张雪莲
- 作品数：14 被引量：9H指数：2
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金黑龙江省青年科学基金黑龙江省博士后基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鸭甲肝病毒3型广东分离株致病性及表达其VP1基因重组鸭肠炎病毒免疫效果的研究
- 鸭病毒性肝炎(DVH)是由鸭肝炎病毒(DHAV)引起的主要危害1月龄以内雏鸭的一种高度致死性疾病;DHAV分为DHAV-1、DHAV-2及DHAV-33个血清型;中国DVH主要由DHAV-1和DHAV-3引起;DHAV-...
- 张雪莲
- 关键词：分离株免疫效果
- 用于检测1型和3型鸭甲型肝炎病毒血清抗体的通用型间接ELISA试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种用于检测1型和3型鸭甲型肝炎病毒血清抗体的通用型间接ELISA试剂盒及其应用。本发明建立了一种基于VP0重组蛋白检测1型和3型DHAV血清抗体的通用型间接ELISA检测方法，该方法是以原核表达的1型DHA...
- 马波戚海惠刘悦张琪陈浩田常蕊张雪莲张文龙高明春王君伟
- 文献传递
- 鹅CD3ε链胞外区单克隆抗体及其在检测鹅CD3<Sup>+</Sup>T淋巴细胞中的应用
- 本发明公开了鹅CD3ε链胞外区单克隆抗体及其在检测鹅CD3<Sup>+</Sup>T淋巴细胞中的应用。以鹅胸腺cDNA为模板扩增得到鹅CD3ε基因，根据GoCD3ε胞外区基因特点，设计1对特异性引物扩增得到鹅CD3ε胞外...
- 马波张雪莲李洪涛高明春张文龙魏双施王君伟
- 文献传递
- 一种基于VP0蛋白检测DHAV(1型和3型)血清抗体的间接ELISA的建立及应用被引量：1
- 2020年
- 为建立一种快速检测鸭甲肝病毒(DHAV)1型和3型(DHAV-1、DHAV-3)血清抗体的方法,本研究诱导表达了DHAV-1、DHAV-3重组蛋白VP0、VP1、VP3,并采用ELISA方法比较了3者的反应原性,结果显示DHAV-1 VP0更适合作为检测DHAV-1、DHAV-3血清抗体的通用型诊断抗原。经各反应条件优化,建立了一种基于DHAV-1 VP0重组蛋白的可同时检测DHAV-1、DHAV-3血清抗体的间接ELISA方法。优化的主要反应条件为:抗原包被浓度为0.25μg/m L,待检血清稀释度为1100,山羊抗鸭HRP-IgG 1400稀释。该方法特异性较强,只与DHAV-1、DHAV-3阳性血清反应,与鸭源小鹅瘟病毒(GPV)、鸭病毒性肠炎病毒(DEV)、H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)等阳性血清均无交叉反应;敏感性为1320;批内变异系数小于4%,批间变异系数小于6%;与商品化的ELISA抗体检测试剂盒比较,二者阳性符合率为93.3%,阴性符合率为88.9%,总符合率为95.7%,且该方法可用于临床血清样本的检测。本研究为检/监测DHAV血清抗体水平提供了技术手段。
- 马波戚海惠张文晶陈浩田张琪常蕊刘悦张雪莲张桂红王君伟
- 关键词：ELISA免疫反应性
- 抗鹅CD4胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD4<Sup>+</Sup>T淋巴细胞中的应用
- 本发明公开了抗鹅CD4胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD4<Sup>+</Sup>T淋巴细胞中的应用。本发明利用携带鹅CD4胞外区的原核表达载体pET-30a-CD4ex，采用大肠杆菌Rosetta<Sup>TM...
- 王君伟曹春秋马波张雪莲高明春张文龙郝春雪崔嘉琦
- 文献传递
- 鹅CD3ε链胞外区蛋白单克隆抗体的制备及初步应用
- CD3分子是T淋巴细胞的重要表面标志,在抗原识别中,CD3分子起着信号传递的重要作用,许多疾病的研究中都以它作为检测的重要指标。制备可用于分选和测定鹅体内CD3+T细胞群的特异性单克隆抗体,有助于了解鹅细胞免疫的功能及状...
- 张雪莲
- 关键词：单克隆抗体淋巴细胞
- 文献传递
- 鹅CD3ε链胞外区单克隆抗体及其在检测鹅CD3<Sup>+</Sup>T淋巴细胞中的应用
- 本发明公开了鹅CD3ε链胞外区单克隆抗体及其在检测鹅CD3<Sup>+</Sup>T淋巴细胞中的应用。以鹅胸腺cDNA为模板扩增得到鹅CD3ε基因，根据GoCD3ε胞外区基因特点，设计1对特异性引物扩增得到鹅CD3ε胞外...
- 马波张雪莲李洪涛高明春张文龙魏双施王君伟
- 文献传递
- 鸭肠炎病毒SORF3基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 以鸭肠炎病毒(DEV)C-KCE株基因组DNA为模板,PCR扩增获得SORF3(S3)基因,在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLys系统中原核表达。S3重组蛋白经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示外源基因以包涵体形式表达为主,分子质量约为52ku。重组蛋白经Ni-NTA纯化后免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,琼脂扩散法测得抗体效价为1:4。经Western blotting分析制备的多克隆抗体具有较高的特异性,间接免疫荧光试验证实制备的多克隆抗体与DEV的SORF3编码产物反应性良好,为进一步研究DEVSORF3结构与功能特性奠定了基础。
- 母晓宇董井泉孟祥莉张雪莲马波王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒原核表达
- 用于检测1型和3型鸭甲型肝炎病毒血清抗体的通用型间接ELISA试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种用于检测1型和3型鸭甲型肝炎病毒血清抗体的通用型间接ELISA试剂盒及其应用。本发明建立了一种基于VP0重组蛋白检测1型和3型DHAV血清抗体的通用型间接ELISA检测方法，该方法是以原核表达的1型DHA...
- 马波戚海惠刘悦张琪陈浩田常蕊张雪莲张文龙高明春王君伟
- 文献传递
- 东北白鹅CD4基因的克隆及其胞外区的表达与抗血清的制备被引量：4
- 2014年
- 本研究根据GenBank公布的绿头鸭CD4(AF378701)基因序列设计引物,RT-PCR获得东北白鹅CD4基因。根据测序结果设计特异性引物,克隆得到东北白鹅CD4胞外区基因,并在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白获得表达,Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白,以纯化的重组蛋白为免疫原制备兔抗鹅CD4胞外区抗血清。I-ELISA、Western blot和流式细胞仪分析表明抗血清可特异识别重组蛋白以及分离获得的东北白鹅外周血T淋巴细胞,间接免疫荧光试验证实纯化的抗血清可特异性识别瞬时真核表达的鹅CD4胞外区蛋白。以上结果说明制备的抗血清可作为鹅CD4+T淋巴细胞的检测试剂。
- 张雪莲魏双施邵建伟母晓宇高明春张文龙马波王君伟
- 关键词：东北白鹅CD4基因表达T淋巴细胞
