徐伟佳
- 作品数:4 被引量:13H指数:2
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶活性分析及其基因CDs区的克隆与表达被引量:1
- 2011年
- 【目的】研究陕南地区桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶基因,为构建高效分解纤维素的工程菌奠定基础。【方法】用质量分数为1%的羟甲基纤维素钠(CMC-Na)测定桑天牛幼虫内切β-1,4-葡聚糖酶活性,Trizol法提取桑天牛肠道总mRNA,扩增其内切β-1,4-葡聚糖酶基因,用DNAStar和NCBI上的BLAST进行序列分析。根据测序得到的基因序列设计1对引物,扩增桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶基因CDs区,构建原核表达载体pET-APEG,并在大肠杆菌中表达。【结果】桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶最适pH为4.4~5.6,pH值为5.0时酶活性最高;最适温度为30~50℃,50℃时酶活最高;酶液在37℃稳定性好,而在60℃的水浴中处理30 min,酶活性急剧下降。桑天牛内切β-1,4-葡聚糖酶基因CDs区长度为978 bp,编码325个氨基酸残基;BLAST结果显示,该基因序列与黄星天牛属于GHF5的纤维素酶基因序列相似性达85%,氨基酸序列相似性达90%,与已报道的桑天牛Ag-EaseⅢ的序列相似性达98%,氨基酸序列相似性达99%;构建原核表达载体pET-APEG在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,SDS-PAGE检测结果表明,诱导表达沉淀在约55 ku处有1条特异蛋白条带,与预测蛋白的分子量相符。【结论】陕南地区桑天牛β-1,4-葡聚糖酶为内切葡聚糖酶,属于GHF5家族,其可以在大肠杆菌中表达。
- 徐伟佳韩卫杰李旺陈玉林
- 关键词:桑天牛克隆
- 蚯蚓堆制处理对不同物料中4种酶活性的影响被引量:2
- 2009年
- 旨在研究蚯蚓堆置处理作用对纤维素、半纤维素、木质素降解的影响。采用室内接种的方法,用不同C/N的玉米秸秆与纯牛粪混合物为物料饲养赤子爱胜蚓(Eisenia foetida),以成蚓与幼蚓总数和物料中纤维素酶、木聚糖酶、过氧化物酶和多酚氧化酶的酶活性为检测指标。结果表明,接种蚯蚓的试验组比未接种蚯蚓的对照组能显著增强物料中4种酶的活性;接种蚯蚓的物料C/N为25时,成蚓与幼蚓总数、纤维素酶、过氧化物酶和多酚氧化酶的酶活性较其他组高,3种酶活性随时间逐渐增强;C/N为30时,木聚糖酶活性较其他组高,并随时间逐渐减弱。蚯蚓能在堆制处理过程中加速纤维素、半纤维素和木质素的降解;当C/N=25时,蚯蚓繁殖较好,比较有利于纤维素、半纤维素、木质素降解。
- 周颖陈泽光宦霞娟薛鹏徐伟佳马雄陈玉林
- 关键词:纤维素酶木聚糖酶过氧化物酶多酚氧化酶
- 赤子爱胜蚓堆制处理秸秆和牛粪混合废弃物的研究被引量:9
- 2009年
- 【目的】利用蚯蚓堆制处理碳氮比为20,25,30的小麦秸与牛粪、玉米秸与牛粪的组合,研究堆制过程中蚯蚓的生长繁殖及培养基的理化性状,以期为合理的利用秸秆提供理论依据。【方法】将牛粪和小麦秸秆、玉米秸秆按照碳氮比20,25,30搭配,按8ind/100g风干物质种蚯蚓后,在相同的条件下饲养,分别于15,30,45,60天时破坏性取样,测定蚯蚓的生长繁殖及培养基的理化性状。【结果】随着时间的增加,蚯蚓的均重、日增重、日繁殖倍数均降低,且不同时期、不同组合、不同碳氮比间均差异显著(P<0.05),蚯蚓总数先升高后降低。不同碳氮比之间的日生殖倍数间差异显著(P<0.05),以碳氮比25最佳,其次是20、30,但二者之间差异不显著(P>0.05)。有机碳含量和碳氮比随着时间的增加而降低,且不同时期、不同组合间差异显著(P<0.05);全氮含量随着时间的增加而增加,且不同时期和不同组合间差异显著(P<0.05)。【结论】时期和组合对蚯蚓的生长繁殖指标和培养基的理化性状指标都有显著的影响(P<0.05);以碳氮比20最有利于蚯蚓的生长,碳氮比25最有利于蚯蚓的繁殖;小麦与牛粪组合的生长繁殖均优于玉米与牛粪的组合。
- 陈泽光周颖马雄徐伟佳宦霞娟
- 关键词:赤子爱胜蚓牛粪秸秆
- 桑天牛纤维素酶基因CDS区的克隆及其在大肠杆菌中表达的研究
- 我国秸秆的年产量在7亿吨以上,其中用作动物饲料的约为20 %0 %。而动物对秸秆中纤维素的消化的能力较低,除反刍动物和单胃草食动物外,其他动物都无法有效利用纤维素,如何改善动物对纤维素的利用率成了人们关注的焦点。提高动物...
- 徐伟佳
- 关键词:纤维素酶桑天牛纤维素酶基因克隆
- 文献传递