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文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 3篇会议论文
  • 1篇学位论文

领域

  • 5篇生物学
  • 5篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 2篇肿瘤
  • 2篇羧肽酶
  • 2篇羧肽酶B
  • 2篇绿脓杆菌外毒...
  • 2篇克隆表达
  • 2篇复性
  • 2篇复性研究
  • 2篇靶向
  • 2篇IL-4
  • 2篇纯化
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白水解
  • 1篇蛋白水解酶
  • 1篇地塞米松
  • 1篇胰岛
  • 1篇胰岛素
  • 1篇脂联素
  • 1篇受体
  • 1篇水解酶

机构

  • 7篇中国科学院上...
  • 4篇华东理工大学

作者

  • 7篇张育坚
  • 5篇李素霞
  • 3篇杨胜利
  • 3篇龚毅
  • 2篇胡小波
  • 2篇田丽萍
  • 1篇陈霞
  • 1篇沈雁
  • 1篇田丽平

传媒

  • 2篇生物工程学报
  • 1篇医学分子生物...
  • 1篇2003年全...
  • 1篇2004年全...
  • 1篇中国药学会学...

年份

  • 1篇2005
  • 5篇2004
  • 1篇2003
9 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
重组活性羧肽酶B在胰岛素原C肽制备工艺中的应用
用RT-PCR方法克隆了大鼠羧肽酶原B的cDNA编码序列,将其重组到原核表达质粒pT7-473中,并在大肠杆菌中可以包涵体方式获得高表达,SDS-PAGE电泳及灰度扫描显示表达量达菌体总蛋白的35﹪,表达产物融合了表达质...
李素霞张育坚田丽萍刘海峰张晓彦夏文超龚毅袁勤生
关键词:羧肽酶原B羧肽酶B分离纯化基因工程
文献传递
肿瘤细胞靶向性白细胞介素4(IL-4)融合蛋白的研究(英文)被引量:1
2004年
白细胞介素 4受体 (IL 4R)特异地存在于多种肿瘤细胞表面 ,这为某些肿瘤的治疗提供了一个靶向标记。在以前的研究中 ,人白细胞介素 4 (hIL 4 )与白喉毒素 (DT)的融合蛋白 (DT4H)被构建 ,且它对某些肿瘤细胞系的高毒性得到了证明。但是 ,由于毒素部分的强免疫原性 ,它可以诱导人体的免疫反应。该研究中我们构建了白细胞介素 4与绿脓杆菌外毒素 (PE) 2 5 3~ 6 0 8aa的融合蛋白 ,并在其N端添加了 6×His标记方便纯化 ,在其C端添加了KDEL提高毒性。为了改善与IL 4R的亲和力我们将IL 4进行了环式重组 ,构建的融合毒素 ,H4 0 4K ,经DEAE$CSepharoseFastFlow及Ni NTA纯化后 ,纯度达 90 %。纯化后的H4 0 4K与DT4H相似 ,对U2 5 1高度敏感 ,对MCF 7及HepG2中度敏感 ,且我们首次证实该毒性不会被兔抗白喉毒素的多克隆抗体所抑制。这些研究表明 ,H4 0
张育坚胡小波李素霞田丽萍杨胜利龚毅
关键词:绿脓杆菌外毒素肿瘤治疗白细胞介素4白细胞介素4受体
重组活性羧肽酶B的克隆表达及复性研究
羧肽酶B(carboxypeptidaseB,CPB,EC3.4.17.2)是一种含锌的胰外肽酶,特异的水解肽链C端的碱性氨基酸:精氨酸,赖氨酸或鸟氨酸,CPB含307个氨基酸,分子质量35ku。 本文研究,天...
李素霞张育坚夏文超龚毅袁勤生
关键词:羧肽酶B克隆表达
文献传递
重组活性羧肽酶B的克隆表达及复性研究
羧肽酶B(carboxypeptidase B,CPB,EC 3.4.17.2)是一种含锌的胰外肽酶,特异的水解肽链C端的碱性氨基酸:精氨酸,赖氨酸或鸟氨酸,CPB含307个氨基酸,分子质量35ku.天然存在的CPB是由...
李素霞张育坚夏文超龚毅袁勤生
关键词:克隆表达蛋白水解酶基因克隆表达
文献传递
胰岛素、地塞米松、肿瘤坏死因子α能调节脂联素的表达和分泌被引量:6
2005年
目的通过体外培养的3T3-L1脂肪细胞模型,研究胰岛素、地塞米松和肿瘤坏死因子α(TNFα)对脂肪细胞因子脂联素(Acrp30)的mRNA表达和蛋白分泌的影响。方法用150nmol/L胰岛素、100nmol/L地塞米松和10ng/ml TNFα刺激分化完全的3T3-L1细胞16h,提取细胞RNA,运用半定量RT-PCR技术检测Acrp30mRNA表达量的变化;另外,用同样浓度的胰岛素、地塞米松和TNFα刺激分化完全的3T3-L1细胞1、2、4、16h,用Western印迹技术检测Acrp30分泌的变化。结果胰岛素、地塞米松和TNFα均能下调Acrp30mRNA的表达;地塞米松和TNFα减少Acrp30的蛋白分泌;而胰岛素仅能瞬时刺激Acrp30的蛋白分泌,作用时间超过4h对Acrp30的分泌并无影响。结论血浆脂联素蛋白浓度在翻译后水平被调节,包括翻译和(或)分泌水平。
胡小波张育坚陈霞沈雁杨胜利龚毅
关键词:胰岛素地塞米松分泌脂联素肿瘤坏死因子Α3T3-L1细胞
人胰岛素原C肽的表达、纯化及其细胞活性研究被引量:2
2004年
近年来研究发现人胰岛素原C肽 (简称C肽 )有多种生物活性 ,在治疗糖尿病的并发症中有潜在的应用价值。在前期研究中 ,完成了多拷贝串联C肽基因的构建和融合表达 ,在原核中获得了高表达。用发酵的方法大规模表达融合蛋白C肽 (FCP) ,由Ni NTA柱亲和纯化获得的蛋白经胰蛋白酶和羧肽酶B的酶解及RP HPLC分离获得了纯度超过 95 %的C肽单体。细胞活性研究显示它对U2 5 1、2
田丽平张育坚李素霞杨胜利龚毅
关键词:C肽糖尿病
肿瘤细胞特异性IL-4靶向融合蛋白的研究
基因工程技术的革命使得人类能充分的改造蛋白,使其更好的为人类服务.在该研究中我们将环形重组的IL-4(cpIL-4)与缺失天然结合区的白喉毒素(DT389)融合构建了靶向毒素DT4H,为了方便纯化,我们在其末端融合了Hi...
张育坚
关键词:IL-4白喉毒素绿脓杆菌外毒素UPA肿瘤靶向治疗
文献传递
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