李印军
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:北京林业大学生物科学与技术学院林木花卉遗传育种教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 741毛白杨APX小基因家族的克隆及生化特性分析
- 环境胁迫会使植物细胞中积累大量的活性氧,如果这些活性氧得不到有效清除就会对植物造成伤害。抗坏血酸过氧化物酶是植物体内酶促脱毒系统的重要酶类,它是一个含血红素的蛋白,主要清除植物体内的H2O2,从而提高植物体在抗逆方面的能...
- 李印军
- 关键词:毛白杨生化特性基因组序列电子克隆
- 毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析被引量:3
- 2013年
- 以毛白杨总RNA为模板反转录得到cDNA,克隆获得抗坏血酸过氧化物酶基因家族中的一个成员PtAPX2 864bp的编码序列。该基因编码的蛋白包含287个氨基酸,理论分子质量为31.78ku,C末端包含锚定于过氧化物酶体跨膜结构域,推断其为过氧化物酶体定位蛋白。构建了PtAPX2原核表达载体,在大肠杆菌中表达获得了纯化的重组蛋白,并对其进行了酶学性质分析。PtAPX2对抗坏血酸的Km值为(1.37±0.22)mmol/L,Vmax值为(3.95±0.46)mmol/(L·min·mg);对H2O2的Km值为(0.026±0.003)mmol/L,Vmax值为(1.27±0.03)mmol/(L·min·mg);该酶在28℃,pH7.0~7.4时活性最高。实时荧光定量PCR分析表明,PtAPX2在杨树老叶叶肉中表达量最高。对PtAPX2亚细胞定位、底物结合特征、酶学性质及组织特异性表达的分析加深了对木本植物抗氧化机理的认识。
- 潘翔李娜李印军魏弘宜张蕾陆海
- 关键词:毛白杨抗坏血酸过氧化物酶克隆酶学性质