李冰
- 作品数：27 被引量：32H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 抗炭疽保护性抗原单克隆抗体可变区基因的克隆及序列分析被引量：5
- 2007年
- 目的:克隆并分析抗重组炭疽芽孢杆菌保护性抗原(rPA)单克隆抗体4B2、5E1和2A8轻、重链可变区基因。方法:从分泌抗rPA特异性单抗的杂交瘤细胞株4B2、5E1和2A8中提取总RNA;利用RT-PCR技术克隆抗rPA单抗4B2、5E1和2A8的VL、VH基因,并将其连入pMD18-T载体中进行测序分析。结果:4B2VL基因全长378bp,VH基因全长414bp;5E1VL基因全长420bp,VH基因全长426bp;2A8VL基因全长384bp,VH基因全长342bp。通过分析,这些基因均符合小鼠IgGV区基因的特征,含有4个框架区、3个抗原互补决定区,而且抗体特征性的半胱氨酸残基的数量和位置也正确。结论:克隆了抗rPA单抗4B2、5E1和2A8的VL、VH基因,为下一步构建多种形式的基因工程抗体奠定了良好的基础。
- 李冰李建民徐俊杰刘树玲张羽付玲陈薇
- 关键词：炭疽芽胞杆菌单克隆抗体
- 抗炭疽人源化抗体的研究
- 炭疽是由炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)引起的人畜共患的重大烈性传染病。炭疽芽孢作为A类生物战剂,由于其强烈的致病力及其对环境的极强适应能力等特性,一直是生物战/生物恐怖的首选,也是重大的威胁。因此,...
- 李冰
- 关键词：人源化抗体病理模型
- 文献传递
- 抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原单克隆抗体轻、重链可变区基因及其应用
- 本发明涉及抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原(PA)单克隆抗体轻、重链可变区基因和基因编码的多肽，以及所述基因和多肽在制备炭疽的新型诊断试剂和治疗药物中的应用。本发明人制备了抗PA特异性单克隆抗体4B2、5E1和2A8杂交瘤细胞株...
- 陈薇李冰徐俊杰李建民刘树玲侯利华付玲
- 文献传递
- 1例血液病患者疑难血型鉴定报告
- 2003年
- 郑纳新陈建魁李冰邵春燕朱晓华肖云贵李锦宏
- 关键词：血液病疑难血型输血
- 抗黄曲霉尿酸氧化酶单克隆抗体的制备和初步鉴定
- 2007年
- 目的:制备抗黄曲霉尿酸氧化酶单克隆抗体。方法:采用杂交瘤技术,获得2株针对重组黄曲霉尿酸氧化酶(rUOX)的杂交瘤细胞McAb17和McAb3;采用盐析和A蛋白亲合层析柱纯化该抗体。结果:McAb17和McAb3的腹水效价达到1∶512000,纯化后获得纯度大于95%的单抗,抗体亚类(型)分别为IgG1/k型和IgG2a/k型;ELISA结果显示制备的单抗与rUOX和Rasburicase(商品化rUOX)可发生特异反应。结论:制备了抗黄曲霉尿酸氧化酶单克隆抗体McAb17和McAb3,为检测rUOX在动物体内的代谢变化提供了良好的实验基础。
- 刘树玲李建民李冰杨秀旭付玲陈薇
- 关键词：黄曲霉尿酸氧化酶杂交瘤单抗酶联免疫吸附实验
- 一种抗鼠疫杆菌F1抗原的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种抗鼠疫杆菌F1抗原的单克隆抗体，以及所述抗体在制备鼠疫治疗药物中的应用。本发明公开的抗体具有特异的抗原结合性、低免疫原性以及良好的动物保护功能。
- 陈薇李建民张金龙任军李冰宋小红于婷刘树玲
- 文献传递
- 基孔肯雅病毒中和表位的筛选及表达
- 2008年
