亡变化,并采用q RT-PCR检测其P53和P21基因表达的变化。结果 miR-200c在A549细胞中的表达水平显著高于A549/MTX-N细胞;A549/MTX-M细胞miR-200c水平高于A549/MTX-N细胞;用不同浓度MTX刺激细胞,与A549/MTX-N细胞比较,A549/MTX-M细胞的增殖能力减弱、凋亡细胞增多,并呈剂量依赖性,差异均有统计学意义。转染miR-200c mimic后,P53和P21基因表达水平上升,与转染miR-NC细胞比较,差异有统计学意义。结论 miR-200c能够逆转A549/MTX细胞对MTX的耐药性,其作用机制可能是通过P53/P21信号转导通路诱导细胞凋亡来实现的。
- 单武林邓芳张晓蕾张婧韩丹丹万玲玲李明
- 关键词：MIR-200C甲氨蝶呤耐药肺癌
- SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用被引量：2
- 2018年
- SEPT9基因属于SEPT基因家族中的一员,近年来研究发现结直肠癌细胞中SEPT9基因呈现高度甲基化.检测SEPT9基因甲基化在结直肠癌发生发展中参与的信号通路,分析不同标本类型在SEPT9基因甲基化检测中的应用,比较SEPT9基因甲基化检测方法,可为结直肠癌的早期诊断提供依据.
- 戴春阳李明
- 关键词：结直肠肿瘤甲基化
- 两种肌钙蛋白检测方法对脂血、黄疸和溶血的抗干扰评价
- 目的 评价电化学发光和免疫比浊法检测肌钙蛋白时对脂血、黄疸和溶血的影响。方法 用已知范围内的肌钙蛋白标本与不同浓度的脂血、黄疸和溶血标本以一定比例混合，用ROCH E601 电化学发光免疫分析仪和贝克曼DXC800 生化...
- 陈少华孙永梅李明张扬邓芳
- 关键词：肌钙蛋白
- 氨甲蝶呤对映体耐药A549细胞株的建立及其生物学特征被引量：11
- 2009年
- 目的诱导并建立耐氨甲蝶呤对映体的A549细胞株并观察耐药细胞系(L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549)的生物学特性。方法以MTX对映体为诱导剂,采用浓度递增结合低剂量持续诱导方法诱导A549细胞株,建立MTX不同对映体耐药细胞系;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;MTT法绘制细胞生长曲线;MTT法检测耐药细胞株的耐药指数;流式细胞仪检测细胞周期和细胞的分裂增殖能力。结果L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药指数分别为6.0的和20.2。倒置相差显微镜观察细胞形态发生了改变;细胞生长曲线显示D-(-)-MTX/A549的增殖略慢于亲本细胞,而L-(+)-MTX/A549的增殖最慢;流式细胞仪检测细胞周期结果显示L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药细胞株S期细胞数量减少(P<0.05),G0/G1期细胞增多(P<0.05);CFSE检测A549、L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549的MFI分别为(6.08±0.55)、(7.72±0.30)、(6.90±0.18)。两对映体细胞株间有明显手性差异。结论本研究建立了MTX两种对映体耐药细胞株,为进一步研究其耐药机制提供了一种实验模型。
- 陶绍能何晓东董林李明朱园园孙自敏沈佐君
- 关键词：氨甲蝶呤A549细胞对映体
- 血清人附睾蛋白4在男性肺腺癌中的诊断价值被引量：6
- 2016年
- 目的探讨血清人附睾蛋白4（HE4）在男性肺腺癌中的诊断价值。方法采用电化学发光法检测78例确诊的肺癌的男性患者、同时期住院的73例男性肺良性疾病患者和40例男性体检健康者血清中HE4的水平;分析HE4在不同病理类型及TNM分期患者中表达的差异;ROC曲线分析HE4单独检测及与癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）联合检测对肺腺癌的诊断价值。结果肺腺癌组患者HE4水平显著高于其他病理类型及肺良性疾病和体检健康者（P均〈0.05）;早期肺癌（Ⅰ～Ⅱ期）、Ⅲ期、Ⅳ期肺癌患者HE4水平间差异有统计学意义（P均〈0.05）,早期肺癌（Ⅰ～Ⅱ期）与Ⅳ期肺癌患者HE4水平差异有统计学意义（P〈0.05）。HE4单独检测诊断男性肺腺癌的敏感性（70.6%）虽不及CEA（76.5%）和Cyfra21-1（91.2%）,但特异性（75.2%）显著高于CEA（72.6%）和Cyfra21-1（61.9%）。HE4与CEA、Cyfra21-1联合检测可提高诊断敏感性和特异性至97.1%和91.2%。结论血清HE4对于男性肺腺癌的诊断、肺癌的临床分期具有一定指导意义。HE4与CEA、Cyfra21-1联合检测可提高灵敏度和特异性,具有良好的临床应用价值。
- 张扬邓芳李明陈少华陈兆武郝磊
- 关键词：肺腺癌
- 真菌孢子对SYSMEX 5000i全自动血液分析仪细胞计数的影响被引量：3
- 2017年
- 目的探讨真菌孢子对SYSMEX 5000i全自动血液分析仪白细胞和血小板计数的影响。方法选取临床常见的白念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌和光滑念珠菌4种真菌孢子,采用生理盐水配制成终浓度为(4~6)×10~9/L的真菌原液,与外周血全血[含高、中、低3个浓度的白细胞(WBC)和血小板(PLT)]按一定比例混合,制备成含不同浓度[(4~6)×10~8/L、(4~6)×10~7/L、(4~6)×10~6/L、(4~6)×10~5/L)]真菌孢子的全血样本,在SYSMEX 5000i全自动血液分析仪上检测,观察不同种类、不同浓度的真菌孢子对WBC计数和PLT计数的影响以及散点图的变化情况。结果高浓度真菌孢子使SYSMEX 5000i全自动血液分析仪WBC计数和PLT计数假性升高,其中以热带念珠菌和克柔念珠菌对WBC计数影响较大,克柔念珠菌对PLT计数影响最大。结论真菌孢子可能会对SYSMEX 5000i全自动血液分析仪细胞计数产生较大影响,在临床日常工作中应加以重视。
- 李明常人亮张晓蕾单武林阚劲松邓芳
- 关键词：真菌孢子白细胞计数
- 一种能够预防和/或治疗子宫颈鳞癌的卷曲乳杆菌
- 本发明公开了一种能够预防和/或治疗子宫颈鳞癌的卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)Lc31和Lc83。所述的卷曲乳杆菌Lc31的保藏编号为CGMCC No.21348，所述的卷曲乳杆菌Lc83的保...