- 目的：寻找基孔肯雅病毒中和表位，并将其表达为重组融合蛋白。方法：对噬菌体展示12肽库进行了生物淘洗，随机挑取噬菌体克隆，使用ELISA方法筛选并鉴定阳性克隆，分析阳性克隆的DNA序列，将其翻译成氨基酸序列进行同源性比较。将其中一个表位连同M13噬菌体PⅢ蛋白结构域Ⅰ-Ⅱ的编码序列用PCR技术扩增后插入原核表达载体pQE30，用IPTG诱导融合蛋白表达。结果与结论：从经过3轮淘洗的噬菌体中随机挑选123个克隆，从中筛选到20个阳性克隆，其中包含7种不同的氨基酸序列，这些序列缺乏同源性，表明该单抗表位应为构象型表位。在室温培养条件下成功地在大肠杆菌周质腔表达了一种可溶性的表位融合蛋白，经亲和层析得到了纯化的表位融合蛋白。
- 安小平李博侯利华李建民徐俊杰李冰陈薇童贻刚
- 关键词：基孔肯雅病毒中和抗体噬菌体展示肽库中和表位
- 用定点整合系统表达抗基孔肯亚病毒人-鼠嵌合抗体的研究被引量：1
- 2005年
- 目的:构建含有FRT序列的CHO/dhfr-工程细胞株,并在此细胞株中用定点整合系统表达抗基孔肯亚病毒人鼠嵌合抗体。方法:首先克隆FRT序列与HBsAg的融合基因FRT-HBsAg,然后将FRT-HBsAg亚克隆到pCI neo的MCS中,构建表达载体pCI FRT-HBsAg。以此载体转染CHO/dhfr-细胞,用1g/L的G418筛选抗性克隆。检测抗性克隆HBsAg的表达,筛选表达量高的克隆作为宿主细胞株,命名为CHO/dhfr-FRT+。将表达质粒pA FRTHFLF和pOG44以1∶9的质量比混合,取2μg转染CHO/dhfr-FRT+。转染48h后,换选择培养基(撤掉H、T)用96孔板进行克隆化,2wk后对长成的单克隆进行检测。筛选正确整合到CHO/dhfr-FRT+细胞中FRT位点的克隆,并不断提高MTX的浓度,进一步筛选表达量更高的克隆。在MTX的浓度为2×10-7mol/L时,获得稳定表达细胞株,其最后的表达量为5mg/L。对此细胞株扩大培养后,收集上清并纯化,以纯化的嵌合抗体进行SDS-PAGE及Westernblot和抗原结合活性的检测。结果:构建了高转录活性位点整合FRT序列的CHO/dhfr-细胞株,并在此细胞株中表达抗基孔肯亚病毒人鼠嵌合抗体,表达量为5mg/L。结论:构建了含有FRT序列的CHO/dhfr-工程细胞株,并在此细胞株中用定点整合系统表达抗基孔肯亚病毒人鼠嵌合抗体,为用此系统表达抗体分子和其他蛋白分子奠定了基础?
- 李建民陈薇贾秀杰安小平李冰樊英茹童贻刚
- 关键词：基孔肯亚病毒嵌合抗体
- 炭疽毒素受体胞外区在毕赤酵母中分泌表达、纯化与活性鉴定被引量：6
- 2005年
- 使用分泌型表达载体,实现了重组炭疽毒素受体胞外区(rATR(CMG2)-EXCELL)在毕赤酵母KM71H培养物上清中的分泌表达.表达量约占培养物上清总蛋白质的20%.经过螯合柱初步纯化,每升诱导培养物可获得约1mg电泳纯的rATR(CMG2)-EXCELL.体外与配基PA结合试验和细胞保护试验显示,rATR(CMG2)-EXCELL具有很好的生物活性.rATR(CMG2)-EXCELL的成功表达为今后研究炭疽毒素受体的作用机理、发展新型炭疽治疗药物打下基础.
- 赵剑徐俊杰缪静李冰杨秀旭宋小红陈薇
- 关键词：炭疽杆菌蛋白质表达毕赤酵母
- 炭疽芽孢杆菌中和性抗体的研究进展被引量：3
- 2010年
- 炭疽芽孢杆菌的中和性抗体在炭疽的被动免疫和治疗中有着重要的意义。抗保护性抗原(protective antigen,PA)抗体既能够抑制芽孢出芽又具有中和毒素的作用。抗致死因子(lethal factor,LE)/水肿因子(edema factor,EF)抗体能阻断致死毒素(lethal toxin,LT)/水肿毒素(edema toxin,ET)发挥活性,荚膜抗体能结合补体导致细菌繁殖体裂解。同时中和性抗体的水平也可以作为保护性免疫的评价标准。另一方面中和性单克隆抗体可以作为分析确定PA的中和性表位的有力工具。对中和性表位的分析既有利于探索炭疽毒素致病机制,也可以为现有炭疽疫苗的使用和发展表位疫苗等新型炭疽疫苗提供理论依据。该文综述了炭疽芽孢杆菌中和性抗体的研究进展。
- 李冰李建民陈薇
- 关键词：炭疽芽孢杆菌炭疽毒素中和性抗体