- 王慧妍李若男马艳陈曦曦李明
- 非小细胞肺癌人乳头瘤病毒感染与EGFR基因突变的相关性被引量：3
- 2014年
- 目的 ：研究非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者感染人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）的情况,并探讨NSCLC患者感染HPV与表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）基因突变间的相关性。方法 ：收集98例临床确诊为NSCLC的石蜡组织标本;采用Luminex液相芯片技术对所有标本进行HPV基因的分型,应用突变特异性扩增系统（amplification refractory mutation system,ARMS）检测EGFR基因18~21号外显子突变的情况。结果：98例NSCLC患者中发生HPV感染为25.5%（25/98）,其中高危型的为23例,分别是HPV-16、-18、-33和-58亚型;HPV感染在不吸烟者（P=0.036）和淋巴结转移者（P=0.036）中的发生率较高。98例NSCLC患者中EGFR基因突变的检出率为38.8%（38/98）,在女性（P〈0.001）、不吸烟（P=0.001）、肺腺癌（P=0.001）和临床分期Ⅰ~Ⅱ期（P=0.024）患者中发生率较高。EGFR基因突变的状态与HPV感染显著相关,差异有统计学意义（P=0.012）;多因素回归分析结果显示,发生EGFR基因突变的NSCLC患者中HPV感染率较高[危险因素比值（odds ratio,OR）=5.956]。结论 ：HPV感染在中国的NSCLC患者中普遍存在,NSCLC中HPV感染与EGFR基因突变存在相关性。
- 李明邓芳钱立庭张扬孙永梅王保龙
- 关键词：乳头状瘤病毒受体表皮生长因子
- 柱上样本堆积毛细管电泳法同时检测细胞内氨甲蝶呤及其六种代谢产物被引量：1
- 2011年
- 目的建立柱上堆积高效毛细管电泳法同时检测细胞内氨甲蝶呤(MTX)及其6种代谢产物氨甲蝶呤多聚谷氨酸链(MTXPG)的方法。方法采用高效毛细管电泳技术,以75 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH值7.40)作为分离介质,用水和乙腈(V/V=1∶1)作溶剂重组残留样本的方法进行柱上样本堆积,0.5 psi压力进样,进样时间50 s,在分离电压28 kV、检测波长300 nm条件下对MTX和MTXPG进行分离。在此基础上,检测细胞内MTX及其代谢产物MTXPG的含量。结果通过不断改变分离缓冲液中异丙醇(5%、8%、10%,V/V)和羟丙基-β-环糊精(hp-β-CD)浓度(20、25、30 mmol/L),发现在含8%异丙醇、25 mmol/L hp-β-CD的缓冲液条件下,30 min内实现7种组分的完全分离。用水和乙腈(V/V=1∶1)作溶剂重组残留样本进行柱上样本堆积的方法可使检测灵敏度提高10倍。结论建立柱上样本堆积高效毛细管电泳法可同时检测细胞内MTX及其代谢产物MTXPG。该方法具有高效、快速、简便、高灵敏度的特点。
- 李道静何晓东李明孙利许维东沈佐君
- 关键词：氨甲蝶呤毛细管电泳法
- 微RNA-200c通过EZH2/E-cad信号通路抑制肺癌A549/MTX耐药细胞的迁移和侵袭能力被引量：1
- 2015年
- 目的 :探讨微RNA-200c(micro RNA-200c,mi R-200c)对耐受甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)的人非小细胞肺癌A549细胞迁移和侵袭能力的影响,及其可能的分子作用机制。方法 :通过浓度递增结合低剂量持续诱导,获得耐受MTX的人肺癌A549/MTX细胞系后,观察诱导前后细胞的形态学改变。将mi R-200c模拟物(mimic)转染A549/MTX细胞株后,分别采用细胞划痕愈合实验和Transwell细胞迁移和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力;再用实时荧光定量PCR法检测mi R-200c过表达的A549/MTX细胞中人Zeste基因增强子同源物2(human enhancer of Zeste homolog 2,EZH2)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)的m RNA表达水平。结果 :肺癌A549/MTX耐药细胞构建成功。miR-200c minic转染后A549/MTX耐药细胞表达mi R-200c水平比转染阴性片段组高6.41倍(P<0.05),表明转染成功。mi R-200c mimic转染后A549/MTX细胞的迁移和侵袭能力显著降低(P值均<0.05);而且A549/MTX细胞中EZH2 m RNA表达水平明显降低,而E-cad m RNA水平明显升高(P值均<0.05)。结论 :mi R-200c高表达可以抑制A549/MTX耐药细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与其下调EZH2表达和上调E-cad水平有关。
- 张晓蕾邓芳单武林杨臣欢魏敏李程吴坤韩丹丹张婧李明
